燒傷患者外周血T淋巴細胞亞群表達與炎性標志的分析楊勇袁梅陳琪摘要：目的探討患者燒傷后外周血T淋巴細胞亞群表達以及與炎癥標志指標的相關變化。方法根據燒傷面積程度分為重度燒傷組和輕度灼傷組（包括電擊傷、燙傷），對照組使用常規(guī)的體檢健康對象；采用流式細胞儀的單克隆抗體分析細胞免疫指標（CD3，CD4，CD8，CD19，NK）和散射比濁法分析炎癥因子指標（CRP，AAG，HP，CER），觀察細胞免疫指標（CD3，CD4，CD8，CD19，NK）和炎癥因子指標（CRP，AAG，HP，CER）的變化。結果重度燒傷燒傷患者的各項免疫指標出現(xiàn)明顯異常，其中CD3，CD4，CD4/CD8統(tǒng)計學意義(P0.01)，CD8，NK統(tǒng)計學意義（P0.05）；而輕度燒傷患者的各項免疫指標無明顯異常；重度燒傷組的CRP，AAG，HP和輕度燒傷組的HP指標與正常對照組間存在非常顯著差異（P0.01）；重度燒傷組的CER和輕度燒傷組的CER，HP與正常對照組間存在顯著差異（P0.05）。結論外周血T淋巴細胞亞群表達以及與炎癥標志指標檢測對臨床的診斷、治療和病情監(jiān)測是至關重要。關鍵詞：燒傷T淋巴細胞亞群炎癥標志全身炎癥反應綜合征（Systemicinflammatoryresponsesyndrome,SIRS）為各種感染和非感染損傷引發(fā)機體全身炎癥反應1，是大面積燒傷常見的并發(fā)癥，在危重燒傷患者中發(fā)病率很高。因外周血T淋巴細胞亞群表達的CD4/CD8明顯下降5，可導致SIRS發(fā)生，最終引發(fā)多器官功能受損乃至死亡。目前尚無關于燒傷后患者外周血T淋巴細胞亞群表達以及與SIRS炎性標志諸如C-反應蛋白（CRP），-酸性糖蛋白（AAG），結合珠蛋白（HP），銅蘭蛋白（CER）相關變化的臨床報道。為探討患者燒傷后外周血T淋巴細胞亞群表達以及與炎癥標志指標的相關變化，積極有效的掌握燒傷患者病情發(fā)展，進行有效治療，本文采用流式細胞術及免疫比濁法分析40例我院不同程度燒傷患者外周血T淋巴細胞亞群以及和幾種主要炎癥因子的關系，現(xiàn)將結果報告如下。1、臨床資料與方法1.1研究對象選擇2009年1月至2011年12月入住我院燒傷整形科患者，燒傷組40例，其中男性27例，女性13例，年齡在668歲；所選患者均為燒傷前健康，無肝炎、自身免疫性疾病或慢性炎癥病史等；選自我院門診健康體檢者對照組30例(均為血液，B超，放射檢驗結果正常者)；所有檢測血清標本均保存于零下20，并每季度檢測炎性指標一次，全血標本當日檢測；本文根據燒傷面積程度分為重度燒傷組和輕度灼傷組（包括電擊傷、燙傷），其中重度燒傷組90%（1例燒傷面積為23%的輕度燒傷患者，后文忽略）以上為燒傷面積大于80%且為燒傷-度的重度燒傷患者（這種患者一直是燒傷外科救治的難點，其病程長，并發(fā)癥多且兇險，死亡率高3），輕度灼傷組損傷面積為2-10%。1.2試劑儀器流式細胞試劑由美國INVITROGEN公司生產，杭州聯(lián)科生物技術有限公司提供，儀器為德國制造的PARTEC流式細胞儀，型號為PAS；炎癥因子試劑由美國BECKMANCOULTER公司生產，上海華美倫生物技術有限公司提供，儀器為美國BECKMANCOULTER公司制造的IMMAGE800特定蛋白分析儀。1.3方法流式細胞儀的單克隆抗體分析細胞免疫指標，包括白細胞分化抗原CD3，CD4，CD8，CD19，自然殺傷細胞NK；散射比濁法分析炎癥因子指標，包括C-反應蛋白（CRP），-酸性糖蛋白（AAG），結合珠蛋白（HP），銅蘭蛋白（CER）。1.4統(tǒng)計學分析數據XS表示，組間均值采用t檢驗，P0.05有統(tǒng)計學意義。2、結果2.1表1結果顯示，在重度燒傷組、輕度燒傷組與正常對照組比較可以看出，重度燒傷燒傷患者的各項免疫指標出現(xiàn)明顯異常，其中CD3，CD4，CD4/CD8統(tǒng)計學意義(P0.01)，CD8，NK統(tǒng)計學意義（P0.05），而輕度燒傷患者的各項免疫指標無明顯異常。2.2表2結果顯示，在各項炎癥指標中，重度燒傷組的CRP，AAG，HP和輕度燒傷組的HP指標與正常對照組間存在非常顯著差異（P0.01）；重度燒傷組的CER和輕度燒傷組的CER，HP與正常對照組間存在顯著差異（P0.05）。3、討論燒傷患者免疫功能紊亂這一事實已被大量的資料所證實，其中細胞免疫功能下降4，是嚴重燒傷后并發(fā)全身性感染，多器官功能受損，乃至死亡的重要原因之一。全面觀察燒傷后患者細胞免疫功能的變化，特別是重度燒傷患者，對了解燒傷后機體免疫狀況，探索免疫功能紊亂的發(fā)生機制及其免疫功能紊亂的治療及病情監(jiān)測有一定的臨床價值。T淋巴細胞主要執(zhí)行細胞免疫的效應功能及免疫調節(jié)功能。本文表1顯示：重度燒傷組外周血CD3細胞比例明顯較正常組下降，說明重度燒傷患者細胞免疫功能處于抑制狀態(tài)。CD4細胞和CD8細胞是參與細胞免疫調節(jié)的一對相互制約的T淋巴細胞亞群；CD4細胞為輔助/誘導T細胞亞群，主要是協(xié)調B細胞分化抗體，CD8細胞為抑制/細胞毒T細胞亞群，它抑制抗體的合成、分泌及T細胞的增殖，兩者的穩(wěn)態(tài)維持著機體的免疫應答。在重度燒傷組中，外周血CD4細胞比例明顯低于正常組，CD8細胞比例則高于正常組，CD4/CD8細胞比值明顯低于正常組，說明重度燒傷機體的免疫穩(wěn)態(tài)遭到破壞，正是這種穩(wěn)態(tài)的破壞，導致燒傷機體發(fā)生免疫功能紊亂，并發(fā)全身感染，器官損傷的重要原因之一。在輕度燒傷患者中，各項免疫指標無顯著變化，根據免疫指標的變化同時可以了解病情的嚴重程度。由此，檢測燒傷患者外周血T淋巴細胞亞群的表達，對燒傷患者，特別是重度燒傷患者機體免疫功能了解控制以及病情發(fā)展起到至關重要的意義。另一方面，燒傷后患者機體的炎癥反應本質上是對燒傷所致組織損傷的一種防御反應有助于清除創(chuàng)面壞死組織，限制組織損傷的擴大和加速組織的修復。本文表2顯示：重度燒傷組的CRP，AAG，HP較正常對照組明顯升高（P0.01），而CER較正常對照組降低；輕度灼傷組CRP，HP較正常對照組升高（P0.05），而CER較正常對照組降低，AAG則無明顯變化。同時可以看出重度燒傷組的CRP，AAG較輕度灼傷組明顯升高（P0.05），從而說明炎癥因子指標CRP，AAG可以反映燒傷患者機體的炎癥損傷及其嚴重程度。由于燒傷越重，病程越長，全身性感染發(fā)病率越高2，而且過激的炎癥應激性反應，往往導致全身炎癥反應綜合征（Systemicinflammatoryresponsesyndrome,SIRS）的發(fā)生以及對組織器官的直接損傷，積極有效扶持機體抵抗力，成為治愈重度燒傷的關鍵，對燒傷患者盡早行炎癥因子指標檢測非常必要。綜上所述，燒傷患者機體不僅存在細胞免疫功能的低下，而且也呈現(xiàn)炎癥反應的增強；如何調節(jié)提高燒傷患者，尤其是重癥燒傷患者機體的細胞免疫功能和控制過激的炎癥應激性反應，防止燒傷患者的全身性感染以及器官損傷，對燒傷患者行外周血淋巴細胞亞群和炎癥因子指標檢測，對協(xié)助臨床燒傷患者的診斷、治療和病情監(jiān)測是至關重要的。參考文獻1、孫東明，程亞潁，井麗娟，等。全身炎癥反應綜合征患兒血內毒素、脂多糖結合蛋白/脂多糖受體水平變化的意義J，實用兒科臨床雜志，2007，22（6）：426-427。2、黎鰲主編，燒傷治療學M，第2版，北京：人民衛(wèi)生出版社，1995；80。3、BakZ,BergF,ErikssonO,et.al,HemodynamicchangesduringresuscitarionafterburnsusingtheParklandformulaJ,JTrauma；2009,66(2):329-336。4、HousbroughJF,ZopatelSirveeilRL,PatersonVM,ImmmunomulutionfollowingburninJuryJ,SurgclinNorAm,198767:69-72。5、EdwardRS,Toliverk,etal,MechanismsoftheinflammatoryresponseJ.BestPractResClinAuaesthesiol,2004,18(3):385-405。表1不同燒傷組與正常組之間細胞免疫功能結果比較組別項目正常對照組輕度燒傷組重度燒傷組CD370.38.967.610.048.211.6（p0.01）CD440.89.438.77.225.912.8（p0.01）CD826.85.526.46.937.615.9（p0.05）NK16.94.815.95.113.69.5（p0.05）CD4/CD81.50.51.40.50.90.5（p0.01）注：P值均為上標提示表2不同燒傷組與正常組之間炎癥指標結果比較組別項目正常對照組輕度燒傷組重度燒傷組CRP0.450.382.451.38（p0.05）13.64.8（p0.01）AAG103.948.6113.746.4