ICS6502001

B16..

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T36845—2018

柑橘頑固病螺原體檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofSpiroplasmacitriSaglioetal

2018-09-17發(fā)布2019-04-01實(shí)施

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T36845—2018

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位中華人民共和國(guó)南海出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和國(guó)廣東出入境檢驗(yàn)檢

:、

疫局中華人民共和國(guó)山東出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和國(guó)煙臺(tái)出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和

、、、

國(guó)湖南出入境檢驗(yàn)檢疫局

。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人談珺李凱兵劉海軍張京宣李金慶周慧平劉曉紅李賀

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T36845—2018

柑橘頑固病螺原體檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了進(jìn)境植物檢疫中柑橘頑固病螺原體Spiroplasmacitri的檢疫鑒定方法

Saglioetal。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于進(jìn)出境中的葡萄柚檸檬橘子橙和酸性橙等柑橘屬植物種果苗木及昆蟲介體等柑

、、、,

橘頑固病螺原體的檢疫鑒定

。

2基本信息

中文名柑橘頑固病螺原體

:

學(xué)名Spiroplasmacitri

:Saglioetal

英文名

:Critusstubborndisease,Littleleafdiseaseofcitrus,Stubborndiseaseofcitrus

英文縮寫

:CSD

分類地位屬植物支原體類病原細(xì)菌域柔壁菌門柔膜菌綱蟲

:,(Bacteria),(Tenericutes),(Mollicutes),

原體目螺原體科螺原體屬Spiroplasma

(Entomoplasmatales),(Spiroplasmataceae),()。

柑橘頑固病螺原體的其他信息參見附錄

A。

3方法原理

根據(jù)柑橘頑固病螺原體的生物學(xué)特性特異性引物擴(kuò)增及序列測(cè)定結(jié)果熒光定量檢測(cè)

、PCR,PCR

結(jié)果確定病原物種類

。

4儀器設(shè)備和主要試劑

41主要儀器設(shè)備

.

普通儀熒光儀超凈工作臺(tái)滅菌鍋制冰機(jī)核酸蛋白分析儀高速冷凍離心機(jī)臺(tái)式

PCR、PCR、、、、、、

小型離心機(jī)超低溫冰箱常規(guī)冰箱旋渦震蕩器微量進(jìn)樣器電泳儀凝膠成像系統(tǒng)顯微鏡

、、、、、、、。

42主要試劑和培養(yǎng)基

.

除另有規(guī)定外所有試劑均為分析純緩沖液GoTaq

,。PCR、dNTPs(dATP、dTTP、dCTP、dGTP)、

聚合酶引物和探針

DNA、。

檢驗(yàn)中用到的培養(yǎng)基配制方法見附錄

LD8D。

5檢測(cè)鑒定方法

51癥狀觀察

.

仔細(xì)觀察