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文檔簡介
1、第四章抗體制藥1Ig分子是由 二硫鍵 連接起來的 4條(兩對) 條多肽鏈構成的。2單克隆抗體制備時對動物的免疫方法分為 體內(nèi)免疫 和 體外免疫 。3一般來說PEG的 相對分子質(zhì)量 和 濃度 越大,細胞的融合率越高。1.Ig分子的抗原結合部位是由(VL和VH的CDR區(qū) )共同構成。2.制備單克隆抗體時一般采用與(骨髓瘤細胞 )供體同一品系的動物進行免疫。3. 生物藥物檢驗要求(理化指標和生物活性指標缺一不可 )。4.下列不屬于基因產(chǎn)品液態(tài)保存的方法是(低濃度保存 )5.前預防乙型肝炎使用的生物制品屬于(疫苗 )。單克隆抗體 : 由單一的B淋巴細胞克隆產(chǎn)生的,這種抗體是針對一種抗原決定簇的抗體,稱
2、為單克隆抗體。雙功能抗體:就是雙特異性單鏈抗體,將抗A抗原抗體的輕鏈可變區(qū)基因與抗B抗原抗體的重鏈可變區(qū)通過短肽鏈接子連接構建成雙鏈抗體的表達質(zhì)粒,表達后形成雙特異性抗體。多克隆抗體: 病原微生物含有多種抗原決定簇的抗原物質(zhì),因此這些抗體制劑也是多種抗體的混合物,故稱多克隆抗體。抗體 : 是指能與相應抗原特異性結合具有免疫功能的球蛋白。克隆化:指單個細胞通過無性繁殖而獲得細胞集團的整個培養(yǎng)過程。免疫球蛋白: 將具有抗體活性及化學結構與抗體相似的球蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白。類型 基本結構人- 鼠嵌和抗體 人IgC-小鼠IgV改型抗體 小鼠CDR替換人CDRFab 完整L鏈和FdFv VH和VL單鏈抗
3、體(scFv) VH-或-VL單域抗體 VH或 VL最小識別單位(MRU) 一個CDR 人- 鼠嵌和抗體:由于抗體同抗原結合的功能決定于抗體分子的可變區(qū)(V),同種性免疫原決定于抗體分子的穩(wěn)定區(qū)(C),如果在基因水平上把鼠源性單克隆抗體的重鏈(H)和輕鏈(L)可變區(qū)分離出來,分別與人Ig的重鏈的穩(wěn)定區(qū)(C)基因連接成人-鼠嵌合體的H和L鏈基因,再共轉染骨髓瘤細胞,就能表達出完整的人-鼠嵌合抗體。Fab抗體:用胃蛋白可將IgG的重鏈在鉸鏈區(qū)的C端處裂解,獲得兩個完全相同的抗原結合片段,在Fab片段之間仍保留有鉸鏈區(qū)與二硫鍵,為Fab雙體,具有完整的雙價抗體活性,但相對分子質(zhì)量減少了1/3,為10
4、000,在人體內(nèi)產(chǎn)生的抗鼠蛋白的排斥反應也相應降低30%,由于仍保持抗體分子的立體構型,因此在人體任然很穩(wěn)定,成為小分子抗體的錐形。單鏈抗體:是由一段彈性鏈接肽把抗體可變區(qū)重鏈(VH)與輕鏈(vl)相連而成,是具有親代抗體全部抗原結合特異性的最小功能單位。單域抗體:抗體的VH-或-VL是具有結合抗原特異性的小抗體片段。改形抗體 :Ig 分子中參與構成抗原結合部位的區(qū)域是H和L鏈V區(qū)中的互補決定區(qū)(CDR區(qū)),而不是整個可變區(qū)。 H和L鏈各有三個CDR,其它部分稱框架區(qū)。用鼠源單抗的CDR序列替換人Ig 分子中CDR序列,則可使人的Ig 分子具有鼠源單抗的抗原結合特異性??上庖咴葱浴S址QCD
5、R移植抗體。 (單克隆抗體)免疫導向療法障礙有:1,單克隆抗體均是鼠源性抗體,應用于人體內(nèi)可產(chǎn)生人抗鼠抗體,加速了排斥反應,難以維持有效藥物作用靶組織時間;2,完整的抗體分子,即Ig的相對分子質(zhì)量過大,難以透穿腫瘤組織。 改造:1,降低單克隆抗體的免疫原性;2,降低單克隆抗體的相對分子質(zhì)量。免疫學的三大類抗體診斷藥物:血清學鑒定用的抗體制劑、免疫標記技術用的抗體制劑和體內(nèi)導向診斷藥物。第五章 植物細胞工程制藥1與動物細胞和微生物細胞相比,植物細胞具有 細胞壁 、液泡 和 質(zhì)體 。2植物細胞的懸浮培養(yǎng)分為 靜止 和 振蕩 。3植物組織和細胞培養(yǎng)物的生長主要取決于 生長素和 分裂素 的比例。4大多
6、數(shù)植物細胞的培養(yǎng)基中的氮都是以 NH4+ 和 NO3- 形式提供的。5常用的對植物組織培養(yǎng)的表面滅菌劑是 次氯酸鈣 、 次氯酸鈉 和 氯化汞 。6植物培養(yǎng)細胞重量的增加主要取決于對數(shù)期 ,而次級代謝產(chǎn)物的累積則主要在 穩(wěn)定期 。次級代謝作用 : 由特異蛋白質(zhì)調(diào)控產(chǎn)生的內(nèi)源化合物的合成,代謝及分解作用的綜合過程.初級代謝物:核酸、核苷、核苷酸、氨基酸、蛋白質(zhì)及糖類。次級:生物堿、黃酮體、萜類、有機酸、木質(zhì)素等。 次級代謝產(chǎn)物:除了核酸、核苷、核苷酸、氨基酸、蛋白質(zhì)及糖類以外,具有如下特征的成分成為次級代謝產(chǎn)物:有明顯的分類學區(qū)域界限;其合成需在一定的條件下才能發(fā)生;缺乏明確的生理功能;是生命的多
7、余成分。植物細胞工程:以植物細胞為基本單位,應用于細胞生物學、分子生物學等理論和技術,在立體條件下進行培養(yǎng)、繁殖或人為的驚細操作,使細胞的某些生物學特性按人們的意思發(fā)生改變,從而改良品種、制造新品種、加速繁育植物個體或獲得有用物質(zhì)的一門科學或技術。植物細胞全能性:植物體中任何一個具有完整細胞核的細胞,在一定條件下都可以重新再分化成原來的個體。分化:可以分為胚胎發(fā)生和器官發(fā)生兩個階段。前者是從精子與卵細胞結合開始,分化為幼胚,進而發(fā)育為成熟胚和種子。種子在適宜的條件下分化過程,形成根、莖、葉、花和果實。脫分化:已經(jīng)分化的細胞、組織和器官在人工培養(yǎng)的條件下又變成未分化的細胞和組織的過程。再分化:通
8、過脫分化誘導形成的愈傷組織在適宜的培養(yǎng)條件下可再分化成為胚狀體或直接分化出器官。細胞培養(yǎng):指利用單個細胞進行液體或固體培養(yǎng),誘導其增殖及分化的培養(yǎng)試驗。目的:得到單細胞無性繁殖系。外植體:指用于植物組織培養(yǎng)的器官或組織,植物的各部位如根、莖、葉、花、果、穗、胚珠、胚乳、花藥和花粉等均可作為外植體進行組織培養(yǎng)。繼代培養(yǎng):由最初的外植體上切下的新增殖的組織,培養(yǎng)一代稱為“第一代培養(yǎng)”,連續(xù)多代的培養(yǎng)就稱為繼代培養(yǎng)。植物激素:是植物代謝過程中形成的生長調(diào)節(jié)物質(zhì),在極低濃度(小于1微摩時即能調(diào)節(jié)植物的生育過程,并能從合成部位轉運到作用部位而發(fā)揮作用。 固體培養(yǎng):是在培養(yǎng)基中加入一定量的凝固劑,經(jīng)加熱溶
9、解后,分別裝入培養(yǎng)的容器,冷卻后凝結成固體培養(yǎng)基。生物反應器:人們通常將用于細胞大規(guī)模生產(chǎn)的裝置稱為發(fā)酵罐,而將主要用于生產(chǎn)次級代謝產(chǎn)物的裝置稱為生物反應器。1 影響植物次級代謝產(chǎn)物產(chǎn)生和累積的主要因素有哪些?影響次級代謝產(chǎn)物產(chǎn)生和累積的因素主要有:(1)、生物條件:外植體、季節(jié)、休眠、分化等;(2)、物理條件:溫度、光(光照時間、光強、光質(zhì))、通氣(氧氣)、酸度和滲透壓;(3)、化學條件:無機鹽、碳源、物質(zhì)生長調(diào)節(jié)劑、維生素、氨基酸、核酸、抗生素、天然物質(zhì)和前體等;(4)、工業(yè)培養(yǎng)條件:培養(yǎng)罐類型、通氣、攪拌和培養(yǎng)方式。2.各種植物細胞培養(yǎng)的生物反應器的特點是什么?(1)機械攪拌式生物反應器
10、;優(yōu)點是:反應器內(nèi)的溫度、PH值、溶氧及營養(yǎng)物濃度較其他反應器更易控制;缺點是:攪拌產(chǎn)生的剪切力對細胞造成傷害、抑制植物細胞生長和次級代謝物產(chǎn)生。(2)鼓泡塔生物反應器;優(yōu)點:操作不易染菌,提供了較高的熱量和質(zhì)量傳遞,放大相對容易;缺點是:流體流動形式難以確定,混合不均,缺乏有關反應器內(nèi)的非牛頓流體的流動與傳遞的數(shù)據(jù)。(3)氣升式生物反應器;優(yōu)點:在低剪切力下達到較好的混合和較高的氧傳遞效果,運動部件不易染菌,操作費用低;缺點:高密度培養(yǎng)時混合不夠均勻;(4)轉鼓式生物反應器;優(yōu)點:在高密度培養(yǎng)時有較高的氧傳遞效率,缺點:難于大規(guī)模操作,放大困難。(5)固定化細胞生物反應器;優(yōu)點:在一定程度上
11、克服了植物細胞遺傳和生理特性的不穩(wěn)定,細胞大小的不一致性、高產(chǎn)細胞系的低產(chǎn)率等植物細胞培養(yǎng)中的突出難題,提高產(chǎn)物的產(chǎn)率。缺點:固定化細胞培養(yǎng)的先決條件是細胞代謝產(chǎn)物必須分泌到胞外,3.植物組織的固體培養(yǎng)有何缺點?(1)外植體或愈傷組織僅有一部分與培養(yǎng)基接觸,造成培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度差,導致生長的不平衡;(2)外植體的基部插入培養(yǎng)基中,因此該處呈現(xiàn)氣體交換不暢,阻礙了組織呼吸作用的正常進行,同時也堆積生長過程中排出的有害物質(zhì)。(3)容易出現(xiàn)極化現(xiàn)象,導致細胞群體的不均勻。(4)在培養(yǎng)過程中需要檢測的一些生理特殊化指標不方便。4植物細胞大規(guī)模培養(yǎng)的主要方法及其特點是什么?(1)成批培養(yǎng)法: 最適
12、于植物細胞培養(yǎng)的是氣升式反應器。兩步培養(yǎng)法,使用兩個反應器第一個用于細胞生物量的累積,第二個用于次級代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)。(2)半連續(xù)培養(yǎng)法:在反應器中投料和接種培養(yǎng)一段時間后,將部分培養(yǎng)液和新鮮培養(yǎng)液進行交換的培養(yǎng)方法。是一種具有定時進出裝置的成批培養(yǎng)系統(tǒng)。(3)連續(xù)培養(yǎng)法 : 生產(chǎn)能力較高,但技術條件要求苛刻。(4)固定化培養(yǎng)法 :固定化的優(yōu)點是細胞位置固定,易于獲得高密度細胞群體和維持細胞間的物理化學梯度,利于細胞組織化,易于控制培養(yǎng)條件及獲得次級代謝產(chǎn)物。5植物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基由哪些主要成分組成?植物細胞或組織培養(yǎng)基常含有無機鹽、碳源、有機氮源、植物生長激素、維生素等成分。(1)無機鹽 有大
13、量元素和微量元素,30毫克每升為界限,大量有氮、硫、磷、鉀、鎂、鈣、氯、鈉。微量有鐵、錳、碘、鉬、銅、鋅、碘。(2)碳源 常用碳源為碳水化合物、肌醇、甘油、乳糖和半乳糖。天然提取物如椰子乳、對愈傷組織的誘導和培養(yǎng)也有重要意義。(3)植物生長調(diào)節(jié)劑 常見的植物激素有生長素、分裂素、赤霉素、脫落酸、乙烯。(4)有機氮源 常用蛋白質(zhì)水解物或各種氨基酸,有機氮源對細胞的早期生長有利,氨基酸的加入是為了代替或增加氮源的供應。(5)維生素 通常是維生素自養(yǎng)型,但大多數(shù)不能滿足需要。B族維生素還需加入生物素和肌醇。植物組織和細胞培養(yǎng)的生長過程主要取決于:生長素和分裂素的比例;植物細胞大規(guī)模培養(yǎng):成批培養(yǎng)、半
14、連續(xù)和連續(xù)培養(yǎng)(懸浮培養(yǎng))及固定化培養(yǎng)。成批培養(yǎng):將培養(yǎng)基一次性加入反應器中,接種、培養(yǎng)一定時間后收獲細胞的操作方式。半連續(xù)培養(yǎng)法:在反應器中投料和接種培養(yǎng)一段時間后,將部分培養(yǎng)液和新鮮培養(yǎng)液進行交換的培養(yǎng)方法。連續(xù)培養(yǎng)法:利用連續(xù)反應培養(yǎng)器,在投料和接種培養(yǎng)一段時間后,以一定速度連續(xù)采集細胞和培養(yǎng)液,并以同樣速度供給新鮮培養(yǎng)基以及使細胞生長環(huán)境長期維持恒定的方法。如上,植物次級代謝產(chǎn)物的積累主要在細胞生長的穩(wěn)定期,表明細胞成塊而趨于分化時,細胞塊中各個細胞處于一定理化梯度之下此現(xiàn)象與完整植株相似,由此提出固定化培養(yǎng)技術。固定化培養(yǎng)采用的固定化反應器有:網(wǎng)狀多孔板、尼龍網(wǎng)套和中孔纖維膜;也可通
15、過凈化空氣代替攪拌。固定化培養(yǎng)法: 將細胞固定在尼龍網(wǎng)套內(nèi)或固定于中空纖維膜反應器的膜表面,或固定于網(wǎng)狀多孔板上,放在培養(yǎng)液中進行培養(yǎng),或連續(xù)通入新鮮培養(yǎng)基,進行連續(xù)培養(yǎng)又連續(xù)收集培養(yǎng)產(chǎn)物,可通入凈化空氣代替攪拌。 常用的滅菌劑有:氯酸鈣、次氯酸鈉和氯化汞。三、培養(yǎng)條件的影響可分為培養(yǎng)環(huán)境的內(nèi)在因素(包括營養(yǎng)成分、生物及非生物元素、pH、通氣及混合程度、與接種有關的因素)和培養(yǎng)環(huán)境的外部因素(剪切力、攪拌頻率、溫度和光)等的影響。 (1)接種和誘導:(2)培養(yǎng)基的組成:磷、氮、銅、碳源(種類及濃度)、植物生長調(diào)節(jié)劑、O2和pH等。2.兩步培養(yǎng)法 第一步使用適合細胞生長的培養(yǎng),營養(yǎng)豐富,稱為生長
16、培養(yǎng)基;第二步使用適于次級代謝產(chǎn)物合成的培養(yǎng)基,較低含量的硝酸鹽和磷酸鹽,并含有較低的糖分或少量的碳源,稱為生產(chǎn)培養(yǎng)基。3、培養(yǎng)環(huán)境的外部因素(1)溫度:(2)攪拌頻率(3)培養(yǎng)容器的影響:(4)光的影響: 第六章 酶工程制藥1酶的固定化方法為 載體結合法 、 交聯(lián)法 和 包埋法 。2酶的載體結合法根據(jù)結合形式的不同分為物理吸附法、離子結合法和 共價結合法 。3目前工業(yè)常的酶一般是以 微生物 為主要來源。4篩選產(chǎn)酶菌的方法主要包括以下菌樣采集 菌種的初篩、純化 復篩和生產(chǎn)性能鑒定等步驟5酶在醫(yī)藥領域有應用主要包括 疾病診斷、疾病治療、藥物生產(chǎn)和 分析檢測 四個方面的6在固定化細胞中應用最多,最
17、有效的方法是 包埋法 。7酶和細胞的固定化載體主要有 吸附載體 、 包埋載體和 交聯(lián)載體 三類。8選擇酶和細胞固定化方法時應考慮 應用的安全性 、 操作中的穩(wěn)定性 及 固定化成本 。9根據(jù)固定化酶的反應系統(tǒng),其活力的測定可以分為 分批測定法和 連續(xù)測定法 兩種。10固定化酶的偶聯(lián)率 小于1 ,擴散限制對酶活力有影響;偶聯(lián)率 大于1 ,有細胞分裂或從載體排除抑制劑等原因。11酶化學修飾的方法有 表面化學修飾、 酶分子內(nèi)部修飾和 結合定點突變的化學修飾 。固定化酶 固定化酶是指限制或固定于特定空間位置的酶,具體來說,是指經(jīng)物理或化學方法處理,使酶變成不易隨水流失即運動受到限制,而又能發(fā)揮催化作用的
18、酶制劑。模擬酶 :根據(jù)酶的作用原理,用各種方法人為制造的具有酶性質(zhì)的催化劑。酶化學修飾:通過主鏈有切割、剪切和側鏈基團有化學修飾對酶蛋白進行分子改造,以改變其理化性質(zhì)和生物活性。這種應用化學方法對酶分子施行種種“手術”的技術稱為酶分子的化學修飾。固定化細胞: 將細胞限制或定位于特定空間位置的方法稱為細胞固定化技術。被限制或定位于特定空間位置的細胞稱為固定化細胞。人工模擬酶:根據(jù)酶的作用原理,用各種方法人為制造的具有酶性質(zhì)的催化劑。酶化學修飾:通過主鏈的切割、剪接和側鏈基團的化學修飾對酶蛋白進行分子改造,以改變其理化性質(zhì)及生物活性。有機相酶反應:指酶在具有有機溶劑存在的介質(zhì)中所進行的催化反應。分
19、子印跡:指制備對某一特定化合物具有選擇性的聚合物的過程。生物印跡:是分子印跡的一種形式,它是以天然的生物材料,如蛋白質(zhì)和糖類物質(zhì)為骨架,在其上進行分子印跡而產(chǎn)生對印跡分子具有特異性識別空腔的過程。1 作為一個優(yōu)良的產(chǎn)酶菌種:繁殖快、產(chǎn)酶高,最好是產(chǎn)生胞內(nèi)酶的菌株2 酶經(jīng)固定化后,其最適pH值一般都:升高或下降3 抗體酶是具有催化活性的:免疫球蛋白4 載體結合法是酶和細胞固定化的主要方法之一,下列那種方法不屬于載體結合固定化方法:交聯(lián)法5 模擬酶的分類,按屬性分為:主-客體酶、膠束酶、肽酶、半合成酶、分子印跡酶。6 按Kirby分類:單純酶模型、機制酶模型、單純合成的酶樣化合物。7 核酶是具有催
20、化活性的:核糖核酸8 分子印跡方法:共價分子印跡和非共價分子印跡。9 酶化學修飾的目的 提高酶的生物活性; 增強在不良環(huán)境中的穩(wěn)定性; 降低或消除其免疫原性10、酶化學修飾的方法(1) . 酶的表面化學修飾包括:大分子修飾、小分子修飾、交聯(lián)修飾、固定化修飾。(2) . 酶分子內(nèi)部修飾包括:非催化活性基團的修飾、蛋白主鏈的修飾、催化活性基團的修飾、與輔因子有關的修飾、肽鏈伸展后的修飾。3. 結合定點突變的化學修飾分子印跡有兩種方法:共價分子印跡,(如染料、二胺類、維生素、氨基酸衍生物、肽)和非共價分子印跡(如游離糖及其衍生物、甘油酸及其衍生物、氨基酸及其衍生物、芳香酮、轉鐵蛋白、苦杏仁酸、二醛等
21、)。1作為一個優(yōu)良的產(chǎn)酶菌種,應具備條件有那些?(1) 繁殖快、產(chǎn)酶高,酶的性質(zhì)應符合使用要求,而且最好是產(chǎn)生胞外酶的菌株。(2) 不是致病菌,在系統(tǒng)發(fā)育上與病原菌無關,也不產(chǎn)生有毒物質(zhì)。 (3) 產(chǎn)酶性能穩(wěn)定、不易變異退化,不易感染噬菌體。 (4) 所需原料穩(wěn)定,來源廣泛,價格低廉。 發(fā)酵周期短,易于培養(yǎng)。2試比較物理吸附法和共價結合法兩種酶固定方法的優(yōu)缺點。物理吸附法優(yōu)點:制作條件溫和、簡便,成本低,載體再生、可反復使用。缺點:結合力弱,對pH、離子強度、溫度等因素敏感,酶易脫落。 共價結合法優(yōu)點:酶與載體結合力強,穩(wěn)定性好。缺點:條件激烈,易引起酶失活;成本高。3固定化酶和固定化細胞的特
22、點和優(yōu)點各是什么?固定化酶的特點: 具有生物催化劑的功能,又有固相催化劑的功能。主要優(yōu)點如下:可多次使用 反應后,酶底物產(chǎn)物易分開,產(chǎn)物中無殘留酶,易純化,產(chǎn)品質(zhì)量高。反應條件易控制。酶的利用效率高。比水溶性酶更適合于多酶反應。4,為什么要對酶進行化學修飾?(1)提高生物活性;(2)增強在不良環(huán)境中的穩(wěn)定性;(3)針對異體反應,降低生物識別能力4、 從現(xiàn)代觀點來看, 酶工程主要有哪些方面的研究內(nèi)容:1、 酶的分離、提純、大批量生產(chǎn)及應用開發(fā)。2、酶和細胞的固定化及酶反應器的研究。3、酶生產(chǎn)中基因工程技術的應用及遺傳修飾酶的研究。3、酶的分子改造與化學修飾以及酶的結構與功能之間關系的研究。4、有
23、機相中酶反應的研究。5、酶的抑制劑、激活劑的開發(fā)及應用研究。6抗體酶、核酸酶的研究。7模擬酶、合成酶及酶分子的人工設計、合成的研究。2、 固定化酶的特點:具有生物催化劑的功能,又有固相催化劑的功能。 可多次使用,在多數(shù)情況下,酶的穩(wěn)定性提高 反應后,酶、底物、產(chǎn)物易分開,產(chǎn)物中無殘留酶,易純化,產(chǎn)品質(zhì)量高。 反應條件易控制,可實現(xiàn)轉化反應的連續(xù)化和自動控制。 酶的利用效率高。單位酶催化的底物量增加,用酶量減少。 比水溶性酶更適合于多酶反應。酶固定化方法:1,載體結合法(物理吸附法、離子結合法、共價結合法)2,交聯(lián)法3,包埋法(網(wǎng)格型、微囊型)4,熱處理(細胞,針對固定化細胞)(無載體法)固定化
24、細胞的特點:既有細胞特性,也有生物催化劑功能,又有固相催化劑特點。優(yōu)點:無須進行酶的分離純化 保持酶的原始狀態(tài),固定化過程中酶的回收率高細胞內(nèi)酶比固定化酶穩(wěn)定性高 細胞內(nèi)酶的輔助因子可自動再生 細胞本身含多酶體系,可催化一系列反應 抗污染能力強第七章 發(fā)酵工程技術概論發(fā)酵的基本過程:菌種、種子制備、發(fā)酵、發(fā)酵液預處理、提取精制發(fā)酵工業(yè)的生產(chǎn)水平取決于三個要素,分別是 生產(chǎn)菌種 、 發(fā)酵工藝 和 發(fā)酵設備。2.發(fā)酵工程產(chǎn)品開發(fā)的關鍵是篩選到高效菌株,一般優(yōu)良菌種的選育方法主要有 自然選育 、 誘變育種 和 原生質(zhì)體融合 。3.微生物誘變育種導致遺傳物質(zhì)DNA結構上發(fā)生變化,通常用物理、化學 、生
25、物 等因素進行對微生物的誘變。4.發(fā)酵產(chǎn)物的提取方法一般有 吸附法 、 沉淀法 、 溶劑萃取法 、離子交換法5.在發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)中使用的碳源有 糖類 、 脂肪 、 有機酸 、 碳水化合物 .2. 簡述培養(yǎng)基對發(fā)酵的影響微生物的生長需要一定的營養(yǎng),不同的微生物對營養(yǎng)的要求有很大的差異,培養(yǎng)基的成分和配比合適與否,對產(chǎn)生菌的生長發(fā)育,發(fā)酵單位的增長,有相當大的影響,同時還會影響到提取工藝和產(chǎn)品質(zhì)量。微生物的生長需要較多供給有機碳架的碳源,構成含氮物質(zhì)的氮源,還有無機鹽類,微量元素和水分等。1.碳源是構成微生物細胞和各種代謝產(chǎn)物碳架的營養(yǎng)物質(zhì),同時碳源在微生物的代謝過程中被氧化、釋放出能量,并以ATP
26、的形式貯存于細胞內(nèi),供給微生物生命活動所需的能量。2.無機鹽和微量元素是構成菌體原生質(zhì)的成分,可維持酶的活性,可調(diào)節(jié)細胞的滲透壓和PH,參與產(chǎn)物的合成等。3.水是必需的物質(zhì),它既是構成菌體細胞的主要成分,又是營養(yǎng)物質(zhì)傳遞的介質(zhì),對微生物的生長繁殖和產(chǎn)物合成有很重要的作用。3. 簡述溫度對發(fā)酵的影響,如何控制溫度可提高目標產(chǎn)物的產(chǎn)率?影響:1.影響各種酶反應的速率和蛋白質(zhì)的性質(zhì),溫度對菌體生長的酶反應和代謝產(chǎn)物合成的影響往往不同,溫度能改變菌體代謝產(chǎn)物的合成方向,對多組分次級代謝產(chǎn)物的組分比例影響2.影響發(fā)酵液的物理性質(zhì),如發(fā)酵液黏度、基質(zhì)和氧在發(fā)酵液中的溶解度和傳遞速率、某些基質(zhì)的分解和吸收速率等。在理論上,整個發(fā)酵過程中不應只選一個培養(yǎng)溫度,而應該根據(jù)發(fā)酵的不同階段選擇不同的培養(yǎng)溫度。在生長階段,應選擇最適生長溫度;在產(chǎn)物分泌階段,應選擇最適生產(chǎn)溫度。這樣變溫發(fā)酵所得產(chǎn)物的產(chǎn)量是比較理想的。但在工業(yè)發(fā)酵過程中,由于發(fā)酵液的體積很大,升降溫度都比較的困難,所以在整個發(fā)酵過程中,往往采用一個比較適合的培養(yǎng)溫度,使得到的產(chǎn)物產(chǎn)率最高。發(fā)酵溫度:生物熱、攪拌熱、蒸發(fā)熱、輻射熱(1).最適溫度的
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