1、實(shí)驗(yàn)11 植物的組織培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?1.進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng) 2.嘗試植物激素的應(yīng)用,快速繁殖,植物組織培養(yǎng)技術(shù)有何意義？,我國用花藥培養(yǎng)法先后培育出優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的經(jīng)濟(jì)作物、糧食和蔬菜等新品種，廣泛應(yīng)用于果樹和花卉的快速繁殖。 借助于組織培養(yǎng)生產(chǎn)人工種子，解決某些作物品種繁殖力差、結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題。,生產(chǎn)藥物、食品添加劑、香料、色素、和殺蟲劑等。例如：紫杉醇，生物堿、紫草素等。 轉(zhuǎn)基因植物的培育 植物去病毒,基礎(chǔ)知識回顧 （一）植物組織培養(yǎng)的基本過程 1.細(xì)胞全能性 2.細(xì)胞分化的概念； 3.離體植物細(xì)胞的脫分化和再分化。,植物組織培養(yǎng)的基本過程,基礎(chǔ)知識回顧 （二）影響植物組織培養(yǎng)的因素

2、 培養(yǎng)基配制 外植體的選取 消毒接種 培養(yǎng) 移栽和栽培等。,1、外植體的選取 不同植物的組織培養(yǎng)難度不同 同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同 2、培養(yǎng)基的配制(MS培養(yǎng)基) 大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有機(jī)物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等 植物激素：生長素、細(xì)胞分裂素、赤霉素等 3、不同植物激素使用順序和使用量,影響植物組織培養(yǎng)的因素,4、消毒 在培養(yǎng)的整個過程中，都需要是一個無菌環(huán)境原因： 5、pH、溫度、光照 菊花： pH=5.8 溫度控制在1822 每日光照12h,植物組織培養(yǎng)用的培養(yǎng)基，含有植物生長發(fā)育所需

3、要的各種營養(yǎng)物質(zhì)，這些營養(yǎng)物質(zhì)同樣為細(xì)菌等微小的生物提供了適合的營養(yǎng)。在這種培養(yǎng)基上，細(xì)菌等微小的生物比植物細(xì)胞具有更強(qiáng)的新陳代謝能力，它們比植物細(xì)胞生長、繁殖得更快，而且它們會產(chǎn)生毒素，使培養(yǎng)的植物細(xì)胞很快中毒死亡。因此，植物組織培養(yǎng)要想取得成功，必須有效地防止細(xì)菌等的污染，保證培養(yǎng)材料、培養(yǎng)基、培養(yǎng)用具完全無菌。為了達(dá)到這一要求，就要在植物組織培養(yǎng)過程中進(jìn)行一系列的消毒、滅菌，并且要求無菌操作。,實(shí)驗(yàn)材料用具,培養(yǎng)瓶、鑷子、超凈臺、滅菌鍋、封口膜和橡皮圈、有棉球的廣口瓶、酒精燈、三角漏斗、培養(yǎng)皿 MS培養(yǎng)基 萘乙酸、芐基腺嘌呤 發(fā)芽培養(yǎng)基 生根培養(yǎng)基,制備MS固體培養(yǎng)基,外植體消毒,接種,

4、生芽,栽 培,實(shí)驗(yàn)過程,移 栽,沖洗酒精無菌水沖洗氯化汞無菌水沖洗至少三次之上,生根,此時的組織或細(xì)胞為離體的，即細(xì)胞所生活的環(huán)境為液體有機(jī)物營養(yǎng)環(huán)境，而不是能體現(xiàn)其整個植物體的光能自養(yǎng)。,在培養(yǎng)過程中，是脫分化、再分化的過程，隨著芽和根的形成，就具有了自養(yǎng)的能力，是由細(xì)胞到一個個體的演變過程。,1、高等植物是光能自養(yǎng)型生物，為什么在植物組織培養(yǎng)過程中還需要提供有機(jī)物培養(yǎng)基？,2、培養(yǎng)過程中為什么需要進(jìn)行光照,思 考,？,1、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌） 2、外植體的消毒（酒精、氯化汞） 3、接種的無菌操作（酒精、酒精燈灼燒） 4、無菌箱中的培養(yǎng)； 5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時間。,3、在整個操作過程中，是如何來實(shí)現(xiàn)無菌環(huán)境的？,4、激素使用的先后順序?qū)?xì)胞分裂和分化的影響。,5、激素的用量比例對細(xì)胞分裂和分化的影響,結(jié)果分析與評價,（一）對接種操