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腸道內(nèi)及組織內(nèi)病原,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握腸道致病菌與非致病菌的常用鑒別方法。學(xué)習(xí)組織內(nèi)及血液內(nèi)病原的檢查方法了解腸道桿菌的生化反應(yīng)。學(xué)習(xí)分區(qū)劃線接種法。,實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,大腸桿菌、痢疾桿菌的EMB、SS培養(yǎng)基的接種。溶血現(xiàn)象示教：完全溶血及不完全溶血現(xiàn)象咽拭試驗(yàn)血漿凝固酶試驗(yàn)：玻片法抗“O”試驗(yàn),實(shí)驗(yàn)原理,EMB、SS培養(yǎng)基鑒別腸道致病菌及非致病菌的原理。,EMB（伊紅美蘭培養(yǎng)基）： 蛋白胨 乳糖 磷酸氫二鉀 瓊脂 2%伊紅Y溶液（酸性染料指示劑） 0.65%美藍(lán)溶液（堿性染料）,EMB平板（伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基） 原理： 細(xì)菌 乳糖 產(chǎn)酸：伊紅美藍(lán) 紫黑/紫紅 結(jié)果： 非致病菌 致病菌,分解,菌落變黑，有金屬光澤,菌落無色、半透明,腸道致病菌與非致病菌在EMB培養(yǎng)基上的生長(zhǎng),SS培養(yǎng)基：蛋白胨 乳糖檸檬酸鈉 硫代硫酸鈉 10%檸檬酸鐵溶液 1%中性紅溶液（酸性指示劑） 0.1%煌綠溶液,SS平板-分離腸道致病菌的強(qiáng)選擇培養(yǎng)基,原理：膽鹽、枸櫞酸鈉、煌綠： 抑制腸道非致病菌2.乳糖、中性紅（pH6.8-8.0，紅橙黃） ： 致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨產(chǎn)生堿性物質(zhì)菌落淡黃色； 大腸桿菌分解乳糖產(chǎn)酸，菌落呈紅色。,致 病 菌:小,無色,半透明非致病菌:大,紅色,實(shí)驗(yàn)材料,每組四塊培養(yǎng)基：兩塊EMB、兩塊SS培養(yǎng)基大腸桿菌、痢疾桿菌斜面培養(yǎng)物接種環(huán)酒精燈,實(shí)驗(yàn)步驟,將大腸桿菌以分區(qū)劃線的方式分別接種至EMB、SS 培養(yǎng)基上。將痢疾桿菌以分區(qū)劃線的方式分別接種至EMB、SS 培養(yǎng)基上。將接種好的培養(yǎng)基置入37培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí)。記錄并分析結(jié)果。,分區(qū)劃線法 （得到單個(gè)菌落做純培養(yǎng)）,腸道桿菌的生化反應(yīng),傷寒,葡萄糖,甘露醇,乳糖,靛基質(zhì),硫化氫,動(dòng) 力,大腸,葡萄糖,甘露醇,乳糖,靛基質(zhì),硫化氫,動(dòng) 力,四、抗“O”實(shí)驗(yàn)： 1、實(shí)驗(yàn)原理 2、應(yīng)用 3

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