微生態(tài)制劑的臨床應(yīng)用 李世榮 人體微生態(tài)系統(tǒng) 人體正常菌群種類達(dá) 500余種 數(shù)量達(dá) 100萬億 個(gè)（人體體細(xì)胞只 有 10萬億 個(gè)） 重量約 1271克，相當(dāng)于肝臟的重量 1g 1000g (78.67%) 20g 200g 20g 10g 20g 腸道菌群 分布 103/ml 幽門螺桿菌 H.p 104106/ml 乳酸桿菌lactobacillus G 球菌G+enterococcus 1012/g 乳酸桿菌，雙歧桿菌，消化性鏈球菌，梭菌屬等 從出生之后不久，就有各式各樣的細(xì)菌棲息在我們的腸中。 如果將一個(gè)人的腸內(nèi)細(xì)菌排成一列，其長(zhǎng)度約可繞行地球 2周多。 腸道菌群 微生態(tài)學(xué)的重大發(fā)現(xiàn) Dderlein(Albert Dderlein 1890) 發(fā)現(xiàn)健康陰道主要為一種大的革蘭陽(yáng)性桿菌所寄居 。這種菌的減少，代之以革蘭陰性桿菌及其他菌的增加，則是患陰道病的征兆。奠定了陰道微生態(tài)學(xué)的基礎(chǔ)。 Tisser(H.Tisser 1899) 發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌(Bifidobacterim) 雙歧桿菌的存在，不僅和腹瀉的發(fā)生頻率有關(guān)， 而且與營(yíng)養(yǎng)有關(guān)。 菌群平衡 健康 有害菌 有益菌 益生菌的作用 什麼原因引起動(dòng)物死亡？ 紅霉素 鏈霉素 菌群紊亂 菌群正常 腸炎沙門菌 死亡 正常 正常菌群有防止致病菌定植繁殖致病的作用 益生菌對(duì)胃腸道疾病的治療作用 調(diào)節(jié)腸道菌群平衡 腹瀉 便秘 消化不良 旅行者腹瀉 乳糖酶缺乏和乳糖不耐受 (LD & LI) 慢性肝病 炎癥性腸?。?IBD） 腸易激綜合征（ IBS） 結(jié)腸癌 避免抗生素濫用 歐州多中心， 287例 ,腹瀉持續(xù)時(shí)間： 治療組 58 28h， 對(duì)照組 72 36h 明顯縮短腹瀉病程 對(duì)旅游者腹瀉推薦微生態(tài)制劑用于預(yù)防和治療 微生態(tài)制劑對(duì)急性病毒性胃腸炎療效顯著 IBD的腸道菌群分析 1） UC活動(dòng)期較非活動(dòng)期正常菌群原籍菌明顯減少 2）活動(dòng)性腸炎厭氧菌及乳桿菌數(shù)量下降 3）腸道菌群失調(diào)導(dǎo)致腸上皮對(duì)致病性腸內(nèi)細(xì)菌保護(hù)性反應(yīng)過高也是引起 UC原因 炎癥性腸病與微生態(tài) 1.一項(xiàng)無對(duì)照研究 : 有益酵母菌 250mg， 3次 /日， 4周后， 24例活動(dòng)期 UC中 17例（ 71%）誘導(dǎo)至緩解 2.另一項(xiàng)無對(duì)照研究 : 30例活動(dòng)期 UC，用 VSL3（含 4種乳酸桿菌、 3 種雙歧桿菌和 1種嗜熱唾液鏈球菌 SPP）治療 3 個(gè)月。有效率 87%， 19例（ 63%）達(dá)緩解。 克羅恩病的維持治療32 例臨床緩解的 CD美沙拉嗪 美沙拉嗪1 克 t i d 1 克 B i d + 布拉地酵母菌( saccharomyces bonlardii )療程 6 月 6 月復(fù)發(fā) 3 7 . 5 % 6 . 2 5 %( C D A I )Guslandi M 等 DDS 2000益生菌對(duì) IBS的治療作用 白曉茹 非對(duì)照 三聯(lián)益生菌 289 92.8% 90% 中國(guó)微生態(tài) 鄒開芳 開放對(duì)照 匹維溴銨 / 84 81.2% 69.6% 同濟(jì)學(xué)報(bào) 酪酸菌 +匹維溴銨 95.9% 93.3% 徐 萍 開放對(duì)照 硝苯吡啶 60 51% 50.3% 中國(guó)微生態(tài) 雙歧桿菌 52.3% 61.9% 胡品津 多中心隨機(jī) 谷維素 120 治療組總療效 胃腸病學(xué) 雙盲模擬 雙歧桿菌 明顯優(yōu)于對(duì)照組 P0.01 作者 觀察 藥物 例數(shù) 結(jié) 果 出 處 方式 腹痛 腹瀉 抗生素性腹瀉與腸道菌群失調(diào) 治 療 （一） 微生態(tài)制劑是治療輕、中型抗生素性腹瀉的主要藥物 抗生素（癥狀嚴(yán)重、持續(xù)者） 萬古霉素： 125mg,4id,7-14天 甲硝唑： 250mg,3id,7-14天 桿菌肽： 25000u,4id,7-14天 復(fù)發(fā)病例： 第一次復(fù)發(fā) -萬古霉素 /甲硝唑 ； 第二次 -萬古霉素靜脈 125mg，每 6小時(shí)， 7天 再?gòu)?fù)發(fā)：免疫球蛋白 +微生態(tài)制劑 新藥： Synsorb Cd(正進(jìn)行三期臨床 )一種寡醣與生物吸附劑的合成 物，可選擇性與 A毒素結(jié)合 治 療 （二） 免疫治療： Kelly發(fā)現(xiàn)輕癥、自限性疾病患者血清中有抗 C difficile IgG抗體 應(yīng)用人丙種球蛋白加上萬古霉素 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)正在研究牛的抗 C difficile 抗體是否有治療作用 口服或黏膜免疫也在研究中 微生態(tài)的預(yù)防腫瘤作用 結(jié)合致癌物質(zhì) ；降低腸道 PH；調(diào)節(jié)免疫狀態(tài) Marotta 給 A、 B組大鼠正常飲食， C組加益生菌 A組注射 N.S, B、 C組注射致癌物 。 20周后 B組細(xì)胞分裂指數(shù)高于 A組； B組 90%患有結(jié)腸癌， C組僅 50%患癌 周國(guó)華發(fā)現(xiàn)大腸息肉、癌和正常結(jié)腸的腸道內(nèi)雙歧桿菌分別占腸道總細(xì)菌的 25%、 30%和 55% 微生態(tài)制劑對(duì)輕癥肝性腦病的影響 55例 HE： 20：微生態(tài)； 20：纖維素； 15:對(duì)照 HE肝硬化患者糞便有致病性大腸桿菌和糞鏈球菌過度生長(zhǎng) 微生態(tài)制劑可增加非產(chǎn)氨的乳酸桿菌量 降低血氨 50% HE患者恢復(fù) 降低內(nèi)毒素血癥 50% MHE患者 Child-Turcotte-Pugh評(píng)分改善 Liu Q, et al. Hepatology 2004；39:1441-9 微生態(tài)制劑在其它疾病中的應(yīng)用 冠心病 :降低血膽固醇 ,預(yù)防冠心病 陰道炎 :每周 1次陰道栓劑 ,可降低陰道炎發(fā)病率 抗 HP:體外實(shí)驗(yàn)證明益生菌可抑制 HP生長(zhǎng) ,減低尿素酶活性 預(yù)防腫瘤 :抑制某些產(chǎn)亞硝胺細(xì)菌生長(zhǎng) ,腸內(nèi)給藥 ,減少膀胱癌復(fù)發(fā) 分娩前 4周服用 益生菌制劑 ,可 減少新生兒過敏性疾病發(fā)生率 : 丁酸梭菌屬屎腸球菌糞腸球菌枯草芽孢蠟樣芽孢地衣芽孢 酪酸菌媽咪愛 美常安 培菲康 長(zhǎng)雙岐 金雙歧 長(zhǎng)雙岐 麗珠腸樂 青春雙岐整腸生 米雅 促菌生 樂托兒 嗜熱鏈球菌腸球菌屬 芽孢桿菌屬乳桿菌屬雙岐 桿菌屬常見微生態(tài)制劑菌種 WHO益生菌指南 1、存活力 補(bǔ)充的活菌數(shù) 及 通過胃腸道到達(dá)定植位點(diǎn)的活菌 2、繁殖力 定植和繁殖能力 3、遺傳穩(wěn)定性檢測(cè) /菌種保存 基因水平檢測(cè)證明，國(guó)際編碼國(guó)際性保存 4、使用聲明 應(yīng)有科學(xué)證據(jù)支持 Source: Joint FAO/WHO Expert consultation on evaluation of health and nutritional properties of probiotics in food including powder milk with live lactic acid bacteria. Crdoba, Argentina. October 1-4, 2001. 微生態(tài)制劑生產(chǎn)要求 科研階段： 菌株篩選 通過胃腸道耐酸耐膽鹽的能力 定植能力，繁殖能力 對(duì)溫度的耐受性 生產(chǎn)階段： 質(zhì)量保證 菌株穩(wěn)定 數(shù)量保證 活菌數(shù)量（避免生產(chǎn)流通中溫度 /濕度 /氧氣對(duì)活菌的破壞） 菌株 胃液 通過胃酸屏障 耐酸 膽汁 耐膽汁 通過膽汁屏障 （十二指腸上端 ） 小 腸大腸 定植生長(zhǎng)繁殖 發(fā)揮作用 菌量 +菌株 +制劑 穩(wěn)定 活菌微生態(tài)制劑應(yīng)具備條件： 運(yùn)輸、儲(chǔ)存 生產(chǎn) 耐溫 體外 體內(nèi) 北京韓美 微生態(tài) 系列產(chǎn)品 枯草桿菌、腸球菌二聯(lián)活菌腸溶膠囊 新型微生態(tài)制劑美常安 枯草桿菌、腸球菌二聯(lián)活菌腸溶膠囊 菌株獨(dú)特 腸溶劑型 枯草桿菌、屎腸球菌菌株特點(diǎn) 菌種由加拿大 Rosel研究所提供 活菌數(shù)高（ 5億 /粒） 耐溫；耐酸；耐膽鹽；定植力強(qiáng)，繁殖迅速 利于原籍菌生長(zhǎng) 枯草桿菌分泌大量消化酶；屎腸球菌產(chǎn)乳酸 益生菌酸耐受性試驗(yàn)結(jié)果 70% 80% 78% 100% 60% 45% 100% 99% PH 4 0% 0.2% 0.05% 0% 0% 0% 0.03% 78% PH 2 R-083 R-002 R-026 R-175 R-033 R-070 R-071 R-179 Rosell編號(hào) 嗜熱乳桿菌 短乳桿菌 屎腸球菌 長(zhǎng)雙歧桿菌 嬰兒雙歧桿菌 短雙歧桿菌 兩歧雙歧桿菌 枯草桿菌 Rosell菌株 不同 Rosell益生菌株在不同 PH 條件下孵化 30分鐘的存活率 益生菌膽鹽抑制試驗(yàn)結(jié)果 R-078 R-002 R-026 R-175 R-033 R-070 R-071 R-179 Rosell編號(hào) 唾液乳桿菌 短乳桿菌 屎腸球菌 長(zhǎng)雙歧桿菌 嬰兒雙歧桿菌 短雙歧桿菌 兩歧雙歧桿菌 枯草桿菌 Rosell菌株 95% 30% 19% 95% 100% 65% 75% 61% 生長(zhǎng)抑制率 美常安腸溶膠囊 ,人工胃液中 2個(gè)小時(shí)不崩解 人工腸液 30分鐘內(nèi)完全崩解 韓美獨(dú)有整體包衣，避免腸溶膠囊在胃液中出現(xiàn)裂縫 和提前崩解以確保活菌 100到達(dá)腸 道并確?；罹眇じ侥芰?。 制劑優(yōu)勢(shì) 整體腸溶包衣 常溫下各菌株的穩(wěn)定性 (25 。 C) Data on file Hanmi Pharm. Co. ,Ltd 多數(shù)微生態(tài)制劑 推薦保存條件 實(shí)際運(yùn)輸、儲(chǔ)存條件。 溫度對(duì)益生菌穩(wěn)定性的影響 乳酸桿菌（平均） 屎腸球菌 枯草桿菌 Rosell公司菌株 100% 100% 100% 0月 39% 88.3% 76.4% 12月 0.05 治療 慢性腹瀉 療效評(píng)價(jià) 12.637.55075 79.291.701020304050607080901001-3天 6-7天 14天雙歧三聯(lián)活菌組(n=24)美常安組( n = 2 4 )腹瀉緩解率（ %） 資料出處：中國(guó)新藥雜志， 2004年 5月第 13卷第 5期 高療效 P0.05 美常安 治療慢性腹瀉 ,起效快 ,1周內(nèi) 腹瀉緩解率高達(dá) 75% 2周內(nèi) 腹瀉緩解率高達(dá) 91.7% * * * (雙歧三聯(lián)活菌 ) 資料出處：中華消化雜志， 2003年 7月第 23卷第 7期 組長(zhǎng)單位：北京協(xié)和醫(yī)院 (1) 參加單位：北京大學(xué)第三醫(yī)院 (2) 上海瑞金醫(yī)院 (3) 武漢協(xié)和醫(yī)院 (4) 西安交通大學(xué)第二醫(yī)院 (5) 廣州中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院 (6) 統(tǒng)計(jì)單位：中國(guó)國(guó)家人口計(jì)生委科研所 美常安 治療腹瀉型腸易激綜合征（ IBS） 的多中心、隨機(jī)、雙盲、對(duì)照 臨床研究 美常安治療 IBS總有效率 總有效率77.20%84.80%0.00%20.00%40.0