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1、實(shí)驗(yàn)十用旋光儀測定糖溶液的濃度物理學(xué)與信息學(xué)教研室 方玉盛【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹渴煜ば鈨x的結(jié)構(gòu)、原理和使用方法;測量旋光溶液的旋光率和百分濃度【實(shí)驗(yàn)器材】旋光儀,盛液玻璃管,溫度計(jì),已知和未知濃度的葡萄糖溶液。實(shí)驗(yàn)原理對于透明的固體來說旋光角與光透過物質(zhì)的厚度L成正比;而對于液體來說除了厚度之外,還與溶液的濃度c成正比。同時(shí),旋轉(zhuǎn)的角度,還與溶液的溫度t以及光的波長有關(guān)。實(shí)驗(yàn)證明在給定波長(單色光)和一定溫度下,如旋光物質(zhì)為溶液,則旋光角由下式表示:在上式中 為旋光率,C為100毫升溶液中含有溶質(zhì)的克數(shù),L為溶液厚度,以分米為單位。旋光率隨不同的溶液而異,對于同一種溶液來說,它是隨波長而異的常數(shù),實(shí)驗(yàn)
2、室的旋光儀常以鈉光作光源,故波長已定。而溫度的改變,對旋光率稍有影響,就大多數(shù)物質(zhì)來講,當(dāng)溫度升高攝氏1度時(shí),旋光率約減小千分之幾。 通過對旋光角的測定,可檢驗(yàn)溶液的濃度、純度和溶質(zhì)的含量,因此旋光測定法在藥物分析、醫(yī)學(xué)化驗(yàn)和工業(yè)生產(chǎn)及科研等領(lǐng)域內(nèi)有著廣泛地應(yīng)用。在醫(yī)、藥學(xué)中常用的分析方法有比較法和間接測定法。 一、比較法已知濃度為C1的某種旋光性溶液,其厚度為L1,可測出其旋光角1。要測同種未知濃度的溶液,只要測定該溶液在厚度為L2時(shí)的旋光角就可計(jì)算出未知濃度。 得 如果兩溶液厚度相同,則 二、間接測定法 對于已知旋光率的某種旋光性溶液,測出溶液厚度為L時(shí)的旋光角,就可由式(91)計(jì)算出濃度
3、C。 測定物質(zhì)旋光角的儀器叫旋光儀。旋光儀外形如圖91。其工作原理如圖92所 示。圖91 旋光儀外形 1底座 2電源開關(guān) 3 度盤轉(zhuǎn)動(dòng)手輪 4 讀數(shù)放大鏡 5 調(diào)焦手輪 6度盤及游標(biāo)7鏡筒 o鏡筒蓋 9鏡蓋手柄 10鏡蓋連接圖 11 燈罩 12燈座眼睛檢偏器偏振面旋轉(zhuǎn)旋光物質(zhì)二部分偏振光半蔭板平面偏振光起偏器非偏振光單色光源圖9-3 零度視場時(shí)檢偏器連射軸方向 圖9-4 半蔭板與三蔭板 當(dāng)盛液玻璃管裝入旋光物質(zhì)時(shí),光振動(dòng)矢量P、P,的振動(dòng)面同時(shí)旋轉(zhuǎn)一個(gè)角度,見圖92。此時(shí)視場發(fā)生了變化。為了找到新的零度視場,必須將檢偏器轉(zhuǎn)到新的位置,前后二次零度視場的讀數(shù)差(-0)即為溶液的旋光角。,和0的讀
4、數(shù)值可通過旋光儀的讀數(shù)放大鏡從讀數(shù)度盤上讀出。 為清除數(shù)度盤的偏心差儀器采用雙游標(biāo)讀數(shù)。度盤分360格,每格10;游標(biāo)分20格,等于度盤的19格用游標(biāo)可直接讀到0。050。從讀數(shù)盤上分別讀出左、右的刻度值L和R,則 旋轉(zhuǎn)角 。若,且度盤轉(zhuǎn)到任意位置都符合等式,則說明儀器沒有偏心差,可以不用對頂讀數(shù)法。 使用儀器的幾點(diǎn)說明:1將儀器接交流電源,開啟電源開關(guān),約5分鐘后鈉光燈發(fā)光正常,才可開始工作。 2選擇長度適宜的裝液試管,注滿試液裝上橡皮圈直至不漏為止。螺帽不宜旋得太緊,以免護(hù)片玻璃發(fā)生變形,影響讀數(shù)準(zhǔn)確性。然后將試管兩頭殘余溶液擦干,以免影響觀察清晰度及測定精度。3裝溶液時(shí)試管內(nèi)不可留有氣泡
5、,如發(fā)現(xiàn)氣泡應(yīng)使之進(jìn)入試管的凸出部分,以免影響測量結(jié)果?!緦?shí)驗(yàn)步驟】 1觀察旋光儀的結(jié)構(gòu)、讀效度盤及游標(biāo)的刻度,練習(xí)游標(biāo)讀數(shù)及望遠(yuǎn)鏡的調(diào)節(jié)。旋轉(zhuǎn)檢偏器現(xiàn)察視野亮度變化情況。 轉(zhuǎn)動(dòng)檢偏器,在度盤的零度附近找到零度視場的位置,從讀數(shù)盤上分別讀出左、右的刻度值L0和R0;求得0。重復(fù)測量3次,取平均值作為零點(diǎn)讀數(shù)。 2測定已知溶液的旋光率。將盛有已知濃度糖溶液的玻璃管放人旋光儀的鏡筒內(nèi),轉(zhuǎn)動(dòng)檢偏器,找出零度視場的新位置,從左、右度盤上分別讀出該溶液對應(yīng)的刻度值L1和R1,求得1值。重復(fù)3次,并記下相應(yīng)的數(shù)值,求得平均值,作為所測角度。根據(jù)求得旋轉(zhuǎn)角度1。由已知濃度C1和L1,根據(jù)公式(91),可計(jì)算出糖溶液的旋光率。3測定糖溶液的未知濃度 (1)將盛有未知濃度C2的糖溶液的玻璃管放入旋光儀中,按上述步驟進(jìn)行測量,最后求得旋轉(zhuǎn)角度2根據(jù)實(shí)驗(yàn)所得的 和已知的L2值,由公式(91)計(jì)算出C2值
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