1、發(fā)酵工藝流程發(fā)酵工藝標準操作流程(SOP)一生產前準備每次生產前按品種配方將所需原料稱重準備齊全,并確認生產原料庫存量,保證原料庫存量足夠下次生產所需、二生產前檢查1 檢查蒸汽、壓縮空氣、冷卻水進出的管路就是否暢通 ,所有閥門就是否良好 ,并關閉所有閥門、2檢查電路、控制柜、開關的狀態(tài),確?？刂乒襁\行正常、3檢查空壓機油表油表及軸承、三角帶、氣缸等就是否正常,確?？諌簷C運行正常、4 檢查發(fā)酵罐攪拌減速機的油量及密封軸降溫水就是否正常、三總過濾器滅菌當蒸汽總管路上的壓力為 0、2-0、25MPa 時 ,打開總過濾器進氣閥輸入蒸汽 ,同時打開出氣閥的跑分閥、排氣閥、排污閥 ,當三個閥均排出蒸汽時

2、,調整進氣閥、排污閥 ,穩(wěn)定總過濾器壓力 0、 15-0、 2MPa, 此時打開壓力表下跑分 ,計時滅菌 2-2、 5 小時、滅菌結束后啟動空壓機 , 當空氣輸入管道壓力大于總過濾器壓力時 ,關閉蒸汽閥 ,打開空氣閥 ,將空氣出入總過濾器 ,然后調整進氣閥與排污閥 ,穩(wěn)定總過濾器壓力在 0、15-0、 2MPa,保持通氣在 15-20 小時 ,當出氣閥跑分與排污閥放出的空氣為干燥空氣時 ,完成滅菌、四分過濾器滅菌1 當蒸汽管路壓力為0、 2-0、25MPa 時 ,打開蒸汽過濾器的進氣閥與排污閥,當蒸汽管路中無蒸汽凝結液后,再將蒸汽輸入空氣管路,然后打開分過濾器的進氣閥、排污閥及出氣閥上的跑分

3、,當所有閥門均有蒸汽排出后,調整進氣與排污閥,就是壓力穩(wěn)定在0、 11-0、 15MPa,計時滅菌 30-35 分鐘、滅菌結束后,關閉蒸汽過濾器進出氣閥、排污閥,并立即將空氣輸入預過濾器 ,使空氣通過預過濾器進入到分過濾器,再調整分過濾器排污閥使壓力穩(wěn)定在0、 11-0 、15MPa,備用、發(fā)酵工藝流程五發(fā)酵罐空消( 可與分過濾器滅菌同時進行)空消前先將發(fā)酵罐去垢洗凈 ,添加少量清水 ,然后密封進料口 ,將排氣閥打開少許 ,同事將蒸汽引入盤管 (或夾套 )進行預熱 ,待罐溫升到 80時 (種子罐 40即可 ),關閉盤管 (或夾套 )進氣閥,再從出料口、進氣口、取樣口三路輸入蒸汽,(蒸汽管路壓力

4、不低于0、 2-0、25MPa), 當罐內溫度達到 125-130 時 ,通過三路蒸氣浴出氣閥調整罐內壓力 ,使其穩(wěn)定在 0、11-0、15MPa,計時滅菌 30-35 分鐘、空消結束后 ,關閉所有進氣閥并將排氣閥開大,當罐內壓力下降至0MPa 后,打開進料口與排污閥 ,再將發(fā)酵罐進行一次沖洗、六發(fā)酵罐實消打開進水閥 ,按照生產要求放入所需水量,再根據生產品種按配方依次投入培養(yǎng)基原料,并同時打開攪拌 ,攪拌 5-10 分鐘后取樣 ,用氫氧化鈉與濃鹽酸調PH 值 7、2-7、5 之間 ,然后密封進料口將排氣閥打開少許,同時打開盤管 (或夾套 )的進出氣閥門輸入蒸汽進行預熱,等到罐內溫度到達 80

5、以上后 ,關閉盤管 (或夾套 )進氣閥門 ,并將排氣閥關小 ,然后將蒸汽從進氣口、出料口、取樣口三路直接通入罐內,當罐內溫度上升到121-125后 ,打開發(fā)酵罐體上與空氣進氣閥上的所有跑分,再通過調整三路進氣與排氣閥將罐內壓力穩(wěn)定在0、11-0、15MPa,此時開始計時滅菌 30-35分鐘 ,滅菌期間將攪拌停止、滅菌結束后,關閉所有進蒸汽閥門,將排氣閥開大,同時開啟攪拌 ,并立即打開進氣閥 ,輸入無菌空氣 ,保證罐壓不低于0、05-0 、06MPa(當發(fā)酵罐通入無菌空氣后,一定注意分過濾器與空氣總管路壓力一定要大于發(fā)酵罐內壓力), 打開盤管 (或夾套 ) 冷卻水進出閥門 (確定蒸汽出閥門關閉

6、),開始降溫 ,按照不同菌種接種溫度要求控制降溫結束時間 (一般在 34左右 ),降溫結束后即可接種、七接種1 種子罐接種先將進氣閥逐漸關閉,同時將排氣閥開大,當罐體壓力表與空氣流量計降到0 刻度時 ,關閉排氣閥 ,用酒精棉圍在接種口四周并點燃,然后打開接種口,將制備好的菌種孢子懸浮液在火焰中直接從接種口倒入罐內,馬上關閉接種口,同時迅速打開進氣閥使罐內壓力上升到0、05MPa以上 ,打開排氣閥 ,調整進氣與排氣閥使罐內壓力穩(wěn)定在0、05-0、 06MPa2 培養(yǎng)罐接種接種前應先將蒸汽輸入接種管道,再把接種管道兩端的跑分打開,當跑分都有蒸汽排出時,計時滅菌 15-30 分鐘 ,滅菌結束后關閉跑

7、分與進蒸汽閥,將種子罐排氣閥關小,當種子罐內壓力大于培養(yǎng)罐壓力后,先將接種管道進口閥門打開,再打開培養(yǎng)罐端出口閥開始接種,接種量按不同菌種生產需求控制、接種完畢后,先將培養(yǎng)罐端出口閥關閉,再將接種管道進口閥關閉,完成接種 ,最后把種子罐所有進出氣閥門關閉,停止攪拌、發(fā)酵工藝流程八發(fā)酵罐培養(yǎng)控制接種后調整進氣閥與排氣閥 ,將罐內壓力穩(wěn)定在 0、05-0 、06MPa, 同時按照不同菌種的需求調整好罐內的溫度與通氣量當罐內溫度超出或者低于標準溫度時,打開盤管或夾套進出閥門,出入冷卻水或者蒸汽,等溫度達到標準溫度后關閉進出閥門 ,停止冷卻水或者蒸汽的輸入 ,這就完成了一次溫度的控制調整、通氣量的控制

8、 ,按照不同菌種的要求 ,在確保管內壓力穩(wěn)定的前提下 ,根據空氣流量計的顯示,通過進氣閥與排氣閥的調整進行通氣量的調整、冬季結冰期到來以后 ,每次生產停止后 ,應把蒸汽與空氣管路及發(fā)酵罐盤管或者夾套的冷凝水與冷卻水排盡 ,排不盡的可用空氣把水吹出來 ,以防止凍裂管路與設備 ,給生產造成不便、九取樣與放罐取樣檢測時間,按照生產菌種的種類來制定12-16 小時不等 ,開始取樣檢測后,前期每 2 小時一次 ,后期取樣時間縮短為0、5-1 小時 ,每次取樣前后都要對取樣口進行10-15 分鐘滅菌處理,、當取樣檢測 , 發(fā)現(xiàn)符合芽孢大量形成 ,芽孢含量 70%,雜菌量 3%, 含菌量 30*108CFU