1、 4/4培養(yǎng)基適用性檢查規(guī)程頒發(fā)部門質(zhì)量管理部頒發(fā)日期年月日編 號SOPQC10501生效日期年月日編 寫 人編寫日期年月日審 核 人審核日期年月日批 準(zhǔn) 人批準(zhǔn)日期年月日分發(fā)部門QA、QC部門備注目的：建立一個培養(yǎng)基的靈敏度檢查，確保培養(yǎng)基性能可靠。范圍：適用于微生物檢驗(yàn)。責(zé)任：微生物檢驗(yàn)員。 依據(jù)：中國藥典2010年版一部附錄、2010版GMP實(shí)施指南規(guī)程：1.不應(yīng)在同一無菌室內(nèi)同時操作2個或2個以上菌株。2.菌株傳代次數(shù)不得超過5代（以菌種保存中心獲及的冷凍干燥菌種為第0代）。一、計(jì)數(shù)培養(yǎng)基的適用性檢查1、菌液制備 取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物少許接種至營養(yǎng)肉湯

2、或營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，30-35培養(yǎng)18-24h；取白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物接種至改良馬丁培養(yǎng)基或改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基中，培養(yǎng)2448小時，取上述培養(yǎng)物，用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)為50-100cfu（菌落形成單位）的菌懸液。 菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在兩小時內(nèi)使用；若保存在2-8，可在24小時內(nèi)使用。2、適用性檢查 取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌各1ml（50-100cfu）,分別注入無菌平皿中，立刻注入待檢查營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和對照營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備4個平皿（其中2個注入待檢查營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，另兩個注入對照營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基）。30-35培養(yǎng)48h，計(jì)數(shù)。

3、 取白色念珠菌1ml（50-100cfu）,注入無菌平皿中，立刻注入待檢查玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基和對照玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，平行制備4個平皿（其中2個注入待檢查玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，另兩個注入對照玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基）。23-28培養(yǎng)72h，計(jì)數(shù)。3、結(jié)果判斷若被檢培養(yǎng)基上的菌落數(shù)不小于對照培養(yǎng)基上的菌落數(shù)的70%，且菌落大小、形態(tài)兩者一致，判斷該培養(yǎng)基的適用性檢查符合規(guī)定。二、控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查1.菌液制備 取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、乙型副傷寒沙門菌的新鮮培養(yǎng)物少許接種至營養(yǎng)肉湯或營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，30-35培養(yǎng)18-24h；取白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物接種至改良馬丁培養(yǎng)基或改良馬丁瓊脂培

4、養(yǎng)基中，培養(yǎng)2448小時，取上述培養(yǎng)物，用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數(shù)為10-100cfu、每1ml50-100cfu和每1ml大于100cfu（菌落形成單位）的菌懸液。 菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在兩小時內(nèi)使用；若保存在2-8，可在24小時內(nèi)使用。2、適用性檢查 控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查項(xiàng)目包括促生長能力、抑制能力及指示能力的檢查。(1)、液體培養(yǎng)基促生長能力檢查，分別接種不大于100cfu的試驗(yàn)菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及最短培養(yǎng)時間下培養(yǎng)。（2）、固體養(yǎng)基促生長能力檢查，取試驗(yàn)菌各0.1ml（50-100cfu）分別涂布于被檢培養(yǎng)基和

5、對照培養(yǎng)基平板上，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及最短培養(yǎng)時間下培養(yǎng)。（3）培養(yǎng)基抑制能力檢查，接種不少于100cfu的試驗(yàn)菌于檢培養(yǎng)基中，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及最長培養(yǎng)時間下培養(yǎng)。（4）固體培養(yǎng)基指示能力檢查，取試驗(yàn)菌各0.1ml（10-100cfu）分別涂布于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及培養(yǎng)時間下培養(yǎng)。（5）液體培養(yǎng)基指示能力檢查，別接種不大于100cfu的試驗(yàn)菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及最短培養(yǎng)時間下培養(yǎng)。各培養(yǎng)基的檢測項(xiàng)目及菌株如表?？刂凭鷻z查用培養(yǎng)基的促生長能力、抑制能力及指示能力檢查控制菌檢查培養(yǎng)基特性試

6、驗(yàn)菌株大腸埃希菌膽鹽乳糖培養(yǎng)基促生長能力抑制能力大腸埃希菌金黃色葡萄球菌MUG促生長能力指示能力大腸埃希菌曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基促生長能力指示能力大腸埃希菌大腸菌群乳糖膽鹽培養(yǎng)基促生長能力抑制能力大腸埃希菌金黃色葡萄球菌乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基促生長能力指示能力大腸埃希菌曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基促生長能力指示能力大腸埃希菌沙門菌營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基促生長能力乙型副傷寒沙門菌四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基促生長能力抑制能力乙型副傷寒沙門菌金黃色葡萄球菌沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基促生長能力指示能力乙型副傷寒沙門菌曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基促生長能力指示能力乙型副傷寒沙門菌三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基指示能力乙型副傷寒沙門菌白色念珠菌沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基促生長能力白色念珠菌沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基促生長能力指示能力白色念珠菌3、結(jié)果判斷（1）液體培養(yǎng)基促生長能力檢查：于對照培養(yǎng)基管比較，被檢培養(yǎng)基管試驗(yàn)菌生長良好，判斷該培養(yǎng)基的適用性檢查符合規(guī)定。（2）固體養(yǎng)基促生長能力檢查：菌落大小、形態(tài)兩者一致，判斷該培養(yǎng)基的適用性檢查符合規(guī)定。（3）培養(yǎng)基抑制能力檢查：試驗(yàn)菌不生長，判斷該培養(yǎng)基的適用性檢查符