創(chuàng)新實驗設(shè)計 從苦參根中提取苦參堿,團隊成員： 王樂惠 張明敏 齊瑞玲 林恒先,指導(dǎo)老師： 周鑫玉,2019/5/23,1,一、苦參堿介紹,主要內(nèi)容,二、實驗?zāi)康?三、實驗原理,四、實驗儀器與試劑,五、實驗步驟,六、最佳條件的確定,七、實驗設(shè)計的創(chuàng)新點,2019/5/23,2,苦參為一種豆科植物的根。味苦性寒,有清熱利濕,祛風殺蟲及解毒等功效。主要用于治療濕熱黃疸,痛腫瘡毒,皮膚癬疥及腸炎痢疾等癥。 苦參主要含有苦參堿、氧化苦參堿、羥基苦參堿、去氫苦參堿、安那吉堿、巴普葉堿(6)、N甲基金雀花堿(7)等及黃酮類成分。,一、苦參堿介紹,苦參堿,2019/5/23,3,苦參堿,分子式為C15H24N2o 外觀：苦參堿純品為白色粉末，能溶于水、苯、氯仿、甲醇、乙醇, 微溶于石油醚。 易氧化轉(zhuǎn)變?yōu)檠趸鄥A。,應(yīng)用:應(yīng)用領(lǐng)域廣泛。如： 1.殺蟲作用 苦參堿是天然植物性農(nóng)藥,具有觸殺和胃毒作用，并且對人畜低毒； 2.藥理作用 利尿作用、抗病原體作用、抗癌作用等。,2019/5/23,4,1.優(yōu)選苦參根中苦參堿的提取工藝。 2.學會查閱文獻，并且通過分析文獻資料，結(jié)合所學知識，自行設(shè)計提取苦參堿的方法，從而提高獨立思考和解決問題的能力。 3.學會對各種提取工藝和測定方法進行評價。,二、實驗?zāi)康?2019/5/23,5,三、實驗原理,1.苦參堿為喹嗪類生物堿，可溶于水和有機溶劑，具有生物堿的通性,能與酸結(jié)合成鹽，在水中可離子化,故可用酸水提取。 2.微波萃取是利用微波能來提高萃取率的技術(shù)。微波破化細胞組織，釋放內(nèi)部物質(zhì)。從而縮短提取時間，提高提取效率。 3.因素水平表的設(shè)置。,2019/5/23,6,4.高效液相色譜法（HPLC）法相比于薄層掃描法(TLCS)在測定苦參堿含量時簡便快速、準確有效、重現(xiàn)性好。,2019/5/23,7,四、實驗儀器與試劑,1.設(shè)備儀器： 多功能粉碎機，電子稱，常壓微波輔助合成&萃取反應(yīng)儀， 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，電熱恒溫水浴鍋，紅外光譜儀，高效液相色譜儀，超聲清洗器。,多功能粉碎機,2.試劑： 苦參根干品，苦參堿對照標準品，10%鹽酸，10%氫氧化鈉溶液，無水乙醇，蒸餾水。,超聲微波聯(lián)合反應(yīng)系統(tǒng),2019/5/23,8,五、實驗步驟,2019/5/23,9,1.苦參根預(yù)處理。 稱取中藥苦參根干品500g， 用多功能粉碎機粉碎， 過16目分子篩。 2.酸浸及微波處理。 稱取27份苦參根粉末，每份10g。 將試樣編號，平均分為三組。 鹽酸處理，微波處理。 3.乙醇回流。 水浴溫度設(shè)置為60, 用60%乙醇回流， 分別設(shè)定時間為1h、2h、3h。,2019/5/23,10,4.提取液的純化。 5、測定含量。利用高效液相色譜儀分別測出苦參堿含量百分比。,2019/5/23,11,六、最佳條件的確定,1.所有數(shù)據(jù)輸入Design-Expert軟件，進行后期數(shù)據(jù)處理。實驗確定的四個因素最佳值分別為：液料比40：1、微波功率300W、微波溫度60、醇回流時間2 h。,編號,測量值,2019/5/23,12,最優(yōu)值,2.用軟件做出三維響應(yīng)曲面圖，確定響應(yīng)值的目標。 3.選取最佳方案。點擊solutions選項卡，第一個方案即為各因素取最優(yōu)值之后響應(yīng)所能取得的最大值。 4.按照最佳方案進行三組重復(fù)實驗，檢驗提取率是否為理論值。,2019/5/23,13,2019/5/23,14,七、實驗設(shè)計的創(chuàng)新點,參考文獻 1.盛貴華, 周全城. 超聲波輔助提取山豆根苦參堿研究J. 食品科技, 2008, 38(11): 103-106. 2.郭維圖. 微波中藥提取的研究與開發(fā)J. 醫(yī)藥工程設(shè)計, 2008,24(2): 57-62. 3.霍清,林強. SP825大孔吸附樹脂分離苦參堿的研究J. 食品科學, 2007, 28 (11): 134-138 4.蔣珍藕.苦參堿的提取工藝及測定方法的研究進展. J.中醫(yī)藥導(dǎo)報,2005,8:90-94. 5.羅杰英,李煥德,周春山. 苦參藥材中苦參堿含量測定方法比較研究. J.中南藥學2005， 10(3),5. 6.趙煥霞.苦參片中苦參堿和氧化苦參堿的含量測定J.中國實驗方劑雜志,2008,14(2):13-14.,2019/5/23,15,小組感悟 1.每個實驗方案的確定都不是想象中的那么容易，需