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實驗九 紫外分光光度法測定 核酸的含量,一 實驗原理,核酸、核苷酸及其衍生物都具有共軛雙鍵系統(tǒng)，能吸收紫外光。RNA和DNA的紫外吸收高峰在A260nm波長處。一般在A260nm波長下，每ml含1gRNA溶液的光吸收值為0.022。所以測定未知濃度RNA溶液A260nm波長的光吸收值即可計算出其中核酸的含量。,二 實驗操作,1. 稱取核酸樣品0.05g加入2ml左右的DW溶解（可在水浴鍋上加熱促其溶解）然后用玻璃棒蘸取稀氨水調節(jié)pH到7使用pH試紙調節(jié)調好后將樣品液定容到5ml（使用10ml量筒定容）,2. 取2支離心管，按下表加樣振蕩均勻在冰箱中冷卻30min然后離心15min,V=8000,3. 上清液稀釋100倍： 用移液管從離心管中移取0.5ml上清液置于量筒中用DW定容到50ml倒入小燒杯攪拌均勻然后用紫外分光光度計測OD260nm值A1,A2 4. 計算： RNA (A1-A2) / 0.022 / 50 100,

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