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文檔簡介

1、 實驗技術二 普通光學顯微鏡油鏡的使用一、實驗目的一、實驗目的1. 熟悉普通光學顯微鏡的構造及各部分的功能；2. 學習并掌握油鏡的原理和使用技術；3. 觀察常見微生物的形態(tài)。二、顯微鏡的基本結構及油鏡的工作原理二、顯微鏡的基本結構及油鏡的工作原理 顯微鏡的基本結構機械部分光學部分底座鏡柱鏡臂 鏡筒 載物臺 物鏡轉換器粗準焦螺旋細準焦螺旋目鏡物鏡反光鏡聚光器 油鏡的使用需在載玻片與鏡頭之間加滴香柏油，主要原因有： 1. 增加照明亮度.因其折射率與玻璃相同，光線通過載玻片直接通過油質進入物鏡而不發(fā)生折射其中NA= n.sin。為光線最大入射角的半數，一般來說最大只能達到90，而n為介質折射率。由于

2、香柏油的折射率（1.51）比空氣及水的折射率（分別為1.0和1.33）要高，因此以香柏油作為介質的油鏡所能達到的數值孔徑值要高于低倍鏡、高倍鏡。NA 光波波長物鏡的數值孔徑值分辨率 =2.增加顯微鏡的分辨率三、實驗器材三、實驗器材1. 示玻片： 放線菌、細菌三型、青霉 菌、曲霉菌染色玻片標本。2. 試劑： 香柏油、二甲苯。3. 其他器材：顯微鏡、擦鏡紙、吸水紙。四、操作步驟1.觀察前的準備： 2. 顯微鏡觀察： （1）低倍鏡觀察：（2）高倍鏡觀察：（3）油鏡觀察：（1）取鏡安放（2）光源調節(jié)滴香柏油調焦低倍鏡的觀察高倍鏡的觀察側面注視，升載物臺使油鏡與香柏油接觸油鏡的觀察轉油鏡調焦選定視野放置

3、切片調節(jié)光源和焦距（4）還原各部件。反光鏡垂直于鏡座，將物鏡轉 成“八”字 形，再向下旋。同時把聚光鏡降下。 （1）降下載物臺，取下載玻片。3. 顯微鏡用畢后的處理 （2）擦香柏油 （3）用擦鏡紙清潔其他物鏡及目鏡；用綢布 清潔顯微鏡的金屬部件。先用擦鏡紙拭去鏡頭上的先用擦鏡紙拭去鏡頭上的香柏油，再蘸少許二甲苯香柏油，再蘸少許二甲苯擦去殘留油跡，最后用干擦去殘留油跡，最后用干凈擦鏡紙擦去殘留二甲苯。凈擦鏡紙擦去殘留二甲苯。五、思考問題五、思考問題 1. 用油鏡觀察時應注意哪些問題？在載玻片和鏡頭之間加滴什么油？起什么作用？2.比較低倍鏡、高倍鏡及油鏡各方面的差異。為什么在使用高倍鏡及油鏡時應特別注意避免粗調節(jié)器的誤操作？ 3.什么是物鏡的同焦現象？它在顯微鏡觀察中有什么意義？ 4. 影響顯微鏡分辨率的因

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