1、紅托竹蓀固體菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程 編制說明一、制定本標準的必要性及意義1、建立紅托竹蓀固體菌種標準化示范點通過建立紅托竹蓀固體菌種生產(chǎn)技術(shù)標準，為貴州省紅托竹蓀生產(chǎn)提供技術(shù)支撐。2、規(guī)范紅托竹蓀固體菌種生產(chǎn)技術(shù)3、提高紅托竹蓀固體菌種質(zhì)量二、任務(wù)來源及起草單位1、任務(wù)來源2019年貴州省農(nóng)業(yè)地方標準制定和修訂項目。2、主要起草單位及起草小組成員主要起草單位：貴州大學(xué)、貴州織金毫米農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司、貴州省食用菌工程中心、貴州省果蔬工作站、畢節(jié)市場監(jiān)管局、織金縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局。三、起草本標準的主要原則與依據(jù)1. 主要原則本標準按照GB/T 1.1-2009標準化工作導(dǎo)則 第1部分：標準的結(jié)構(gòu)和編寫起草

2、。 2. 起草本標準的依據(jù)目前，國內(nèi)有“NY/T 836-2004 竹蓀”、并且浙江、福建、廣西、海南已經(jīng)制定并頒布實施了浙江省地方標準“DB33/T20732017竹蓀生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程”、福建省地方標準“DB35/T12682012竹蓀栽培技術(shù)規(guī)范”、廣西壯族自治區(qū)地方標準“DB45/T 1566-2017竹蓀生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程”、海南省地方標準“DB46/T4052016竹蓀栽培技術(shù)規(guī)程”和麗水市地方標準“DB 3311/T69-2017錐（板）栗林下棘托竹蓀栽培技術(shù)規(guī)程”這些標準適用于人工栽培的長裙竹蓀(Dictyophora indusiata)、短裙竹蓀(Dictyophora duplica

3、ta)、棘托竹蓀(Dictyophora echinouoluata)種植技術(shù)，僅有“NY/T 836-2004 竹蓀”提到紅托竹蓀(Dictyophora rubroualuata)干品。紅托竹蓀（Dictyophra rubrovolvata ）,又名織金竹蓀，原產(chǎn)于黔西北烏蒙山區(qū),大型真菌，是食用竹蓀的一個種，屬腹菌綱鬼筆目鬼筆科竹蓀屬，是寄生在枯竹根部的一種隱花菌類?？椊鹂h1986年首先人工馴化栽培紅托竹蓀成功，織金竹蓀于2010年獲得“國家地理標志產(chǎn)品”，織金縣是紅托竹蓀的主產(chǎn)區(qū)、產(chǎn)品集散地、菌種主要供應(yīng)地。迄今，我國還沒有一個省、市制定紅托竹蓀大棚生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程和林下栽培技術(shù)規(guī)程。目

4、前我省在紅托竹蓀栽培的生產(chǎn)中，參照執(zhí)行的是“NY/T 836-2004 竹蓀”和“NY/T528-2002 食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程 行業(yè)標準”等相關(guān)的標準。這些標準由于是針對長裙竹蓀、短裙竹蓀、棘托竹蓀和浙江、福建等地區(qū)氣候環(huán)境條件而制定，因此與我省紅托竹蓀生物學(xué)特性及栽培的生產(chǎn)實際情況差異較大，其應(yīng)用指導(dǎo)性不具體，針對性不強。四、標準編制的主要工作過程1、前期工作 1.1 實地調(diào)研考察織金縣紅托竹蓀制種、栽培種植基地建設(shè)和管理情況，了解織金竹蓀菌種分離培養(yǎng)、制種、菌種保存、產(chǎn)品銷售供應(yīng)以及檔案管理等情況。 1.2收集資料收集與織金竹蓀有關(guān)的國家、行業(yè)、地方標準，以及現(xiàn)有管理制度、職能職責(zé)等相

5、關(guān)資料。1.3 構(gòu)建竹蓀一級種、二級種和三級菌種制種標準框架根據(jù)織金竹蓀的生產(chǎn)特點，按實際情況構(gòu)建織金竹蓀菌種標準明細表，組織領(lǐng)導(dǎo)小組成員及相關(guān)企業(yè)人員對標準框架進行討論，明確標準明細表的具體內(nèi)容，對缺失標準制定標準制定計劃。2、起草文本文本起草人按照GB/T 1.12009標準化工作導(dǎo)則第一部分：標準的結(jié)構(gòu)與編寫規(guī)則所規(guī)定的標準編寫要求和格式起草“貴州省紅托竹蓀種植技術(shù)標準”文本。3、形成征求意見稿起草人組織編寫小組人員對初稿進行逐條討論和修改，形成紅托竹蓀固體菌種生產(chǎn)技術(shù)標準征求意見稿。五、本標準的主要內(nèi)容1、本標準規(guī)定的內(nèi)容及適用范圍本標準規(guī)定了紅托竹蓀固體菌種生產(chǎn)、菌種質(zhì)量鑒定、菌種保

6、存等內(nèi)容。2、 技術(shù)依據(jù)2.1 紅托竹蓀菌種生產(chǎn)產(chǎn)地環(huán)境質(zhì)量條件、灌溉水質(zhì)量等技術(shù)指標的確定是根據(jù)“NY 5010-2002 無公害食品 蔬菜產(chǎn)地環(huán)境條件”。 2.2 竹蓀菌種的生產(chǎn)是根據(jù)“NY/T 528-2002 食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程 行業(yè)標準”。 2.3 竹蓀菌種培養(yǎng)基基質(zhì)的種類及要求根據(jù)“NY5099-2002 無公害食品食用菌栽培基質(zhì)安全技術(shù)要求”。2.4 菌種培養(yǎng)基添加劑種類及要求根據(jù)“GB2760 食品添加劑使用衛(wèi)生標準”。2.5 病蟲害防治所用的農(nóng)藥、方法是根據(jù)“GB4285 農(nóng)藥安全使用標準”、“GB/T8321 農(nóng)藥合理使用準則”和NY 5010-2002 無公害食品蔬菜

7、產(chǎn)地環(huán)境條件中華人民共和國國務(wù)院令第216號發(fā)布的中華人民共和國農(nóng)藥管理條例。2.6 根據(jù)貴州省的氣候、土壤、栽培基質(zhì)（栽培主料、輔料）條件，栽培季節(jié)、菌種制作季節(jié)、菌種培養(yǎng)基基質(zhì)選擇與處理、病蟲害防治、保存等技術(shù)指標的確定采用了以下項目科技成果與技術(shù)：（1）“國家科技部農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金項目（2013GB2F00435）-織金竹蓀產(chǎn)業(yè)化技術(shù)研究成果熟化與栽培推廣應(yīng)用”項目研究的技術(shù)成果（主持人：張林，2013年）。（2）“黔科合NZ20133010號-織金縣竹蓀不同溫型品種選育及周年生產(chǎn)技術(shù)研究與示范” 項目研究的技術(shù)成果（主持人：王波，2013年）。（3）“黔科合農(nóng)G字20134008號

8、-織金縣蔬菜（竹蓀）科技示范園區(qū)”項目研究的技術(shù)成果（主持人：趙小平，2013年）。（4）黔科合重大專項字 20116021號子課題-畜糞、沼液沼渣資源化利用與糧、菜（菇）優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)技術(shù)集成與示范（主持人：徐彥軍，2011年）。（5）“黔科合成轉(zhuǎn)字2014 5210-竹蓀綠色高效生產(chǎn)技術(shù)集成與產(chǎn)業(yè)化”項目研究的技術(shù)成果（主持人：趙小平，2014年）。2.7 在病蟲害控制方面強調(diào)應(yīng)用了綜合防治技術(shù)和其它綠色控制技術(shù)，保證了產(chǎn)品質(zhì)量衛(wèi)生安全。3 菌種生產(chǎn)技術(shù)3.1 一級種生產(chǎn)技術(shù)3.1.1試管培養(yǎng)基制備3.1.1.1瓊脂斜面培養(yǎng)基：葡萄糖20g，瓊脂20g，磷酸二氫鉀2g，硫酸鎂0.5g，碳酸鈣3g

9、，竹蓀煮出液1000mL，pH值5.5-6.5。3.1.1.2木屑固體培養(yǎng)基：鋸木屑（細）65%80%，麥麩15%25%，玉米面5%10%，黃豆面1%5%，糖1%2%，石膏1%2%，磷酸二氫鉀0.1%0.5%，硫酸鎂0.1%0.5%，料水比1:1.31:1.5，pH值5.5-6.5。每支試管裝培養(yǎng)基15g20g，用木片壓成斜面，斜面高度不超過試管的四分之三，壓實。培養(yǎng)基質(zhì)量安全符合NY/T 1935規(guī)定3.1.2滅菌：使用高壓蒸汽滅菌，先排除冷空氣，在0.11Mpa0.13Mpa下保持3040min。3.1.3種菇組織分離選取七至八成熟，質(zhì)量 50g 以上竹蓀菌蛋，將菌蛋放于0.1%高錳酸鉀和

10、0.1%二氯異氰尿酸鈉混合溶液清洗干凈，再浸泡2 min，以菌蛋內(nèi)部菌肉作為組織分離材料；將竹蛋剖成兩半，用刀尖將竹蛋中間白色菌柄切開，分成815mm大小的塊，用鑷子輕挑菌肉塊。放置于離試管底部45cm的地方，輕壓使菌塊緊貼培養(yǎng)基，塞回棉塞，移至培養(yǎng)室在25左右，避光培養(yǎng)。3.1.4 檢查3 天后檢查感染情況，凡生長過快（菌塊單一一端10d生長超過20mm的）和感染的全部剔除。3.2 二級種、三級種生產(chǎn)技術(shù)3.2.1二級種培養(yǎng)基制備二級種培養(yǎng)基配方：以小麥粒質(zhì)量為100%，碳酸鈣占麥粒質(zhì)量的2.5%，葡萄糖占2.5%，三十烷醇1mg/kg，含水量60%，pH值67，每瓶干樣質(zhì)量150g。二級種

11、采用500ml玻璃瓶，瓶塞采用乳膠塞，塞底打孔，瓶塞內(nèi)部使用棉花填塞。玻璃瓶裝填250g30g培養(yǎng)料，松緊適度，瓶口清洗干凈，用10cm15cm接種棒打孔，塞上乳膠塞。3.2.2三級種培養(yǎng)基制備三級種培養(yǎng)基配方：（1）木屑（樺樹）78%，白糖1%，石膏1%，麥麩19.8%，磷酸二氫鉀0.1%，硫酸鎂0.1%，三十烷醇1mg/kg，pH值67，料水比1:1.5。（2）木屑65%80%，麥麩15%25%，玉米面1%5%，黃豆面1%5%，白糖1%2%，石膏1%2%，磷酸二氫鉀0.1%0.5%，硫酸鎂0.1%0.5%，pH值67，料水比1:1.5。三級種采用采用140mm170mm300mm400mm

12、0.05mm0.08mm聚丙烯袋裝填培養(yǎng)料，使用2.5cm3.8cm套環(huán)和蓋體密封，每袋裝填650g1250g培養(yǎng)料，高度12cm20cm，松緊適度，用12cm20cm接種棒打孔，套上套環(huán)，蓋緊蓋體。二級種和三級種培養(yǎng)基，質(zhì)量安全符合NY/T 1935規(guī)定。3.2.3滅菌采用高壓蒸汽滅菌，溫度達121，壓力達0.1,5Mpa下計時，二級種和三級種培養(yǎng)基滅菌120min180min。3.2.4 接種、培養(yǎng)3.2.4.1二級種接種：待二級種培養(yǎng)料冷卻至 30以下，放入接種箱或超凈工作臺。按照無菌操作，將試管中的一級種劃分6等分，在二級種培養(yǎng)基中，每瓶接入1/4一級種。右手小指和無名指與手掌夾住乳膠

13、塞拔出，取出接種棒，將菌種塊從底往上接。接種完畢，蓋回蓋體。將二級種瓶轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)室，控制溫度25左右，相對濕度65%-70%，避光培養(yǎng)。3.2.4.2三級種接種：待三級種培養(yǎng)料冷卻至 30以下，放入接種箱或超凈工作臺。按照無菌操作，右手小指和無名指與手掌夾住蓋體，拔出，取出接種棒，用鑷子將菌種掰成1cm1.5cm大小、長度不限的塊，從菌袋料孔底部往上接，頂部用大塊菌塊封口，菌種量占培養(yǎng)基3%6%。接種完畢，蓋回蓋體。將三級種瓶轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)室，控制溫度25左右，相對濕度65%-70%，避光培養(yǎng)。3.3菌種保存菌絲長滿，應(yīng)放置24低溫環(huán)境中保存。六、與現(xiàn)行相關(guān)法律、法規(guī)、規(guī)章及相關(guān)標準，特別是強制性

14、標準的協(xié)調(diào)性本標準主要是根據(jù)研究與實踐，對紅托竹蓀生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)集成提煉而制訂，引用的相關(guān)資料都是來源于公開發(fā)表的論文或?qū)Ｖ?，不涉及專利及知識產(chǎn)權(quán)問題，與現(xiàn)行相關(guān)法律、法規(guī)、規(guī)章及相關(guān)標準，特別是強制性標準無沖突，并可與現(xiàn)有標準配合應(yīng)用。七、與國外同類標準水平的對比分析1、本標準的制定采用了上述科技項目自主開發(fā)的最新科研成果技術(shù)，其生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程中的重要關(guān)鍵技術(shù)先進，在菌種生產(chǎn)措施上比“DB33/T20732017竹蓀生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程”、“DB35/T12682012竹蓀栽培技術(shù)規(guī)范”、“DB45/T 1566-2017竹蓀生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程”、“DB46/T4052016竹蓀栽培技術(shù)規(guī)程”更結(jié)合貴州紅托竹

15、蓀栽培實際情況。2、本標準的制定充分考慮了紅托竹蓀菌種生產(chǎn)的產(chǎn)地環(huán)境、栽培基質(zhì)、菌種制作季節(jié)、菌種制作技術(shù)、培養(yǎng)管理、菌種保存、病蟲害防治等基礎(chǔ)條件，標準具有明顯的區(qū)域特色。3、考慮到為生產(chǎn)單位和農(nóng)民節(jié)省成本、增加經(jīng)濟收入及保護環(huán)境，生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程采用了“國家科技部農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金項目（2013GB2F00435）-織金竹蓀產(chǎn)業(yè)化技術(shù)研究成果熟化與栽培推廣應(yīng)用”、“黔科合NZ20133010號-織金縣竹蓀不同溫型品種選育及周年生產(chǎn)技術(shù)研究與示范” 、“黔科合農(nóng)G字20134008號-織金縣蔬菜（竹蓀）科技示范園區(qū)”、“黔科合成轉(zhuǎn)字2014 5210-竹蓀綠色高效生產(chǎn)技術(shù)集成與產(chǎn)業(yè)化”項目科研

16、成果中的充分利用本地菌材生產(chǎn)紅托竹蓀技術(shù)，其技術(shù)指標體現(xiàn)出資源節(jié)約增效和生態(tài)和諧的特色。八、本標準的預(yù)期社會、經(jīng)濟效益在市場需求量大、對竹蓀產(chǎn)品質(zhì)量要求高的前提下，建立織金竹蓀種植技術(shù)標準，可以為區(qū)域內(nèi)種植企業(yè)或農(nóng)戶提供系統(tǒng)的標準技術(shù)支持，從而提升織金竹蓀菌種質(zhì)量。織金竹蓀（紅托竹蓀）作為我省最具本土特色和優(yōu)勢的食用菌品種，其產(chǎn)業(yè)優(yōu)勢日益顯現(xiàn)，種植區(qū)域已從原來的主產(chǎn)區(qū)織金縣擴展至周邊縣區(qū)及省內(nèi)興義、六盤水、安順、遵義、凱里等市州，以及相鄰云南省昭通、曲靖、紅河州部分縣區(qū)、重慶市部分縣區(qū)。目前省內(nèi)紅托竹蓀年種植面積約1.5萬畝（主產(chǎn)區(qū)織金縣、興仁市、安龍縣），年產(chǎn)干竹蓀約1500噸，產(chǎn)值約10億

17、元以上；年產(chǎn)銷菌種約2000萬袋（棒），產(chǎn)值約1.1億元；產(chǎn)業(yè)從業(yè)人數(shù)約5萬人。產(chǎn)品30銷往國內(nèi)大中城市，70左右出口香港、臺灣東南亞各國。由于長期以來缺乏統(tǒng)一、規(guī)范的種植技術(shù)標準，產(chǎn)品質(zhì)量得不到有效控制，導(dǎo)致產(chǎn)品對歐美、日本等發(fā)達市場的出口基本為零。而近年來紅托竹蓀產(chǎn)品市場需求急劇擴大，價格快速上漲，每年國內(nèi)外市場需求紅托竹蓀干品可達3000-5000噸以上，鮮品可達1萬噸以上，市場缺口很大。為滿足日益增長的市場需求，促進紅托竹蓀對發(fā)達地區(qū)市場的出口，實現(xiàn)更大產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟發(fā)展和效益，制訂紅托竹蓀菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程省級地方標準，在生產(chǎn)實際中示范推廣使用標準，對紅托竹蓀產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要意義。九、貫徹實施本標準的建議和意見本標準可以作為“推薦性地方標準”在從事紅托竹蓀菌種生產(chǎn)的企業(yè)、合作社及個體戶中推介應(yīng)用。要使本標準得以順利實施，建議相關(guān)行業(yè)主管部門加強引導(dǎo)、推廣部門廣泛宣傳，以提高本標準的應(yīng)用普及率。增強執(zhí)行紅托竹蓀菌種生產(chǎn)技術(shù)對菌種質(zhì)量影響的認識，提高紅托竹蓀菌種生產(chǎn)技術(shù)水平，充分發(fā)揮本標準持久效益，真正達到提高紅托竹蓀菌種質(zhì)量和促進紅托竹蓀生產(chǎn)產(chǎn)業(yè)化的目的。十、重大意見分歧的處理依據(jù)和結(jié)果1、織金縣竹蓀產(chǎn)業(yè)辦公室和織金縣果蔬協(xié)會在多年實施竹蓀