16 川省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn) 1/T 1192 2011 油菜根腫病抗性鑒定技術(shù)規(guī)程 2011 - 01布 2011 - 03施 四川省質(zhì)量 技術(shù) 監(jiān)督局 發(fā)布 1192 2011 I 目 次 前言 . 范圍 . 1 2 規(guī)范性引用文件 . 1 3 術(shù)語(yǔ)和定義 . 1 4 田間抗性鑒定方法 . 2 5 抗病性評(píng)價(jià) . 3 附錄 A（資料 性附錄） 油菜根腫病基本信息 . 4 附錄 B（規(guī)范性附錄） 油菜根腫病病級(jí)調(diào)查方法、病情指數(shù)、校正系數(shù)、相對(duì)病情指數(shù)計(jì)算方法 5 1192 2011 言 本標(biāo)準(zhǔn)分為范圍、規(guī)范性引用文件、術(shù)語(yǔ)和定義、田間抗性鑒定方法、抗性評(píng)價(jià)方法等部分。 本標(biāo)準(zhǔn)由四川省農(nóng)業(yè)廳提出并歸口。 本標(biāo)準(zhǔn)由四川省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局批準(zhǔn)。 本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：四川省農(nóng)業(yè)科 學(xué)院植物保護(hù)研究所。 本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：劉勇、黃小琴、張蕾、楊曉蓉、周西全 1192 2011 1 油菜根腫病抗性鑒定技術(shù)規(guī)程 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了油菜根腫病抗性田間鑒定的技術(shù)規(guī)程，即抗性鑒定圃設(shè)置、接種、病情調(diào)查、抗病性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于四川省油菜品種（系）對(duì)根腫病的田間抗性鑒定。 2 規(guī)范性引用文件 下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。 藥安全使用標(biāo)準(zhǔn) 田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn) 89公害油菜生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程 1676 農(nóng)作物抗病蟲(chóng)性鑒定方法 3 術(shù)語(yǔ)和定義 下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。 人工接種鑒定 一定量接種 收集的病原物，仿照自然情況，創(chuàng)造發(fā)病條件，根據(jù)接種對(duì)象 的 抗性表現(xiàn)和發(fā)病程度確定 供試 品種抗性 級(jí)別的一種方法。 自然發(fā)病鑒定 間自然感染誘發(fā)， 根據(jù) 供試品種 抗性表現(xiàn)和發(fā)病程度確定 供試 品種抗性 級(jí) 別的一種方法。 田間鑒定 1192 2011 2 油菜品種（系）種植在病區(qū)的試驗(yàn)地，在油菜苗期、初花期分別進(jìn)行各個(gè)參試品種（系）發(fā)病程度調(diào)查，經(jīng)結(jié)果分析確定各個(gè)油菜品種（系）的抗性水平。 對(duì)照品種 了保證抗性鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性，減少年份間和環(huán)境條件的差異，選擇抗性水平較穩(wěn)定的品種作為抗性鑒定試驗(yàn)的對(duì)照品種。 4 田間抗性鑒定方法 采用 田間 自然發(fā)病田塊輔以人工接種鑒定的方式 進(jìn)行鑒定 。 性鑒定圃設(shè)置 按 1676 農(nóng)作物抗病蟲(chóng)性鑒定方法進(jìn)行抗性 鑒定圃 設(shè)置 ， 選擇四川省近年連年油菜根腫病常發(fā)病區(qū) ?？剐澡b定圃要求平坦方正 、土質(zhì)肥力均勻、 土壤弱酸性， 地勢(shì)低 濕、排灌方便，利于根腫病 發(fā)病的田塊。 照品種的選擇 以 四川省常規(guī)栽培油菜 品種川油 23作為田間抗病性鑒定的對(duì)照品種 ，以各參鑒品種與對(duì)照相比的相對(duì)抗性來(lái)判定各參鑒材料的相對(duì)抗性 。 菜品種（系）的田間排布 參試品種（系）與對(duì)照品種（系）采用隨機(jī)區(qū)組排列，每個(gè)品種（系）種植 2行，每行種植 10穴，每穴三株，重復(fù) 3次。 培技術(shù)及管理 按 89 要求進(jìn)行。 油菜采用 直播方式， 播期 比當(dāng)?shù)卮筇镒钸m播種期提前 10 d 20 d；油菜整個(gè)生長(zhǎng)期不 使用殺菌劑， 并 保持抗性鑒定圃 土壤濕潤(rùn) 。 種方法 油菜子葉期用背負(fù)式手動(dòng)噴霧器進(jìn)行植株根部土壤噴霧接菌。 接種量 供試菌種為 前一年 田間 采集的發(fā) 病 植株病根經(jīng)自來(lái)水洗凈后于 冰箱 保存?zhèn)溆谩?使用時(shí)，直接取出解凍 ， 用組織搗碎機(jī) 粉碎 、兩層紗布過(guò)濾除掉 根部纖維組織 后， 用 水 稀釋 配制成懸浮液，于顯微鏡下采用 血球計(jì)數(shù) 板法進(jìn)行 計(jì)數(shù)， 調(diào)節(jié) 孢子 濃度 為 2 106 孢子 /種量為 225 L/ 情調(diào)查 1192 2011 3 查時(shí)間 共調(diào) 查兩次，油菜苗期（播種后 45 d）和初花期分別進(jìn)行病情調(diào)查 。 查方法及數(shù)據(jù)處理 調(diào)查時(shí)每穴連根拔苗一株，逐株調(diào)查各品種（系）油菜根部的根腫病發(fā)病情況（癥狀識(shí)別見(jiàn)附錄 A）。病級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)、病情指數(shù)和相對(duì)病情指數(shù)的計(jì)算方法依據(jù)附錄 5 抗病性評(píng)價(jià) 價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 兩次調(diào)查，綜合評(píng)價(jià)，以參試油菜品種（系）的平均相對(duì)病情指數(shù) 作為抗 病 性 等級(jí) 劃分依據(jù) 。 在油菜根腫病抗性鑒定 中， 以各參試品種與對(duì)照相比的相對(duì)病情指數(shù)來(lái)判定各參試材料的根腫病抗性。 將對(duì)照品種的病情指數(shù)規(guī)定為 際調(diào)查后，進(jìn)行系數(shù)校正（計(jì)算方法見(jiàn)附錄B），改絕對(duì)標(biāo)準(zhǔn)為 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)。 在油菜根腫病抗性鑒定 中， 參鑒品種（系）應(yīng) 進(jìn)行兩 年重復(fù)鑒定試驗(yàn)，以對(duì)照苗期和花期的發(fā)病株率不低于 50%作為根腫病人工接種鑒定結(jié)果有效性標(biāo)準(zhǔn)。 性評(píng)價(jià) 根據(jù)品種 苗期和花期 的平均相對(duì)病情指數(shù)，按照表 1評(píng)價(jià) 油菜 各品種 （系） 的抗病性。 表 1 油菜品種（系）根腫病抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 抗性型 相對(duì)病情指數(shù) （ X）范圍 免疫（ I） X =抗（ X （ R） X 抗（ X 感（ X （ S） X 1192 2011 4 A A 附 錄 A （資料性附錄） 油菜根腫病基本信息 油菜根腫病的病原及癥狀 原菌 油菜根腫病病原菌稱蕓薹根腫菌（ 在分類上屬于根腫菌目、蕓薹根腫菌屬真菌。 菜根腫病癥狀 油菜 根腫菌主要危害 油菜 植株根部，通常苗期 植 株均可感病，以苗期 侵染植株根毛組織 為主。植株感病后，地上部分 植株 初期 無(wú) 明顯 癥狀 ， 根部感染根腫病后植株生長(zhǎng)會(huì) 逐漸緩 慢、矮小，并表現(xiàn)出缺水癥狀 ；早期感染植株的 基部葉片常在中午 時(shí)出現(xiàn) 萎蔫，早晚恢復(fù) 正常 ， 染病后 期 植株從 基部葉片 開(kāi)始 變黃、萎蔫呈失水狀，嚴(yán)重時(shí)全株枯死 。 植株 地下部分感病后， 感染 植株根 部 形成腫瘤，腫瘤大小不等， 根部一般主根腫瘤大而少，側(cè)根腫瘤小而多， 腫瘤一般呈紡錘形、圓形、手指形等形狀。腫瘤初期表面光滑，后期常發(fā)生龜裂、粗糙，易被其它雜菌侵入而引起 整個(gè)根部組織 腐爛 。 1192 2011 5 B B 附 錄 B （規(guī)范性附錄） 油菜根腫病病級(jí)調(diào)查方法、病情指數(shù)、校正系數(shù)、相對(duì)病情指數(shù)計(jì)算方法 級(jí)調(diào)查方法 害嚴(yán)重度分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)（ 苗 期，田間調(diào)查） 0 級(jí)： 根系正常、 無(wú) 癥狀； 1 級(jí)： 須根、側(cè) 根 上僅 個(gè)別 出現(xiàn) 細(xì)小 腫大， 主根未 見(jiàn) 病害 和 腫瘤 ； 3 級(jí)： 2 個(gè)以上的 須根 或 側(cè)根 出現(xiàn) 腫 大， 或腫瘤直徑或長(zhǎng)度超過(guò) 主根 出現(xiàn) 腫大 但 不明顯 ； 5 級(jí) ： 主根腫大 明顯 ， 腫瘤部分 直徑為莖基 的 2； 7 級(jí) ： 主根腫大 明顯 ， 腫瘤部分 直徑為莖基 3 倍以上。 害嚴(yán)重度分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)（初花期，田間調(diào)查） 0 級(jí)：根系正常、 無(wú) 癥狀； 1 級(jí)： 須根、側(cè) 根 上出現(xiàn) 1 2個(gè) 細(xì)小根 腫， 主根未發(fā)生病害 ； 3 級(jí)：須根、側(cè)根上有多個(gè)腫瘤或個(gè)別腫瘤直徑或長(zhǎng)度超過(guò) 主根尖端出現(xiàn)病害癥狀但腫大不明顯 5 級(jí)：側(cè)根腫 大部分直徑或長(zhǎng)度超過(guò) 主根末梢有小的腫瘤；或主根腫大明顯，腫大部分直徑與莖基直徑相當(dāng)； 7 級(jí)：主根全部腫大，腫大部分直徑為莖基的 1 倍或以上，但植株生長(zhǎng)正常； 9 級(jí)：根部腫大部分開(kāi)始龜裂或腐爛