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文檔簡介

1、實驗七 CH50,實驗原理,補體與抗體（溶血素）致敏的綿羊紅細胞接觸后，被激活（C1途徑），從而使致敏的SRBC溶解，其溶血程度與補體量呈正比。 溶血程度在3070%范圍內(nèi)，補體量稍有變動即能影響溶血程度。在50%溶血時，其 溶血程度與補體的量關(guān)系最敏感。故以50%溶血度作為反應(yīng)的終點指標，可測知補體總?cè)苎钚?。?0%溶血判斷結(jié)果比100%溶血靈敏、準確。,原理： 溶血素+SRBC 溶血,補體,實驗材料,1. 待檢血清 2. BB應(yīng)用液（ pH7.4巴比妥緩沖液） 3. 2%SRBC懸液 4. 2u/ml溶血素（anti-SRBC） 5. 37水浴箱、離心機、分光光度計、試管、吸管等,實驗方

2、法,1、1：20稀釋血清或血漿：0.2ml血漿+3.8mlBB液 2、50%溶血標準管制備： 2%SRBC懸液0.5ml+D.W4.5ml即可。 3、按下表所示加入各試劑（單位：ml）。 試管編號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1:20稀釋血清0.1 0.15 0.2 0.250.3 0.35 0.4 0.45 0.5 BB應(yīng)用液1.4 1.35 1.3 1.251.2 1.15 1.1 1.05 1.0 1.5 2u/ml溶血素 每管加入0.5 2%SRBC 每管加入0.5 混勻，將試管置于37水浴30min，2500r/min5min離心，觀察結(jié)果。 CH50（u/ml） 200 133 100 80 66.5 57.1 50 44.4 40 ,結(jié)果判斷,1、對照管不溶 2、目視比較，最接近標準管的一管。 根據(jù)U管中加入的血清量，求出總補體值。 補體活性（u/ml）= 稀釋倍數(shù)（20） 3、無法目測的，用722在542nm處讀T值，也可。,1,血清量（ml）,臨床意義,正常參考值：50100u/ml 升高：急性炎癥、組織損傷、腫瘤、 骨髓瘤等。 降低：多見于與免疫有關(guān)的疾病，因病程中免疫應(yīng)答消

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