1、細胞工程,植物組織培養(yǎng),植物體細胞雜交,動物細胞培養(yǎng),動物細胞融合,單克隆抗體技術,胚胎移植,核移植,植物細胞工程技術,動物細胞工程技術,所采用技術的理論基礎,植物細胞工程,通常采用的技術手段,植物組織培養(yǎng),植物體細胞雜交,植物細胞的全能性,植物組織培養(yǎng),動物細胞培養(yǎng),燒傷病人的治療通常是取燒傷病人的健康皮膚進行自體移植，但對于大面積燒傷病人來講，健康皮膚很有限，請同學們想一想如何來治療該病人？,許多動物的細胞能夠分泌蛋白質,如抗體等.但是,單個細胞產生的蛋白質量是很少的,怎樣才能獲得大量的分泌蛋白呢?,一、動物細胞培養(yǎng)條件 P46,1、無菌、無毒的環(huán)境 （添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）

2、 2、營養(yǎng) （葡萄糖、氨基酸、微量元素、無機鹽、促生長因子、動物血清、血漿等。） 3、溫度和PH 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4 4、氣體環(huán)境： O2和CO2（95%空氣和5% CO2 ）,保證細胞順利的生長增殖,二、動物細胞培養(yǎng)概念 P44,1、概念： 2、目的： 3、理論基礎：,細胞增值,獲得細胞和細胞產物,就是從動物機體內取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。,三、動物細胞培養(yǎng)過程 P44-46,動物胚胎或幼齡動物的組織、器官,胰蛋白酶,單個細胞,加培養(yǎng)液,制成,細胞懸浮液,原代培養(yǎng),細胞增殖,去掉組織間蛋白,傳代培養(yǎng),胰蛋白酶,

3、10代細胞,50代細胞,50代以后,三、動物細胞培養(yǎng)過程：,四、動物細胞培養(yǎng)技術的應用 P47,大規(guī)模生產有重要價值的生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等 為基因工程提供受體細胞 用于檢測有毒物質，判斷某種物質的毒性 科學家培養(yǎng)正常或各種病變的細胞，用于生理、病理、藥理等方面的研究。,獲得細胞或細胞產物,細胞的全能性,植物體,培養(yǎng)結果,快速繁殖、培育無病毒植株等,培養(yǎng)目的,葡萄糖、動物血清,蔗糖、植物激素,培養(yǎng)基特有成分,液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基性質,細胞增殖,原理,動物細胞培養(yǎng),植物組織培養(yǎng),比較項目,植物細胞和動物細胞培養(yǎng)的比較,細胞群體,1、動物細胞培養(yǎng)的正確過程是 A原代培

4、養(yǎng)傳代培養(yǎng)細胞株細胞系 B原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細胞系細胞株 C傳代培養(yǎng)細胞系原代培養(yǎng)細胞株 D原代培養(yǎng)細胞系傳代培養(yǎng)細胞株,2、動物細胞培養(yǎng)與植物細胞培養(yǎng)的重要區(qū)別在于 A 培養(yǎng)基不同 B 動物細胞培養(yǎng)不需要在與菌條件下進行 C 動物細胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細胞不能 D 動物細胞能大量培養(yǎng)，而植物細胞只能培養(yǎng)成植株,3、下列有關動物細胞培養(yǎng)的敘述，正確的是 A 動物細胞培養(yǎng)的目的是獲得大量的細胞分泌蛋白B 細胞遺傳物質的改變發(fā)生于原代培養(yǎng)過程中C 在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液 D 動物細胞培養(yǎng)液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、生長素和動物血清等,4、動物細胞培養(yǎng)技術的

5、用途有 生產有價值的生物制品，如病毒疫苗、干擾素等 生產基因工程技術中所用的受體細胞可以用于檢測有毒物質培養(yǎng)的各種細胞可直接用于生理、病理、藥理等方面的研究 A B C D,(1)容器A中放置的是動物器官或組織。它一般取自 (2)容器A中的動物器官或組織首先要進行的處理是， 然后用酶處理，這是為了使細胞分散開來。這 樣做的目的是 (3)培養(yǎng)首先在B瓶中進行，這時的細胞培養(yǎng)稱為。 (4)為了把B瓶中的細胞分裝到C瓶中，用處 理，然后配置成，再分裝。 (5)有少數(shù)的細胞能存活下來，繼續(xù)傳下去，一般能傳到4050 代，這種傳代細胞叫做。這種細胞的遺傳物質與前面的細胞（相同，不同）。 （6）這種細胞傳

6、至50代后一般不能再傳，但有少數(shù)細胞遺傳物質發(fā)生改變，帶有 細胞的特征，有可能在培養(yǎng)條件下無限制的傳下去。,胚 胎或幼齡動物組織器官,剪碎,胰蛋白,使每個細胞都能與培養(yǎng)液接觸,原代培養(yǎng),胰蛋白酶,懸浮液,細胞株,相同,癌,動物體細胞核移植技術和克隆動物,動物體細胞核移植概念:,將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新胚胎最終發(fā)育成動物個體。 用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物,核移植,胚胎細胞核移植,體細胞核移植（難度高）,受體細胞：M期的卵母細胞,、動物的克隆與植物克隆一樣嗎？,不,、用動物體細胞進行克隆的過程,其實際操作過程是什么

7、？,動物克隆過程的實際是細胞核移植,、閱讀課本P48，簡述高產牛體細胞核移植過程,思考題,、核在進行體細胞核移植之前，為何要去掉受體卵母細胞的核？,為使核移植動物的遺傳物質全部來自有利用價值的動物提供的細胞。,、用于核移植的供體細胞一般都選用傳代10代以內的細胞，為什么？,10代以內的細胞保持一般保持正常二倍體的核型，未突變,3、細胞核移植生產的克隆動物是對體細胞供體動物進行了100%的復制嗎？為什么？,不是，克隆動物絕大部分DNA來自供體細胞核，但核外還有少部分DNA（如線粒體DNA）來自受體卵母細胞,克隆動物的研究意義,1.克隆動物作為生物反應器，生產醫(yī)用蛋白 2.改良動物品種 3.治療人

8、類疾病，作為供體 4.保護瀕危動物,體細胞核移植技術存在的問題：,許多克隆動物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷，如體型過大，異常肥胖，發(fā)育困難，臟器缺陷，免疫失調等。,動物細胞融合與單克隆抗體,如果將牛的細胞與植物細胞雜交，得到綠色的小奶牛，那豈不是只要曬曬太陽就可以擠出牛奶啦！,動物細胞也能融合嗎？,動物細胞融合 1.定義： 2.原理： 3.融合方法： 4.意義： 5.應用：,細胞膜具有流動性,生產單克隆抗體,1、動物細胞融合過程,不同DNA的兩個細胞,滅活病毒誘導細胞融合,融合后的細胞進行有絲分裂,主要用于制備,單克隆抗體,獲得雜種植株,用途,物理、化學方法,（同左）,滅活的病毒,物理（離心、振動、電

9、刺激）,化學（聚乙二醇）,誘導方法,使細胞分散后誘,導細胞融合,去除細胞壁后誘,導原生質體融合,細胞融合的方法,細胞膜的流動性,細胞膜的流動性、,植物細胞全能性,原理,動物細胞融合,植物體細胞雜交,比較項目,植物、動物細胞融合的比較,設計方案： 一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體 小鼠骨髓瘤細胞能無限增殖,如何獲得化學性質單一、特異性強的抗體？,雜種細胞,二、單克隆抗體,1.傳統(tǒng)獲取抗體方法： 缺點：,反復注射，血清中獲取,動物細胞融合技術,B 、BB 、B瘤 、瘤瘤 、瘤,只有雜交細胞才能活,動物細胞培養(yǎng),單克隆抗體制備過程,獲得產生相應抗體的B淋巴細胞,2.制備過程： 獲取效應B細胞，骨髓瘤細胞 通過什么方法獲得效應B細胞？怎樣能得到足夠多的骨髓瘤細胞？ 人工誘導融合：關鍵： 方法： 結果： 用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞 此細胞特點：,體外進行細胞培養(yǎng),膜的融合,BB B B瘤 瘤瘤 瘤,迅速大量增