1、成鵝大腸桿菌病原的分離與鑒定摘 要：目的對一群疑似大腸桿菌病的成年鵝進(jìn)行病原的分離與鑒定，為該病的防治提供依據(jù)。方法挑取疑似死于大腸桿菌病成年鵝的心血、肝臟，接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基，37下培養(yǎng)24h,制備抹片、革蘭氏染色鏡檢、生化試驗(yàn)及藥敏試驗(yàn)。結(jié)果在上述試驗(yàn)中分離到1 株革蘭氏陰性小桿菌，該菌的生化試驗(yàn)結(jié)果與大腸桿菌一致。選擇藥敏試驗(yàn)中敏感的藥物環(huán)丙沙星給病成鵝注射，連用3 天，得到了有效治療，病鵝逐步恢復(fù)健康。結(jié)論該群病死鵝的發(fā)病原因?yàn)橹虏⌒源竽c桿菌感染?！娟P(guān)鍵詞】：Ap :大腸桿菌；分離；鑒定；生化試驗(yàn)；藥敏試驗(yàn)20年 12 月，安徽休寧某養(yǎng)殖戶飼養(yǎng)的1000 只140 日齡成鵝相繼出現(xiàn)

2、精神沉郁、采食量下降、排白色稀糞、消瘦等癥狀，發(fā)病幾天后出現(xiàn)死亡。剖檢病死鵝，觀察到心包膜增厚，心包內(nèi)充滿大量淡黃色液體，肝臟表面覆蓋有淺黃色的纖維性滲出物，腸道出血。本試驗(yàn)主要是為了查明該群鵝的發(fā)病原因，特對其進(jìn)行細(xì)菌的分離鑒定，并通過藥敏試驗(yàn)確定敏感藥物，為該群病鵝的防治提供依據(jù)。一、材料與方法1. 材料（ 1）病料來。安徽休寧某養(yǎng)殖戶送檢的疑似感染大腸桿菌病死成年鵝3 只。（ 2）培養(yǎng)基。蔗糖、乳糖、麥芽糖、葡萄糖半固體發(fā)酵管，蛋白胨水，葡萄糖蛋白胨水，麥康凱瓊脂培養(yǎng)基，營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基。2. 方法3. 1）細(xì)菌的分離培養(yǎng)。無菌采取病死鵝的心血、肝臟，用接種環(huán)劃線接種于

3、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基中，37下培養(yǎng)24h。然后挑取單個(gè)紅色的典型菌落接種到伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，37c培養(yǎng)24h,進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，最后從伊紅美藍(lán)瓊脂平板上挑取紫黑色帶金屬光澤的單個(gè)典型菌落，接種到營養(yǎng)瓊脂平板上，37培養(yǎng)24 h ，獲得純培養(yǎng)物，置4冰箱備用。（ 2）細(xì)菌抹片制備及革蘭氏染色鏡檢。從麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上挑取單個(gè)粉紅色的菌落，制備抹片、革蘭氏染色鏡檢。（ 3）細(xì)菌的生化試驗(yàn)。主要進(jìn)行了糖類分解試驗(yàn)、吲哚試驗(yàn)、甲基紅4816001.gif style=ma-width:450p width=450p alt= 成鵝大腸桿菌病原的分離與鑒定 title= 成鵝大腸桿菌病原的分離與鑒定/（

4、MR試馬及VP試驗(yàn)第 1 頁 共 6 頁（ 4）細(xì)菌藥物敏感試驗(yàn)。K-B 紙片擴(kuò)散法：將被檢細(xì)菌用滅菌的涂布棒均勻涂布于營養(yǎng)瓊脂平板上，用無菌鑷子將各種抗菌藥物圓紙片，分別貼于培養(yǎng)基表面，37c培養(yǎng)1824h,根據(jù)藥物紙片周圍有無抑菌圈及其直徑大小，來判斷該 菌對各種藥物的敏感程度。二、結(jié)果與分析Ap1. 病死鵝的病理剖檢變化心包膜增厚，心包內(nèi)充滿大量淡黃色液體，肝臟表面覆蓋有淺黃色的纖維性滲出物，腸道出血。2. 細(xì)菌的分離培養(yǎng)結(jié)果從上述病死鵝的心血、肝臟中分離到1 株細(xì)菌，該菌在營養(yǎng)瓊脂平板上37 培養(yǎng) 24 h 后，形成中等大小，圓形微凸起，表面光滑濕潤，淺灰白色半透明菌落；在麥康凱培養(yǎng)基

5、上形成中等大小，表面光滑濕潤的粉紅色菌落；在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上形成深紫黑色、光滑、濕潤、帶有金屬光澤的圓形菌落。3. 革蘭氏染色鏡檢結(jié)果該分離菌經(jīng)革蘭氏染色，在油鏡下均可見散在的紅色、中等大小、兩端鈍圓的無芽胞短直桿菌。多單個(gè)散在，個(gè)別成雙排列，革蘭氏陰性，符合大腸桿菌的形態(tài)特征。該菌能發(fā)醉葡萄糖、乳糖、麥芽糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，MR式驗(yàn)呈陽性，VP試驗(yàn)呈陰性，回噪試驗(yàn)呈陽性。5. 體外藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果見表1。由表1 可知：該細(xì)菌的耐藥譜較廣。三、討論與小結(jié)1 .該株大腸桿菌的確定及特性分析Ap通過對送檢的疑似大腸桿菌病死鵝進(jìn)行細(xì)菌的分離培養(yǎng)及生化試驗(yàn)鑒定，其生化試驗(yàn)結(jié)果與大腸桿菌一致，因此，引起成鵝死

6、亡的病原為致病性大腸桿菌。2. 該株大腸桿菌的耐藥性分析Ap從藥敏試驗(yàn)結(jié)果可看出：該株大腸桿菌對紅霉素、頭孢拉定和妥布霉素等10 多種抗菌藥物均不敏感；對先鋒噻肟、頭孢哌酮、環(huán)丙沙星等8 種抗菌藥物敏感。建議養(yǎng)殖戶使用環(huán)丙沙星作為治療該病首選藥進(jìn)行治療。大腸桿菌耐藥性不僅僅是反復(fù)用藥的結(jié)果，而且是大腸桿菌在不利環(huán)境中增強(qiáng)生存能力的自身防衛(wèi)系統(tǒng)的重要組成部分，這也是大腸桿菌容易產(chǎn)生耐藥性的本身原因。大腸桿菌耐藥性由藥物誘發(fā)作用所引起：一是有病亂投藥。二是長期濫用藥，這是誘發(fā)大腸桿菌產(chǎn)生耐藥性的主要原因。由于抗生素的大量使用，細(xì)菌的耐藥性越來越強(qiáng)，耐藥菌株出現(xiàn)的也越來越多，不少耐藥菌株不僅能耐受1

7、 種或少數(shù)幾種抗生素，而且能夠耐受多種抗生素，由此而造成的危害十分嚴(yán)重。三是小劑量用藥，不僅未達(dá)到殺菌的目的，反而逐步誘發(fā)。四是聯(lián)合用藥，這也是加快大腸桿菌產(chǎn)生耐藥性的另一個(gè)原因 11 。因此，科學(xué)合理地用藥是減少細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性的最有效的方法。所以，應(yīng)盡量提高對疾病診斷的準(zhǔn)確率，減少不必要的用藥，并嚴(yán)格用藥劑量和療程。3. 該病的治療和綜合防治該鵝群中一旦發(fā)生本病應(yīng)立即隔離治療。本病的治療應(yīng)選擇在疾病發(fā)生的早期，因大腸桿菌病發(fā)生的后期使用抗菌素往往療效不理想。該成年鵝群飲水時(shí)，上午水中添加環(huán)丙沙星粉，下午水中添加電解多維和葡萄糖粉以增加機(jī)體抵抗力，連用 3-5 天。同時(shí)保持鵝舍清潔干凈，糞便及時(shí)清除，堆積發(fā)酵進(jìn)行無害化處理；鵝舍及活動(dòng)場地每天用消毒藥進(jìn)行噴霧消毒1 次，連用3 天。經(jīng)此治療方案處理后，除了少數(shù)成鵝由于病程時(shí)間較長體況較弱治