腫瘤免疫與CAR-T細(xì)胞治療,1,.,2019/11/1,主要內(nèi)容,腫瘤免疫逃逸腫瘤免疫治療CAR-T細(xì)胞治療,2,.,2019/12/13,腫瘤抗原,定義：細(xì)胞癌變過程中新出現(xiàn)的抗原,以及過度表達(dá)的抗原物質(zhì),的總稱,產(chǎn)生機(jī)制,新的蛋白質(zhì),蛋白的特殊降解產(chǎn)物,基因突變或重排使蛋白結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,隱蔽的抗原表位暴露,多種膜蛋白分子的異常聚集,胚胎抗原或分化抗原的異常高表達(dá),3,.,2019/12/13,腫瘤特異性抗原：,腫瘤相關(guān)抗原：,（Tumorspecificantigen,TSA),（Tumorassociatedantigen,TAA),腫瘤細(xì)胞特有，正常細(xì)胞不存在,正常細(xì)胞組織也存在，但腫瘤細(xì)胞中含量明顯增高,4,.,2019/12/13,二.機(jī)體抗腫瘤免疫機(jī)制,非特異性免疫：,特異性免疫,巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞、多形核細(xì)胞,體液免疫細(xì)胞免疫,5,.,2019/12/13,(一）體液免疫機(jī)制,1.CDC、ADCC、調(diào)理作用：,通過補(bǔ)體、巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞、中性粒細(xì)胞介導(dǎo)殺傷腫瘤細(xì)胞,6,.,2019/12/13,2.封閉抗體：,抑制：與腫瘤細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化、增殖、轉(zhuǎn)移有關(guān)的抗原,如p185可抑制增殖、轉(zhuǎn)鐵蛋白受體可抑制生長、粘附分子可阻止克隆形成與轉(zhuǎn)移,增強(qiáng)抗體：,封閉抗原位點(diǎn)，阻礙殺傷性免疫細(xì)胞的作用,7,.,2019/12/13,（二）細(xì)胞免疫機(jī)制,1.T細(xì)胞,腫瘤Ag,腫瘤細(xì)胞的MHCI類分子遞呈,CD8+CTL,脫落后由APC攝取、MHCII類分子遞呈,CD4+Th,8,.,2019/12/13,CD8+CTL,直接殺傷,分泌多種細(xì)胞因子,IFN-、TNF,CD4+Th,釋放CK如IL-2：激活CTL、NK、巨噬細(xì)胞,釋放IFN-、TNF：促進(jìn)MHCI類表達(dá)、有利于直接殺傷,促進(jìn)B細(xì)胞活化、增殖、分化,少數(shù)可直接殺傷腫瘤細(xì)胞,9,.,2019/12/13,10,.,2019/12/13,11,.,2019/12/13,1.NK細(xì)胞,不依賴抗體或補(bǔ)體、不需預(yù)先活化、無MHC限制即可直接殺傷腫瘤細(xì)胞,通過激活性受體/抑制性受體的平衡而識(shí)別,特異性免疫應(yīng)答的效應(yīng)階段（ADCC）,（三）非特異性免疫,12,.,2019/12/13,2、T細(xì)胞,3.巨噬細(xì)胞,作為APC，激活T,巨噬細(xì)胞殺傷腫瘤,13,.,2019/12/13,三.腫瘤免疫逃逸機(jī)制,（一）與腫瘤有關(guān)的因素,1.抗原缺失或抗原調(diào)變,遺傳不穩(wěn)定性,突變或丟失,免疫原性極弱,抗原調(diào)變(antigenicmodulation),免疫系統(tǒng)攻擊導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞表面抗原表位減少或丟失，從而逃避殺傷,14,.,2019/12/13,2.MHCI類分子表達(dá)減少,3.缺乏協(xié)同刺激分子：B7、ICAM-1、LFA-1,4.漏逸：腫瘤迅速生長超越機(jī)體清除能力,5.腫瘤導(dǎo)致的免疫抑制：,分泌某些CK（如TGF-、IL-10）,營造局部免疫豁免（如高表達(dá)FasL破壞免疫細(xì)胞）,15,.,2019/12/13,16,.,2019/12/13,（二）與宿主有關(guān)的因素,免疫功能低下或缺陷,免疫抑制,免疫耐受狀態(tài),17,.,2019/12/13,腫瘤免疫治療（cancerimmunotherapy）是利用人體的免疫機(jī)制，通過主動(dòng)或被動(dòng)的方法來增強(qiáng)患者免疫功能，達(dá)到殺傷腫瘤細(xì)胞的目的，為腫瘤生物治療方法之一。,18,.,2019/12/13,腫瘤免疫治療的原理是通過增強(qiáng)抗腫瘤免疫應(yīng)答和打破腫瘤的免疫抑制產(chǎn)生抗腫瘤作用。,19,.,2019/12/13,腫瘤免疫治療分類,一、,主動(dòng)免疫治療,二、,被動(dòng)免疫治療,三、,非特異性免疫調(diào)節(jié)劑治療,20,.,2019/12/13,一、主動(dòng)免疫治療,也稱為腫瘤疫苗，主要是利用腫瘤細(xì)胞或腫瘤抗原物質(zhì)免疫機(jī)體，使宿主免疫系統(tǒng)產(chǎn)生針對(duì)腫瘤抗原的抗腫瘤免疫應(yīng)答，從而阻止腫瘤生長、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)。腫瘤疫苗是對(duì)已患病者進(jìn)行免疫接種，激發(fā)腫瘤患者機(jī)體產(chǎn)生對(duì)腫瘤的特異性免疫應(yīng)答?？僧a(chǎn)生免疫記憶，抗腫瘤作用比較持久。分類：腫瘤細(xì)胞疫苗、腫瘤多肽（蛋白）疫苗、樹突狀細(xì)胞疫苗、抗獨(dú)特型抗體疫苗、DNA疫苗,21,.,2019/12/13,1.腫瘤細(xì)胞疫苗2.腫瘤多肽（蛋白）疫苗3.DC疫苗4.抗獨(dú)特型抗體疫苗5.DNA疫苗,腫瘤全細(xì)胞疫苗,腫瘤細(xì)胞裂解物疫苗,基因修飾的腫瘤細(xì)胞疫苗,3.DC疫苗,4.抗獨(dú)特型抗體疫苗,2.腫瘤多肽（蛋白）疫苗,5.DNA疫苗,腫瘤的主動(dòng)免疫治療分類,1.腫瘤細(xì)胞疫苗,22,.,2019/12/13,已批準(zhǔn)進(jìn)行期臨床試驗(yàn)及臨床應(yīng)用的腫瘤疫苗舉例,23,.,二、被動(dòng)免疫治療,被動(dòng)免疫治療（passiveimmunotherapy）又稱為過繼免疫治療（adoptiveimmunotherapy）是被動(dòng)性的將具有抗腫瘤活性的免疫制劑或細(xì)胞轉(zhuǎn)輸給腫瘤患者，以達(dá)到治療腫瘤的目的。被動(dòng)免疫治療與腫瘤疫苗不同，并不需要機(jī)體產(chǎn)生初始免疫應(yīng)答，因此適用于已經(jīng)沒有時(shí)間或能力產(chǎn)生初始免疫應(yīng)答的腫瘤晚期患者。分類：單克隆抗體治療;過繼性細(xì)胞治療,24,.,2019/12/13,又稱之為生物導(dǎo)彈技術(shù)，通過補(bǔ)體系統(tǒng)、自然殺傷細(xì)胞和阻斷信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路起抗腫瘤作用。,嵌合型單抗達(dá)到95%以上人源化，減少了免疫原性。利妥西單抗治療惡性淋巴瘤；曲妥珠單抗治療乳癌，聯(lián)合化療增強(qiáng)療效。,單克隆抗體治療,25,.,2019/12/13,過繼性細(xì)胞治療,過繼性細(xì)胞治療是通過分離自體或異體免疫效應(yīng)細(xì)胞，經(jīng)體外激活并回輸，直接殺傷腫瘤或激發(fā)機(jī)體抗腫瘤免疫反應(yīng)。,過繼性細(xì)胞治療的關(guān)鍵在于產(chǎn)生數(shù)量足夠、能夠識(shí)別并殺傷腫瘤的免疫細(xì)胞，以及效應(yīng)細(xì)胞能夠到達(dá)腫瘤所在部位，并在腫瘤周圍被激活且發(fā)揮抗瘤作用。淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（LAK）、自然殺傷細(xì)胞（NK）、細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（CIK）、腫瘤浸潤T淋巴細(xì)胞（TIL）、T細(xì)胞、自然殺傷T細(xì)胞（NKT）、CD3單抗激活的殺傷細(xì)胞（CD3AK）、供者淋巴細(xì)胞輸注（donorlymphocyteinfusion，DLI）、受體基因修飾的T細(xì)胞等,26,.,2019/12/13,淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（LAK）是外周血單個(gè)核細(xì)胞在體外經(jīng)IL-2刺激活化后誘生的具有非特異性細(xì)胞毒作用的效應(yīng)細(xì)胞，是多種免疫細(xì)胞的群體。LAK細(xì)胞抗癌譜廣，抗腫瘤作用不依賴抗原致敏。LAK細(xì)胞通過直接接觸或釋放炎癥細(xì)胞因子間接殺傷腫瘤。臨床應(yīng)用：由于其體外增殖活性不強(qiáng)，體內(nèi)抗瘤活性有限，且為維持LAK細(xì)胞體內(nèi)活性，需要注射大劑量IL-2，而出現(xiàn)較強(qiáng)毒副作用，因此逐漸淡出臨床應(yīng)用。,淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞,27,.,2019/12/13,腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞（TIL）是從腫瘤部位分離出的一群淋巴細(xì)胞，經(jīng)IL-2等細(xì)胞因子擴(kuò)增后產(chǎn)生。其表型以CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞為主，具有一定的腫瘤特異性和MHC限制性。TIL的抗腫瘤效果是LAK的50100倍。臨床應(yīng)用：TIL已應(yīng)用于臨床試驗(yàn)，主要治療皮膚、腎、肺、頭頸部、肝、卵巢部位的原發(fā)或繼發(fā)腫瘤。但其取材不便和制作過程的相對(duì)復(fù)雜性限制了其在臨床的應(yīng)用。,腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞,28,.,2019/12/13,細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokineinducedkillercells，CIK）是外周血單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)抗CD3單克隆抗體，以及IL-2、IFN-和IL-1等細(xì)胞因子體外誘導(dǎo)分化獲得的NK樣T細(xì)胞。CIK呈CD3+CD56+表型，既具有NK細(xì)胞的非MHC限制性特點(diǎn)，又有T淋巴細(xì)胞抗腫瘤活性。具有增殖速度快，殺傷活性高，腫瘤殺傷譜廣等優(yōu)點(diǎn)。臨床應(yīng)用：目前發(fā)現(xiàn)CIK在腎癌、肝癌、肺癌、白血病等多種腫瘤中具有抗瘤活性。,細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞,29,.,2019/12/13,NK細(xì)胞可識(shí)別MHC-I表達(dá)下調(diào)或缺失的腫瘤細(xì)胞，無需抗原預(yù)先致敏即可以直接殺傷腫瘤細(xì)胞，其殺傷腫瘤細(xì)胞的機(jī)制有：通過分泌穿孔素、顆粒酶來殺傷腫瘤細(xì)胞；通過死亡配體介導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡；分泌炎癥因子間接殺傷腫瘤細(xì)胞；通過ADCC效應(yīng)殺傷腫瘤細(xì)胞。臨床應(yīng)用：隨著純化技術(shù)及擴(kuò)增技術(shù)的不斷改進(jìn)，NK細(xì)胞逐漸成為過繼性免疫治療重要組成部分。NK細(xì)胞目前仍處于/期臨床試驗(yàn)階段。,NK細(xì)胞,30,.,2019/12/13,T細(xì)胞是一類T細(xì)胞，因其TCR由和肽鏈組成而被命名，多為CD4-CD8-雙陰性表型。其殺傷腫瘤細(xì)胞的機(jī)制非常復(fù)雜，主要涉及到穿孔蛋白途徑和Fas/FasL介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑，也可以通過NK樣的受體，使之像NK細(xì)胞一樣可直接識(shí)別蛋白質(zhì)或肽類抗原，以非MHC限制性方式殺傷腫瘤細(xì)胞。臨床應(yīng)用：以T細(xì)胞為基礎(chǔ)的免疫治療在肺癌、腎癌、惡性黑色素瘤等期臨床研究中已顯示出良好效果，尤其是轉(zhuǎn)移性惡性黑色素瘤，提示其可能成為腫瘤治療的新途徑。,T細(xì)胞,31,.,2019/12/13,三、非特異性免疫調(diào)節(jié)劑治療,（一）效應(yīng)細(xì)胞刺激劑刺激活化免疫效應(yīng)細(xì)胞,（二）免疫負(fù)調(diào)控抑制劑抑制免疫負(fù)調(diào)控細(xì)胞或分子,32,.,2019/12/13,干擾素具有免疫調(diào)節(jié)、抗增殖、誘導(dǎo)分化、促凋亡、抗血管生成等多種作用，是第一個(gè)被證實(shí)具有抗腫瘤活性的細(xì)胞因子,咪喹莫特是Toll樣受體7（toll-likereceptor7，TLR7）的激動(dòng)劑，能增強(qiáng)固有免疫應(yīng)答和適應(yīng)性免疫應(yīng)答,效應(yīng)細(xì)胞刺激劑,IL-2是調(diào)控T細(xì)胞和NK細(xì)胞等淋巴細(xì)胞生長的重要因子,卡介苗既可以激發(fā)固有免疫應(yīng)答，又可以激發(fā)適應(yīng)性免疫應(yīng)答,（一）效應(yīng)細(xì)胞刺激劑,33,.,2019/12/13,Denileukindiftitox由IL-2的受體結(jié)合片斷與具有酶活性的白喉毒素跨膜片段重組融合，與IL-2受體（CD25）結(jié)合后，被攝取進(jìn)入胞漿，裂解釋放白喉毒素A鏈，持續(xù)抑制蛋白的合成，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。,CTLA-4單克隆抗體Ipilimumab和tremelimumab都是CTLA-4人源化單克隆抗體，主要通過抑制活化T細(xì)胞的CTLA-4與抗原遞呈細(xì)胞的B7結(jié)合，打破免疫耐受，增強(qiáng)T細(xì)胞的活性。,（二）免疫負(fù)調(diào)控抑制劑,34,.,2019/12/13,PD-L1抗體PD-1是程序性死亡受體-1，大部分表達(dá)于活化T細(xì)胞表面，為免疫抑制性受體，與其配體PD-L1、PD-L2相互作用傳遞抑制性信號(hào)，在免疫應(yīng)答中發(fā)揮負(fù)向調(diào)控作用。由于腫瘤細(xì)胞高表達(dá)PD-L1，故阻斷PD-L1與PD-1的結(jié)合可阻止此種機(jī)制介導(dǎo)的免疫抑制作用。,（二）免疫負(fù)調(diào)控抑制劑,35,.,2019/12/13,嵌合抗原受體（chimericantigenreceptor,CAR）T細(xì)胞技術(shù)；是過繼細(xì)胞免疫治療（adoptivecellularimmunotherapy，ACI)的一種；通過基因改造技術(shù)，讓患者T細(xì)胞表達(dá)嵌合抗原受體，使效應(yīng)T細(xì)胞的靶向性、殺傷性和持久性均較常規(guī)應(yīng)用的免疫細(xì)胞高，并可克服腫瘤局部免疫抑制微環(huán)境和打破宿主免疫耐受狀態(tài)；是一種特異性的免疫細(xì)胞抗腫瘤治療。,什么是CAR-T細(xì)胞,36,.,2019/12/13,T淋巴細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞的天敵，在腫瘤免疫應(yīng)答中起重要作用，對(duì)腫瘤細(xì)胞有極強(qiáng)的殺傷作用。對(duì)T細(xì)胞進(jìn)行基因工程處理，從而在其表面表達(dá)能夠識(shí)別特異性腫瘤抗原的特殊受體稱為嵌合抗原受體（CAR），同時(shí)在受體的胞內(nèi)段可加上引起T細(xì)胞活化的信號(hào)傳遞區(qū)域。腫瘤對(duì)患者的免疫系統(tǒng)具有抑制作用，限制了自身免疫功能的誘導(dǎo)和激活，因此可以把患者的免疫細(xì)胞放到一種可以避開腫瘤抑制因素的環(huán)境中進(jìn)行激活和擴(kuò)增，然后再將擴(kuò)增后的免疫細(xì)胞回輸患者，從而使患者的免疫功能迅速增強(qiáng)，達(dá)到殺傷腫瘤細(xì)胞的作用，這種療法就是過繼性免疫療法,37,.,2019/12/13,嵌合抗原受體（CARs）是由一個(gè)胞外抗原識(shí)別域（通常是一個(gè)單鏈抗體，也可以是多肽或者其他蛋白質(zhì)）和一個(gè)胞內(nèi)信號(hào)域組成。CAR的胞外部分用來識(shí)別特異性的腫瘤抗原，隨后胞內(nèi)信號(hào)域會(huì)刺激T細(xì)胞增殖，并且通過細(xì)胞溶解和細(xì)胞因子釋放來消除腫瘤細(xì)胞。,38,.,2019/12/13,第一代CARs的胞內(nèi)信號(hào)域是CD3信號(hào)鏈（signal1），這一代產(chǎn)品在臨床試驗(yàn)中效果有限，可能由于移植T細(xì)胞的活化誘導(dǎo)細(xì)胞死亡（AICD）或者T細(xì)胞擴(kuò)增的持續(xù)性不好所導(dǎo)致。第二代CARs相比第一代CARs增加了一個(gè)胞內(nèi)共刺激信號(hào)域（signal2）。在過去的5年里，對(duì)于第二代含有CD28或者4-1BB(CD137)共刺激信號(hào)域的抗CD19CAR-T，在治療B淋巴細(xì)胞白血病的臨床試驗(yàn)中都表現(xiàn)出優(yōu)異的療效，但是仍然需要尋找更好的共刺激信號(hào)分子，來解決第二代CAR-T產(chǎn)品作用不持久等問題。第三代CARs不僅包含CD3信號(hào)域，還包括兩個(gè)共刺激信號(hào)分子（圖1），這些共刺激信號(hào)分子主要包括CD28、4-1BB以及OX40(CD134)等，在臨床前研究中發(fā)現(xiàn)第三代CAR-T細(xì)胞療法效果要優(yōu)于第二代產(chǎn)品,39,.,2019/12/13,CAR構(gòu)成（1）-scFV（單鏈抗體）,識(shí)別腫瘤表面抗原,特異性,40,.,2019/12/13,CAR構(gòu)成（2）-TCR/CD3/,產(chǎn)生信號(hào)，激活T淋巴細(xì)胞,有效性,41,.,2019/12/13,CAR構(gòu)成（3）-co-stimulator,增殖與存活,加入CD28，產(chǎn)生IL-2等,加入CD137（4-1BB），增強(qiáng)多種能力,CD28是T細(xì)胞表面的一個(gè)蛋白，能夠?yàn)門細(xì)胞提供共刺激信號(hào)，對(duì)T細(xì)胞的活化和存活具有重要作用。T細(xì)胞刺激信號(hào)通過CD28，能夠促進(jìn)多種白介素的分泌。,CD137，又被稱作4-1BB、TNFRSF9等，它是TNF受體家族成員。CD137表達(dá)于活化后的T細(xì)胞，也表達(dá)于樹突細(xì)胞，濾泡樹突狀細(xì)胞、NK細(xì)胞、粒細(xì)胞以及炎癥位置的血管壁細(xì)胞等。CD137可以作為共刺激信號(hào)激活T細(xì)胞，能夠增強(qiáng)T細(xì)胞的增殖、存活能力、細(xì)胞裂解作用以及IL-2分泌等。,42,.,2019/12/13,第一代CAR-T細(xì)胞發(fā)表時(shí)間：1989年；嵌合受體的形成方法：Eshhar研究小組將免疫球蛋白樣scFv和FcRI受體(鏈)或CD3復(fù)合物(鏈)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域融合形成嵌合受體；激活方式：表達(dá)CAR的T細(xì)胞以抗原依賴、非MHC限制的方式結(jié)合腫瘤抗原,啟動(dòng)并活化特異性殺傷腫瘤反應(yīng)；CARs表達(dá)的穩(wěn)定性依賴于所用的胞內(nèi)信號(hào)域；大多數(shù)試驗(yàn)在細(xì)胞擴(kuò)增、體內(nèi)存活時(shí)間、細(xì)胞因子分泌等方面存在不足，治療效果不明顯。,CAR-T細(xì)胞的發(fā)展過程,43,.,2019/12/13,44,.,2019/12/13,第二代CAR-T細(xì)胞發(fā)表時(shí)間：2010年；嵌合受體的形成方法：T細(xì)胞的完全活化有賴于雙信號(hào)*和細(xì)胞因子的作用。因此，依照T細(xì)胞活化的雙信號(hào)學(xué)說,第二和第三代CARs在嵌合受體上加上如CD28、CD134(OX40)和CD137(4-1BB)等共刺激分子(costimulatorymolecule,CM)，以提高T細(xì)胞的細(xì)胞毒性、增殖活性,維持T細(xì)胞應(yīng)答,延長T細(xì)胞存活時(shí)間等（圖2）；CD28、CD134對(duì)提高初始T細(xì)胞獲得持久的體外增殖和較強(qiáng)的細(xì)胞因子分泌非常重要；在治療慢淋中觀察到：體內(nèi)擴(kuò)增1000倍以上,而且在血液和骨髓中存活的時(shí)間也超過6個(gè)月,分泌的細(xì)胞因子如干擾素-、CXCL9等較治療前顯著增高。,CAR-T細(xì)胞的發(fā)展過程,45,.,2019/12/13,T細(xì)胞激活需要雙信號(hào),第一信號(hào)為特異性信號(hào),由TCR識(shí)別抗原遞呈細(xì)胞表面的抗原肽-MHC復(fù)合物所啟動(dòng);第二信號(hào)為協(xié)同刺激信號(hào),通過CD28/B7等重要的共刺激分子,促進(jìn)IL-2合成,并使T細(xì)胞充分活化及免于凋亡。,46,.,2019/12/13,第三代CAR-T細(xì)胞發(fā)表時(shí)間：2012年；嵌合受體的形成方法：以逆轉(zhuǎn)錄病毒為載體構(gòu)建第三代CAR-T細(xì)胞(scFvCD20-CD28-CD137-CD3）；兩個(gè)共刺激因子，進(jìn)一步提高細(xì)胞增殖能力及細(xì)胞毒性患者輸注后4小時(shí)血液就檢測出有高水平的IFN-、GM-CSF、TNF-和IL-6等細(xì)胞因子；效應(yīng)細(xì)胞在體內(nèi)存活的時(shí)間超過12個(gè)月；由于目前第三代CAR-T細(xì)胞臨床應(yīng)用還比較少,故其安全性和有效性是否就一定優(yōu)于第二代CAR-T細(xì)胞,以及選擇怎樣的共刺激分子組合,還需進(jìn)一步觀察。,CAR-T細(xì)胞的發(fā)展過程,47,.,2019/12/13,2nd病毒載體的轉(zhuǎn)移效率高,培養(yǎng)T細(xì)胞到達(dá)臨床數(shù)量的時(shí)間相對(duì)較短,且不同病毒載體具有不同表達(dá)特點(diǎn)，故在基礎(chǔ)研究和臨床試驗(yàn)中應(yīng)用廣泛，是目前主要的基因治療載體。約70%的治療方案采用病毒載體。目前最常用的主要是逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒和腺相關(guān)病毒載體等；非病毒載體有裸DNA、脂質(zhì)體、多聚物分子耦聯(lián)體等；近年來,，微環(huán)DNA被認(rèn)為是最好的非病毒載體之一,在基因治療中已被廣為應(yīng)用。,CAR-T細(xì)胞基因轉(zhuǎn)導(dǎo)的方法,59,.,2019/12/13,60,.,2019/12/13,CAR-T細(xì)胞臨床應(yīng)用中的問題,CAR-T細(xì)胞的脫靶效應(yīng)(OFF-TARGETEF