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文檔簡介
1、艾滋病檢測技術和應用,北京市出入境檢驗檢疫局艾滋病確認中心實驗室,HIV檢測的病毒學基礎,人類免疫缺陷病毒human immuno deficiency virus HIV,HIV感染細胞過程動畫演示,HIV的主要結構基因及其抗原,HIV-1具有高度的可變性,逆轉錄酶保真度每個復制周期生成基因序列徐璐其他HIV獨奏(通常稱為準品種Quasi Species)的混合物,HIV-1具有高度的可變性,據估計HIV-1每一代的平均時間約為2.5天。這意味著從HIV感染到診斷AIDS,每年復制140多臺病毒的速度更新了數千代。HIV的類型和亞型、HIV、HIV-1、HIV-2、o、m、A、B、C、d、E
2、、f、G、H、I、j CRF 01-。 C CRF09_cpx 96GH2911尚未發(fā)布CRF10_CD TZBF061 C、D CRF11_cpx GR17 A,F(xiàn)crf13 _ cpx96cm1849a、crf01 _ AE、G、G mu 2079 CRF 01 _ AE B CRF 16 _ A2D kisii 5009 A2,d循環(huán)重組病毒(CRF),全國第二HIV分子流動不同的轉移路徑HIV-1亞型分布,待檢查3333檢查的樣本:血清和血漿、唾液、尿液、檢查HIV抗體(ELISA法),原則3360間接法(第一代)雙抗原三明治法(第三代試劑)。判斷結果有客觀依據(閾值)??勺詣踊僮鳈z
3、測多種標本(血清、血漿、唾液、尿液)是最廣泛使用的方法,為了確保HIV ELISA試劑發(fā)展、抗原重組或合成多肽HIV-1/特異性,無需過度稀釋標本,提高敏感性。特異性是雙特異性HIV抗原的保證。,同時檢測P24抗原和HIV抗體,第4代試劑包裝和標記的分別是P24抗原的單克隆抗體,HIV-1G P160,HIV-1O GP41,HIV-2GP36。分別為P24抗原、HIV-1 M組、HIV-1M組方法學:ELISA抗體三明治法,比抗體檢出時間提前約一周,用于早期用途3360個嬰兒或早期HIV感染診斷的獻血者選擇監(jiān)測效果和病程進行, 排除超體假陽性的多種茄子方法,例如免疫印跡法(WB)、免疫熒光法
4、(IFA)和放射免疫沉積法,得出不同HIV抗原的抗體結論3360 HIV抗體陽性(Positive)、HIV抗體陰性(Negative)、HIV陰性(Negative) 超體試劑敏感性必須好。去除假陽性確認,確認真質子。確認試劑要有高度的特異性。HIV抗體確認標準,陽性: 2個env帶或env帶1個p24對女性3360,沒有條帶:必須至少有一個帶,但陽性標準未吸入HIV抗體不確定性,原因: HIV感染早期非特異性反應,其他致病源交叉反應在正常人的高發(fā)病率HIV()、HIV抗體(-) HIV陽性母親的嬰兒:母體中的HIV抗體、可能的HIV(-)、HIV抗體(-)使用病毒本身的檢測方法3360P2
5、4。出生后從母體被動獲得的HIV抗體,診斷新生兒的HIV感染依靠抗體檢查渡邊杏。出生大約12個月后,來自母親的抗體消失,新生兒自身基于免疫系統(tǒng)的抗體,新生兒開始出現(xiàn)。只有在18個月后,才能用抗體檢查方法診斷。通過病毒學檢查方法,可以早期診斷嬰兒HIV感染。HIV DNA PCR實驗是診斷嬰兒HIV感染的第一種方法,38感染的孩子出生48小時后可能出現(xiàn)HIV DNA PCR牙齒陽性。出生后兩周,檢查靈敏度大幅提高,14日陽性率達到93。28日陽性率為96,特異性(約99)牙齒高,HIV-1病毒負荷(Viral Load) HIV-1病毒負荷顯示體內克隆的病毒數通常是血漿HIV RNA的拷貝數。抗
6、病毒治療目的、反應水平、月、月測試限制、病毒負荷測量的意義、疾病預測過程:高病毒負荷可以預測疾病過程的快速發(fā)展監(jiān)測療效:牙齒何時開始治療和治療效果。有效的抗病毒治療應該能大大減少病毒負荷HIV急性感染的輔助診斷。有效的抗病毒治療28周病毒負載1個log以上1624周病毒負載減少可能會降至最低測試限制以下。否則,應考慮改變治療方案、常用病毒負載測量方法、分支DNA信號放大系統(tǒng)HIV-1 Quantiplex (bDNA)逆轉錄PCR系統(tǒng)AMP Licor HIV-1顯示器(RT-PCR)核酸序列放大系統(tǒng)Nuclisens HIV 廣泛的FDA批準應用提取和純化,需要組織及體液不足檢測時間,臨床穩(wěn)定患者每日病毒負荷量的自然變化約為0.3 0.4個日志(2 2.5倍)
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