1、變酸？,巴斯德,法國(guó)，微生物學(xué)家,失敗的原因：發(fā)酵物中混入了雜菌,課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng),了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí)，進(jìn)行無菌技術(shù)的操作，進(jìn)行微生物的培養(yǎng)。,一.課題目標(biāo),無菌技術(shù)的操作。,二.課題重難點(diǎn),1.何為培養(yǎng)基？,3.各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但其基本成分都相同，都包括哪些營(yíng)養(yǎng)成分？,自主學(xué)習(xí):,2.按照物理形態(tài)、化學(xué)成分、用途分，培養(yǎng)基的種類有哪些？,基礎(chǔ)知識(shí),(一)培養(yǎng)基,人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。,(一)培養(yǎng)基,1.概念：,2.類型及應(yīng)用：,液體培養(yǎng)基 固體培養(yǎng)基,據(jù)物理性質(zhì)分,天然培養(yǎng)基 合成培養(yǎng)基,據(jù)化學(xué)成分分,選擇培養(yǎng)基 鑒別培養(yǎng)

2、基,據(jù)用途分,2.類型及應(yīng)用：,(一)培養(yǎng)基,常用于工業(yè)生產(chǎn),用于微生物的分離、鑒定、計(jì)數(shù),加瓊脂,常用于工業(yè)生產(chǎn),常用于分類、鑒定,培養(yǎng)、分離出特定微生物,鑒別不同種類的微生物,在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng)。,根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品配制而成。,液體培養(yǎng)基：,表面生長(zhǎng),均勻混濁生長(zhǎng),沉淀生長(zhǎng),練習(xí),下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述正確的是（ ） A.培養(yǎng)基是為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供營(yíng)養(yǎng)的基質(zhì) B.培養(yǎng)基只有兩類：固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基 C.固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基 D.微生物在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)，可以形成肉

3、眼可見的單個(gè)細(xì)菌,A,要從多種細(xì)菌中分離某種細(xì)菌，培養(yǎng)基要用（ ） A.固體培養(yǎng)基 B.液體培養(yǎng)基 C.加入青霉素的培養(yǎng)基 D.加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基,A,練習(xí),碳源,氮源,無機(jī)鹽,水,(一)培養(yǎng)基,3.營(yíng)養(yǎng)要素,還需滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。,如:生長(zhǎng)因子(即細(xì)菌生長(zhǎng)必需，而自身不能合成的化合物,如維生素、某些氨基酸、堿基),牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方,牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0g NaCl 5.0g 將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容至1000ml。,配方中的各成分為微生物提供了哪些營(yíng)養(yǎng)？,(一)培養(yǎng)基,3.營(yíng)養(yǎng)要素：,碳源、氮源、 磷酸鹽和維生素,氮源和維生素,無

4、機(jī)鹽,H、O,對(duì)異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源。即有些化合物作為營(yíng)養(yǎng)要素成分時(shí)并非單一方面的作用。 并非所有微生物都需添加特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),碳源、氮源、生長(zhǎng)因子的比較,凡能提供所需碳元素的物質(zhì),凡能提供所需氮元素的物質(zhì),生長(zhǎng)必不可少的微量有機(jī)物,構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有些還是異養(yǎng)生物的主要能源物質(zhì),合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物,酶、核酸等的組成成分,分離酵母菌、霉菌等真菌,分離金黃色葡萄球菌,分離固氮菌,分離自養(yǎng)型微生物,下列敘述錯(cuò)誤的是（ ） A.培養(yǎng)乳酸菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素 B.培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基中的pH調(diào)至堿性 C.培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性

5、 D.培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供無氧的條件,B,練習(xí),1、何為無菌技術(shù)？無菌技術(shù)包括哪些方面？ 2、消毒和滅菌的區(qū)別？ 3、常用的消毒方法有哪些？ 4、常用的滅菌方法有哪些？,自主學(xué)習(xí)：,(二)無菌技術(shù),1.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵：,防止外來雜菌的入侵,2.無菌技術(shù)包括：,對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒； 用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌； 為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行； 實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍物品接觸。,(二)無菌技術(shù),P15思考題,練習(xí),下列操作與無菌技術(shù)無關(guān)的是（ ） A.接種前用肥皂洗雙手，再用酒精

6、擦拭雙手 B.接種前用火焰燒灼接種針 C.培養(yǎng)基在50 左右時(shí)擱置斜面 D.在酒精燈火焰旁邊完成,C,消毒 使用較為溫和的物理或化學(xué)方法，殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。,3.消毒與滅菌,滅菌,使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。,理化因素的作用強(qiáng)度,消滅微生物的數(shù)量,芽孢和孢子能否被消滅,(1)定義,1、煮沸消毒法: 100煮沸5-6min，日常生活中廣泛應(yīng)用 2、巴氏消毒法： 70-75 煮30min或80煮15min，牛奶、啤酒等不宜進(jìn)行高溫消毒的 3、化學(xué)藥劑消毒法: 75%酒精、氯氣、石炭酸、煤酚皂溶液等 4、紫外線消毒法： 用于接種室空氣

7、消毒 ,(2)消毒的方法：,3.消毒與滅菌,1、灼燒滅菌： 用于微生物接種工具，如：接種環(huán)、接種針或其他金屬用具等，及接種過程中試管口或錐形瓶口的滅菌,(3)滅菌的方法：,3.消毒與滅菌,2、干熱滅菌： 160-170 下加熱1-2h。 用于玻璃器皿、金屬用具等能耐高溫、需保持干燥的物品。 3、高壓蒸氣滅菌： 100kPa、121 下維持 15-30min. 廣泛用于培養(yǎng)基及多種器材、物品。,(3)滅菌的方法：,3.消毒與滅菌,P16 請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法。 （1） 培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿 （2） 玻棒、試管、燒瓶和吸管 （3） 實(shí)驗(yàn)操作者的

8、雙手,答：（1）（2）需要滅菌；（3）需要消毒。,旁欄思考,練習(xí),細(xì)菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理方法，這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌（ ） A.接種針、手、培養(yǎng)基 B.高壓鍋、手、接種針 C.培養(yǎng)基、手、接種針 D.培養(yǎng)基、手、高壓鍋,C,變形題,培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌、消毒方法依次是（ ） 化學(xué)消毒 灼燒滅菌 干熱滅菌 紫外線消毒 高壓蒸汽滅菌 巴氏消毒法 A. B. C. D. ,A,練習(xí),外科手術(shù)器械和罐頭食品的處理，要以能夠殺死什么為標(biāo)準(zhǔn)（ ） A.球菌 B.桿菌 C.弧菌 D.芽孢,D,練習(xí),微生物培養(yǎng)過程中，肉眼鑒別金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的重要依據(jù)是（ ） A.細(xì)菌的大小、形狀、顏色 B.菌落的大小、形狀、顏色 C.有無鞭毛 D.培養(yǎng)基的不同,B,關(guān)于微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是（ ） A.是碳源的物質(zhì)不可能