密級： 論文編號： 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 學(xué)位論文 配合飼料 中 蛋白質(zhì)原料 的 溯源技術(shù)研究 on of on of I 摘 要 當(dāng)前， 飼料 質(zhì)量安全問題 引發(fā) 的 食品安全危機(jī) 的頻繁爆發(fā) 使得 如何 更好地對飼料產(chǎn)品原料來源和組成進(jìn)行溯源管理 成為廣大 飼料管理者、科研工作者、生產(chǎn)者和消費(fèi)者廣泛關(guān)注 的焦點(diǎn) 。近紅外光譜（ 析技術(shù)具有快速，準(zhǔn)確，操作簡便，無損，成本低，且測量重復(fù)性 高的優(yōu)點(diǎn)，是一種在飼料質(zhì)量安全等眾多領(lǐng)域都有著廣泛應(yīng)用前景的溯源技術(shù) ； 熒光定量 術(shù)可以對飼料中不同物種的基因目標(biāo)片斷進(jìn) 行擴(kuò)增，從而對飼料組分來源進(jìn)行判別。本論文分別建立了配合飼料中 豆粕、魚粉兩種成分的 熒光定量 性和定量檢測方法，并對兩種檢測方法進(jìn)行了比較，為兩種方法在飼料質(zhì)量溯源管理中的推廣應(yīng)用提供 了 理論基礎(chǔ)。本研究的主要結(jié)論如下： 篩選 了 來源于編碼魚線粒體 12S 242基因片段、來源于編碼大豆線粒體 成酶的 137因片段和編碼大豆線粒體 18S 142因片段，用作 驗(yàn)中對配合飼料中魚粉和豆粕成分進(jìn)行定性檢測內(nèi)源標(biāo)記物；利用熒光定量 術(shù)分別建立了預(yù)測配合飼料中 魚粉、豆粕 含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線， 魚粉 標(biāo)準(zhǔn)曲線 的決定 系數(shù) 兩種 豆粕 特異引物得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線的決定系數(shù)分別為 以上標(biāo)準(zhǔn)曲線預(yù)測未知樣品中的魚粉和豆粕含量，預(yù)測值與真實(shí)值的相關(guān)性分別為 見， 術(shù)用于魚粉、豆粕的定性和定量檢測結(jié)果 尚可接受 ，但 仍有 很多不可控因素 限制了該技術(shù)的應(yīng)用。 利用 術(shù)建立了魚粉、豆粕的 標(biāo)模型，模型的決定系數(shù) 別達(dá)到 分別為 小于 10%， 大于 3，定標(biāo)效果良好。通過預(yù)測未知樣品對所建模型的預(yù)測能力進(jìn)行驗(yàn)證，定性預(yù)測的準(zhǔn)確度較高。 定量預(yù)測時(shí)， 未知樣品中魚粉、豆粕的 測值與真實(shí)值間決定系數(shù) 別達(dá)到了 0%， 大于 3，預(yù)測精度很好 。結(jié)果表明， 術(shù)可以很好的對配合飼料中魚粉、豆粕兩種蛋白質(zhì)原料進(jìn)行定性和定量 預(yù)測 ，實(shí)現(xiàn)對配合飼料蛋白質(zhì) 來源 的跟蹤 溯源， 保障 飼料質(zhì)量。 總之，本實(shí)驗(yàn) 對 利用 熒光定量 術(shù) 和 術(shù) 對配合飼料 中 的魚粉 和 豆粕進(jìn)行溯源（定性和定量）進(jìn)行了 新 的探索 ，取得了較為滿意的結(jié)果， 這兩種技術(shù) 可做為對飼料質(zhì)量 安全 進(jìn)行有效溯源管理的新 手段 。 關(guān)鍵詞 ： 近紅外光譜（ 析技術(shù) ， 實(shí)時(shí)定量 術(shù) ， 溯源 ， 定性 ， 定量 n of on no to is a of to of of of it is an in CR a to in of in in in 43 bp of TP 32 bp of 8S 24 bp of 2S of in CR of R2 of of We of in in of by 2 of of 00% M. be to of In of by A of 錄 第 一章 緒論 . 1 究目的和意義 . 1 料質(zhì)量安全評價(jià) . 1 料質(zhì)量安全評價(jià)的重要性 . 1 料質(zhì)量安全評價(jià)的發(fā)展 . 1 蹤評價(jià)配合飼料原料組成的必要性 . 2 源管理的發(fā)展 . 3 源的起源 . 3 源技術(shù) . 3 源技術(shù)在食品和飼料安全管理中的應(yīng)用 . 4 國的飼料產(chǎn)品溯源管理機(jī)制亟待完善 . 4 究內(nèi)容與方法 . 5 究內(nèi)容 . 5 究目標(biāo) . 5 術(shù)路線簡介 . 5 第二章 術(shù)及其在飼料工業(yè)中的應(yīng)用 . 6 紅 外光譜技術(shù)（ . 6 紅外光譜技術(shù)的原理 . 6 紅外光譜分析過程 . 6 紅外光譜分析方法 . 7 . 8 子數(shù)的確定 . 9 . 10 . 11 . 11 . 12 定飼料各種化學(xué)成份指標(biāo) . 12 定飼料消化特性等綜合指標(biāo) . 13 紅外與飼料生產(chǎn)在線監(jiān)控 . 13 料原料來源分析 . 14 酸分子檢測技術(shù)（ . 14 聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（ 術(shù) . 14 時(shí)熒光定量 . 15 粒體 物種鑒別中的應(yīng)用 . 16 . 17 第三章 術(shù)溯源配合飼料蛋白質(zhì)原料方法的 研究 . 18 料與方法 . 18 . 18 劑 . 19 要儀器 . 19 . 19 物設(shè)計(jì)及合成 . 20 . 21 光定量 . 21 果與討論 . 23 . 23 光定量 . 26 結(jié) . 30 第四章 術(shù)溯源配合飼料蛋白質(zhì)原料方法的研究 . 31 . 31 品制備及處理 . 31 驗(yàn)儀器 . 31 劑 . 33 紅外光譜采集 . 33 學(xué)分析 . 33 標(biāo)模型建立及評價(jià) . 33 證及預(yù)測結(jié)果的判斷 . 34 果與討論 . 34 配料樣品配方及待測指標(biāo)含量分布 . 34 品近紅外光譜圖 . 37 譜數(shù)據(jù)處理方法的確定 . 38 譜范圍選擇 . 41 合飼料中豆粕的定性和定量分析 . 43 合飼料中魚粉的定性和定量分析 . 46 結(jié) . 49 第五章 種方法的比較 . 51 . 51 . 51 . 51 . 52 結(jié) . 52 第六章 結(jié)論及展望 . 53 要結(jié)論 . 53 種方法的比較 . 53 新點(diǎn) . 53 一步研究設(shè)想 . 54 參考文獻(xiàn) . 55 致謝 . 62 作者簡歷 . 63 V 英文縮略表 英文縮 寫 英文全稱 中文名稱 A 相對吸光度 工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò) 立葉變換中紅外光譜 階平滑 階 平滑 量命中指數(shù) 鄰近法 氏距離法 元線性回歸 元散射校正 位素比值質(zhì)譜 紅外透射光譜 紅外反射光譜 磁共振 光度值 成分 成分分析 成分回歸 合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 最小二乘法 um 測殘差平方和 定系數(shù) 制性片段多態(tài)性 正標(biāo)準(zhǔn)差 部交互驗(yàn)證均方差 測均方差 對分析誤差 對標(biāo)準(zhǔn)差 時(shí)熒光定量 互 驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)差 階卷積 階卷積 步多元線性回歸 噪比 準(zhǔn)正態(tài)變換 準(zhǔn)正態(tài) 變換與去趨勢變換 鏈構(gòu)象多態(tài)性 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 碩 士學(xué)位論文 第一章 緒論 1 第一章 緒論 究目的和意義 飼料作為人類食物鏈中的重要一環(huán)，其質(zhì)量與人類健康和食品安全緊密相關(guān)；特別是近年來由飼料質(zhì)量安全問題引 起的 食品安全危機(jī) 頻發(fā) ， 造成了 人們的恐慌 。而 采用 不同的飼料原料，特別是質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)原料， 不僅影響飼料產(chǎn)品和畜產(chǎn)品的質(zhì)量水平， 而且 決定了 飼喂動(dòng)物時(shí) 飼料 的實(shí)際營養(yǎng) 價(jià)值 ， 因此 如何更好的評價(jià)飼料質(zhì)量和對飼料進(jìn)行溯源已 經(jīng) 逐漸 成為 研究者 們 關(guān)注的焦點(diǎn) 。但 現(xiàn)有的 很多飼料質(zhì)量 檢測 技術(shù) 和溯源方法 成本高，且操作復(fù)雜，耗時(shí)長，不能快速得到 準(zhǔn)確 的 實(shí)驗(yàn)結(jié)果， 建立 高效簡便的飼料原料溯源方法成為 亟待 解決的問題 。 析技術(shù)和熒光定量 術(shù) 是兩種 相對 快速，且具有相當(dāng)準(zhǔn)確度的溯源（定性和定量）技術(shù)，已成功用于 農(nóng)業(yè)、石油 化工 等眾多領(lǐng)域 ， 本研究探索 了 其 在 飼料 溯源 上 的應(yīng)用 。 料質(zhì)量安全 評價(jià) 料質(zhì)量 安全 評價(jià) 的重要性 我國飼料工業(yè)經(jīng)過 20多年改革與發(fā)展，已經(jīng) 形成 包括飼料加工業(yè)、飼料添加劑工業(yè)、飼料原料工業(yè)、飼料機(jī)械制造工業(yè)和飼料科研、教育、標(biāo)準(zhǔn)、檢測等 在內(nèi)的 較 為完備的飼料工業(yè)體系。2006年 我 國飼料 工業(yè) 產(chǎn)品總產(chǎn)量 達(dá)到 已 連續(xù)多年穩(wěn)居 世界第二 ， 飼料工業(yè) 在 保障安全優(yōu)質(zhì)的畜禽及水產(chǎn)產(chǎn)品供給，促進(jìn)糧食 增值轉(zhuǎn)化，帶動(dòng)農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)結(jié)構(gòu)調(diào)整，以及 在 農(nóng)民增收、農(nóng)業(yè)增效和養(yǎng)殖產(chǎn)品競爭力增強(qiáng)等 方面 都 發(fā)揮了重要的作用 ， 已 經(jīng) 成為 促進(jìn)我國農(nóng)業(yè) 經(jīng)濟(jì)發(fā)展 和 新農(nóng)村 建設(shè)的重要?jiǎng)恿Α?飼料質(zhì)量安全是畜牧業(yè)可持續(xù)健康發(fā)展、動(dòng)物源性食品安全、生態(tài)環(huán)境安全、乃至公共安全的基礎(chǔ)保障 ，確保和提高飼料產(chǎn)品安全水平是我國飼料工業(yè)“十一五”發(fā)展規(guī)劃的重要目標(biāo)。 由于我國飼料生產(chǎn)、經(jīng)營的基礎(chǔ)設(shè)施相對薄弱，飼料 生產(chǎn)、經(jīng)營者法律意識和衛(wèi)生意識淡薄，加上我國當(dāng)前存在著比較嚴(yán)重的環(huán)境污染問題，濫用農(nóng)藥現(xiàn)象得不到有效 控制 ，導(dǎo)致飼料原料存在嚴(yán)重的農(nóng)藥殘留問題 ， 而 原料摻雜使假等不法行為使 得 飼料 質(zhì)量 安全問題 更為 嚴(yán)重 。 如何更好的監(jiān)控飼料質(zhì)量安全、提高飼料管理法規(guī)的 威懾力、增強(qiáng)從業(yè)者的自律和責(zé)任感已成為提高 飼料質(zhì)量安全 水平的 瓶頸 問題 ； 因此，創(chuàng)新 和 發(fā)展科學(xué)的 質(zhì)量 安全 控制方法和 高效的檢測技術(shù) 逐漸 引起 廣大消費(fèi)者的高度關(guān)注，也對 科研工作者 提出了更高的要求和嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。 料質(zhì)量 安全評價(jià) 的 發(fā)展 人們對 飼料產(chǎn)品，特別是飼料原料 質(zhì)量水 平 的檢測分析和基礎(chǔ)數(shù)據(jù) 的 收集已有 很長 歷史， 這中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 碩 士學(xué)位論文 第一章 緒論 2 些 指標(biāo) 最初 主要 包括 水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、無氮浸出物、粗纖維和粗灰分等 簡單的化學(xué)成分 ，和感官指標(biāo)等 。 隨著動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)和分析化學(xué)等相關(guān)基礎(chǔ)理論和分析技術(shù)的發(fā)展，人們 逐漸 將氨基酸組成平衡、凈能 、消化率 、抗?fàn)I養(yǎng)因子、有毒有害成分 等 深入評價(jià)飼料 質(zhì)量 的 指標(biāo) 納入 了 飼料質(zhì)量 安全 評價(jià)體系中。 與此同時(shí) ，相應(yīng)的質(zhì)量安全 評價(jià)技術(shù)也 在 不斷發(fā)展完善，除了常規(guī)化學(xué)成分分析外，高效液相色譜、原子熒光分光光度計(jì)、氣相色譜、氨基酸分析儀、氣質(zhì)聯(lián)用 、 近紅外光譜分析儀等大型先進(jìn)精密的分析儀器 也被用于 飼料 質(zhì)量的深入評價(jià) 中 ， 并 建立 了 相應(yīng)的 更 準(zhǔn) 確快速 的飼料質(zhì)量 分析 方法。 隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，食品安全問題越來越受到社會的關(guān)注。飼料作為養(yǎng)殖業(yè)的必備 投入品 ，其安全衛(wèi)生問題直接或間接地影響到動(dòng)物產(chǎn)品 質(zhì)量 和人類的安全，是保證食品質(zhì)量安全關(guān)鍵的一環(huán)；食品安全首先是飼料的安全，飼料安全即食品安全的共識已在世界范圍內(nèi)形成。提高飼料質(zhì)量，保障飼料安全，從而保障動(dòng)物產(chǎn)品和人民健康已成為世界 各國政府 的重要職責(zé)。 特別是 從 上世紀(jì)80 年代英國爆發(fā) “瘋牛病” 事件 以來， 各國政府 都在 加快建設(shè)飼料質(zhì)量安全監(jiān)管體系 和創(chuàng)新發(fā)展安全評價(jià)方法， 并 先后將可追蹤管理機(jī)制引入到 飼料 質(zhì)量安全 管理中 ， 而一系列以蛋白質(zhì)、植物次級代謝物、功能基因和 C 同位素等為物種鑒別參照的溯源技術(shù)逐漸出現(xiàn)在 飼料 安全管理領(lǐng)域，并得到越來越多的應(yīng)用和 快速 發(fā)展。 蹤評價(jià)配合飼料原料組成的 必要性 配合飼料 養(yǎng)分全面且平衡，能夠滿足飼養(yǎng)動(dòng)物的各種營養(yǎng)需要， 通過 推廣 配合飼料的 使用 以增強(qiáng) 對 質(zhì)量安全隱患的防控 也 得到越來越廣泛的認(rèn)可 。 配合 飼 料 在 飼料工業(yè) 中的 地位舉足輕重 。保證 配合飼料的 質(zhì)量安全是提高畜禽生產(chǎn)性能的基礎(chǔ)，直接決定 了 畜禽生長狀態(tài)和畜產(chǎn)品 質(zhì)量安全 水平 ， 也 是養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展 的基礎(chǔ) 和 動(dòng)物性食品安全 的重要 保障 ，更會影響人類的健康 與安全，因此 在生產(chǎn)和管理中采取有效手段 保證配合飼料質(zhì)量的穩(wěn)定十分重要 。 要全面有效的控制 配合 飼料質(zhì)量安全，不僅要在飼料 生產(chǎn) 加工 、 運(yùn)輸 、 儲存 等環(huán)節(jié) 對飼料質(zhì)量進(jìn)行 監(jiān)控，更重要的是 從源頭控制和 確保飼料 原料的 質(zhì)量 安全。 這是因?yàn)椋?首先 ，隨著 畜牧養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展和 人們 生活水平的提高，飼料原料資源 匱乏問題越來越突出， 使用大量的非常規(guī)飼用資源和不斷開發(fā)新資源成為必然趨勢， 而要 實(shí)現(xiàn)對這些非常規(guī)資源的安全評價(jià)需要一個(gè)較長的歷史時(shí)期， 需要全程 監(jiān)控和 詳細(xì) 記錄這些新資 源的生產(chǎn)使用情況， 因此有必要 對這些原料進(jìn)行溯源管理 。 其次 ，飼料工業(yè) 依靠種植業(yè)，服務(wù)養(yǎng)殖業(yè) ， 因此 飼料原料的質(zhì)量評價(jià) 不僅 將 給 作物 育種工作提供方向和重要的參考數(shù)據(jù)，也影響著管理者對種植業(yè)結(jié)構(gòu)的引導(dǎo)和調(diào)整 。 再次 ， 動(dòng)物 對由不同原料生產(chǎn)出的營養(yǎng)成分含量相同的配合飼料的最終利用率 可能會 大不相同 ， 這是 因?yàn)?不同來源飼料原料 的 物質(zhì)結(jié)構(gòu)、營養(yǎng)成分等生物化學(xué)特性有明顯差異， 不同飼料原料中含有不同的抗?fàn)I養(yǎng)因子，直接影響飼養(yǎng)動(dòng)物對營養(yǎng)成分的酶解速度和消化吸收率 ， 并且 畜禽在各自的進(jìn)化過程中形成的體內(nèi)消化吸收系統(tǒng)、消化酶的組成對飼料原料 也 具有一定的選擇性 ，因此 動(dòng)物對 不同飼料原料的 消化和吸收利用速度和程度不同 。 總之， 飼料原料直接影響動(dòng)物的生長性能，免疫狀態(tài)和安全水平， 飼料原料組成是影響 配合 飼料質(zhì)量水平的一個(gè)重要 決定因素和參考指標(biāo) ， 有必要 盡快 研究出對 配合飼料原料組成 進(jìn)行 跟蹤評價(jià) 的 方法 。 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 碩 士學(xué)位論文 第一章 緒論 3 源管理 的發(fā)展 源的起源 溯源是 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全管理體系中的重要 手段 ， 其 通用定義起源于 1986年 國際標(biāo)準(zhǔn)組織 的 義為通過登記的標(biāo)識溯源某一 產(chǎn)品 的歷史 、 應(yīng)用或 位置 （ 003） 。 此定義 一方面涵蓋 了 產(chǎn)品 的來源，即回溯來源 ；另一方面涉及了產(chǎn)品 的生產(chǎn)模式，即溯源加工過程 。 追溯產(chǎn)品 來源涉及到 產(chǎn)品 的特征 、 種類及地理來源 等指標(biāo) ， 通常這些指標(biāo)參數(shù)將直接影響產(chǎn)品的 質(zhì)量 安全 水平。溯源過程涉及 到 產(chǎn)品 生產(chǎn)體系，包 括 加工和儲存過程 ， 及 摻假 等影響產(chǎn)品 質(zhì)量安全 的任何 行為 。 最 初， 溯源 只 被 用 來 驗(yàn) 證 受 原產(chǎn)地名稱 保護(hù)的 產(chǎn)品和 區(qū)分 功能相近的 市場 商品 。 但 隨著 瘋牛病 等事件 的 爆發(fā)， 以及消費(fèi)者對消費(fèi)“ 綠色 ” 動(dòng)物產(chǎn)品興趣 的增加和 對 動(dòng)物福利 的 重 視， 消費(fèi)者逐漸要求了解動(dòng)物飼料的詳細(xì) 信息； 另外， 政府職能部門和 產(chǎn)品認(rèn)證機(jī)構(gòu)也需要一種控制手段，以 客觀地 保證 所制定相關(guān)法規(guī)的貫徹和遵從， 并 確保認(rèn)證 產(chǎn)品的 規(guī)格說明 和 承諾已 被 完全兌現(xiàn) 。鑒于 以上種種 原因 ， 溯源 管理 開始 被 用于控制 飼料和 食品 的質(zhì)量 安全。 源技術(shù) 溯源技術(shù) 有 多種 ，不同方法的適用范圍不同 ， 但 其原理 通常 都 是通過分析與產(chǎn)品來源相關(guān)的特征信息， 進(jìn)一步與已建立的 參照標(biāo)記數(shù)據(jù)庫信息 進(jìn)行對比，最終確定產(chǎn)品的來源。 目前用于動(dòng)物飼料 溯源 的方法有四類。一類是利用飼料中植物原料的生物代謝物標(biāo)記法，即利用飼料中含有的而動(dòng)物機(jī)體自身不能合成的、并將在動(dòng)物產(chǎn)品或組織中出現(xiàn)的，完全是因?yàn)閯?dòng)物食用飼料而出現(xiàn)的化合物作為溯源 標(biāo)記，例如類胡蘿卜素、 二級萜類化合物、酚類和植物烯類等（ 007； ， 2004； ， 1985； ， 1997） 。第二類是利用來源于動(dòng)物新陳代謝的代謝指標(biāo)法（間接標(biāo)記法），如通過分析動(dòng)物產(chǎn)品中亞油酸，及其衍生物 不飽和脂肪酸的組成含量，判斷動(dòng)物所食用的飼料原料組成（ ， 1997； ； 2000）。 第三類是物理標(biāo)記法，即 通過檢測 放射性同位素含量 分析飼料原料的組成， 利用 物理化學(xué)技術(shù)進(jìn)行溯源的技術(shù)（ ； 2004a， b），如 離子交換色譜 /原子吸收光譜、核磁共振與 同位素比值質(zhì)譜 聯(lián)用（ 核磁共振 場地特定天然同位素分餾法 (。 還有 一類 為綜合指標(biāo)方法，包括利用 光譜學(xué) 方法，如中紅外和近紅外光譜 （ 、 傅立葉變換中紅外光譜（ 熒光光譜 等技術(shù)，以及 生物學(xué)技術(shù) 進(jìn)行飼料原料組成的分析 ， 如 傳統(tǒng)生化技術(shù)（抗生素分析 、 酶聯(lián)免疫測試等） 和 分子生物學(xué)技術(shù)（變性梯度凝膠電泳和單鏈構(gòu)象多態(tài)性） 等 。 溯源技術(shù)的 選擇很大程度上取決于前期的基礎(chǔ)研究（對研究對象 特征信息 的了解程度） 。 對 產(chǎn)品 來 源的描述可能是來自多種分析技術(shù) 的共同結(jié)果 ， 應(yīng)用相關(guān)溯源分析技術(shù)后就會產(chǎn)生相應(yīng) 的初步 溯源結(jié)果，而后這 些 結(jié)果再經(jīng)過數(shù)學(xué)或統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析和處理，得到最終的溯源結(jié)果。 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 碩 士學(xué)位論文 第一章 緒論 4 源 技術(shù) 在 食品 和 飼料安全 管理中的應(yīng)用 近年來各種食品 和飼料安全事故 頻 發(fā) ，尤其是瘋牛病、 禽流感 、蘇丹紅等 食品安全危機(jī)使廣大消費(fèi)者對食品安全和飼料安全問題心有余悸。為了樹立消費(fèi)者對食品質(zhì)量安全的信心，一些發(fā)達(dá)國家紛紛實(shí)施食品 和飼料 質(zhì)量安全追溯制 度 ，不斷加強(qiáng)對食品的生產(chǎn)、儲存、運(yùn)輸和銷售各個(gè)環(huán)節(jié)的控制，在生產(chǎn)環(huán)節(jié)建立驗(yàn)證和注冊體系，強(qiáng)制性實(shí)行食 品生產(chǎn)和銷售情況透明度政策，強(qiáng)化可追溯制度的實(shí)施。 歐盟法規(guī) 002要求從 2004年起在歐盟范圍內(nèi)銷 售 的所有食品都能夠進(jìn)行跟蹤與追溯，否則就不允許上市銷 售 。 同時(shí)，從 2005年歐盟開始實(shí)施水產(chǎn)品貿(mào)易追溯制度。 另外，針對轉(zhuǎn)基因生物的問題， 歐盟 也出臺了很多與溯源管理相關(guān)的法律法規(guī)，如 轉(zhuǎn)基因生物環(huán)境釋放法（ 2001） 、（ 1829/2003、 （ 1830/2003、 （ 65/2004、 （ 641/2004等， 這些法規(guī)對 進(jìn)入環(huán)境的轉(zhuǎn)基因生物，新的轉(zhuǎn)基因食品和飼料產(chǎn)品 的 審核 批準(zhǔn) ， 對 存在于和 由于偶然或技術(shù)上無法避免的原因而存在于產(chǎn)品中的轉(zhuǎn)基因原料的標(biāo)注，及對 轉(zhuǎn)基因生物 和 由轉(zhuǎn)基因生物制成的食品和飼料產(chǎn)品 進(jìn)行 溯源和標(biāo)注 等問題作出了詳細(xì)規(guī)定 。 美國對美國本土 的和 對美出口的食品和飼料等要求在進(jìn)行追蹤與溯源；另外還建立 了 家畜追溯系統(tǒng)，提高從農(nóng)場到加工廠的追蹤鑒別能力，以防范瘋牛病、口蹄疫等問題。日本也 建立 了相應(yīng)的追溯體系，對與消費(fèi)者有關(guān)的所有農(nóng)產(chǎn)品、食品和飼料的溯源等都作出了規(guī)定。 國 的 飼料產(chǎn)品溯源管理機(jī)制 亟待 完善 隨著社會經(jīng)濟(jì)的迅速發(fā)展、人民生活水平的不斷提高，消費(fèi)者 對畜產(chǎn)品的需求已漸漸由“量變”轉(zhuǎn)為“質(zhì)變”，整個(gè)社會和廣大人民群眾對畜產(chǎn)品的質(zhì)量安全問題提出了更高的要求 ，而飼料產(chǎn)品質(zhì)量安全是影響畜產(chǎn)品質(zhì)量安全的直接因素 ； 因此， 要求 我們不斷完善飼料工業(yè)的溯源管理體系 。 在飼料工業(yè)中應(yīng)用溯源技術(shù)，有利于飼料安全問題的防控與解決；有利于明確飼料生產(chǎn) /經(jīng)營者的責(zé)任；能夠?yàn)樨瀼貙?shí)施飼料監(jiān)管法規(guī)提供技術(shù)支持；通過溯源技術(shù)分析辨別配合飼料原料組成，可以更科學(xué)的評價(jià)飼料品質(zhì)；而且對飼料工業(yè)實(shí)行嚴(yán)格的溯源管理也是整個(gè)食品鏈溯源管理中的重要一環(huán)。 對飼料產(chǎn)品質(zhì)量安全進(jìn)行跟蹤與追溯不僅是我國飼料 工業(yè)“十一五”發(fā)展規(guī)劃確定的重要任務(wù)，也是當(dāng)今世界發(fā)展的一個(gè)方向， 是 大勢所趨。 我國 飼料生產(chǎn)、質(zhì)量檢測體系和飼料相關(guān)基礎(chǔ)學(xué)科 發(fā)展的 基礎(chǔ)薄弱， 飼料生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)規(guī)模和技術(shù)水平參差不齊，各種與飼料產(chǎn)品質(zhì)量安全相關(guān)的基礎(chǔ)信息庫嚴(yán)重缺乏，溯源技術(shù)和檢測標(biāo)準(zhǔn)體系發(fā)展明顯滯后于飼料工業(yè)的發(fā)展， 并且 相關(guān)的法律體系 也 尚需進(jìn)一步完善，這些問題制約著我國飼料工業(yè)溯源管理體系的建設(shè)和正常運(yùn)轉(zhuǎn) 。 因此，研究建立 更為高效準(zhǔn)確的 溯源技術(shù) 和 方法不僅具有 廣闊的 應(yīng)用前景，而且具有明顯的社會意義。 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 碩 士學(xué)位論文 第一章 緒論 5 究內(nèi)容與方法 究內(nèi)容 研 究內(nèi)容主要包括： （ 1） 探討近紅外光譜分析技術(shù)定性和定量檢測配合飼料原料組成的可行性； （ 2） 利用近紅外光譜分析技術(shù)溯源配合飼料中主要的蛋白質(zhì)原料魚粉和豆粕 ，確定飼料的蛋白質(zhì)來源 ；建立 相應(yīng)的 定性判別分析和定量預(yù)測模型 ，并對模型進(jìn)行驗(yàn)證 ； （ 3） 篩選和確定可 作為對 配合飼料 中的 蛋白質(zhì) 原料 （主要是 魚粉和 豆粕） 進(jìn)行定性和定量檢測 的 內(nèi)源標(biāo)記物的基因片段； （ 4） 研究 對 配合飼料中主要的蛋白質(zhì)原料魚粉和豆粕 進(jìn)行 檢測 的 熒光定量 法； （ 5） 比較分析所建立的 近紅外光譜分析技術(shù) 檢測方法和熒光定量 測方法的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。 究目標(biāo) 探索 利用近紅外光譜技術(shù)和熒光定量 術(shù) ， 建立有效 檢測 配合飼料所用主要蛋白質(zhì)原料 魚粉和豆粕 的檢測方法， 溯源配合飼料的蛋白質(zhì)來源，推動(dòng) 溯源管理 配合飼料原料組成的支撐技術(shù) 的 發(fā)展， 為更好的實(shí)施飼料質(zhì)量管理 、 保證飼料質(zhì)量安全提供一種更便捷有效的手段 。 術(shù)路線簡介 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 碩 士學(xué)位論文 第二章 術(shù)及其在飼料工業(yè)中的應(yīng)用 6 第二章 術(shù)及 其 在飼料 工業(yè) 中的應(yīng)用 紅外光譜技術(shù) （ 紅外光譜技術(shù)的原理 近紅外光是指波長介于可見區(qū)與中紅外區(qū)之間的電磁波，其波長范圍為 8002500數(shù)范圍為 125004000。近紅外光譜 （ 技術(shù) 是指利用近紅外譜區(qū)包含的物質(zhì)信息，主要用于有機(jī)物質(zhì)定性和定量分析的一項(xiàng)分析技術(shù)（陸婉珍， 2000） 。 近紅外譜區(qū)主要是有機(jī)物含氫基團(tuán)（如 ）的伸縮振動(dòng)的各級倍頻和這些集團(tuán)的伸縮振動(dòng)與彎曲振動(dòng)的合頻吸收，幾乎包含了有機(jī)物中所有含氫基團(tuán)信息，蘊(yùn)含著分子的結(jié)構(gòu)、組成狀態(tài)等信息（吳瑾光， 1994） ， 從而為近紅外光譜分析樣本的物理性質(zhì)（如粘度、粒度、硬度等）以及化學(xué)成分（如蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪、淀粉、水分等）提供了可能。 利用近紅外光 譜分析技術(shù)可采集到構(gòu)成樣品的所有有機(jī)化合物的組成和結(jié)構(gòu)信息。通過綜合整理加工這些信息，一方面可獲得具有強(qiáng)特異性、且能夠準(zhǔn)確反映被測樣品個(gè)性特征 的 信息；另一方面能夠獲得樣品近紅外光譜與有機(jī)化合物組成和結(jié)構(gòu)間存在的一定對應(yīng)函數(shù)關(guān)系，從而對樣品的物理化學(xué)特性做出預(yù)測。 基于近紅外光譜分析技術(shù) 的 特點(diǎn)， 它 不僅可以用于分析單一化合物的成分含量；而且利用其能夠準(zhǔn)確采集被測產(chǎn)品個(gè)性特征信息的優(yōu)勢，同時(shí)結(jié)合圖像處理技術(shù)，還可將 其 用于被測樣品的溯源管理、贗品鑒別等。特別是近年來，電子技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)、數(shù)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)理論、化學(xué)分析理論的發(fā)展，進(jìn)一步促進(jìn)了近紅外光譜分析技術(shù)在農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)