1、山東省泰安市肥城市第三中學高中生物 1.2 基因工程的基本操作程序（一）學案 新人教版選修3學習指導即時感悟一、學習目標 1、說出基因工程的四步基本操作程序2、敘述反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因的過程3、說出基因文庫的概念及兩種類型4、說明PCR技術的原理、條件及過程5、了解基因表達載體的構(gòu)建。二、學習重點及難點 1、從基因文庫中獲取目的基因。2、利用PCR技術擴增目的基因【自主預習】1、 用流程圖表示基因工程基本操作程序的四個步驟： 2、目的基因的獲取 （1）來源：目的基因可以從_，也可以用_。（2）概念：目的基因主要是指_，也可以是一些_。（3）方法：獲取目的基因的方法有以下幾種：_、_、 。3、基

2、因表達載體的構(gòu)建基因工程的核心是_。一個基因表達載體的組成除了_外，還必須有_、_以及_等。疑惑點疑惑內(nèi)容三、同學們，通過自主預習，還有哪些疑惑呢？【自主·合作·探究】探究一 從基因文庫中獲取目的基因 1、 為什么要建立基因文庫？怎么建立的？2、如何從基因文庫中獲取目的基因？ 例1、構(gòu)建基因組DNA文庫時，首先應分離細胞的( )A、染色體DNA   B、線粒體DNA C、總mRNA   D、tRNA 例2、目的基因可從基因文庫中獲得，下列有關基因文庫的描述正確的是( )A、某生物的全套基因就是一個基因文庫B、將含有某種生物不同的許多D

3、NA片段，導入某個生物 體內(nèi)，則這個生物就是一個基因文庫C、含有一種生物所有基因的基因文庫叫做基因組文庫D、含有一種生物的一部分基因的基因文庫叫cDNA文庫探究二 利用PCR技術擴增目的基因1、PCR技術的原理是什么？2、PCR技術擴增的過程是？例3、在已知序列信息的情況下，獲取目的基因的最方便方法是( )A、化學合成法  B、基因組文庫法 C、cDNA文庫法   D、聚合酶鏈反應例4、下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是( )從基因文庫中獲取目的基因 利用PCR技術擴增目的基因 反轉(zhuǎn)錄法 通過DNA合成儀利用化學方法人工合成A B C D探究三 基因表達載體的

4、構(gòu)建1.作為基因工程表達載體，只需含有目的基因就可以完成任務嗎？為什么？2、基因表達載體的構(gòu)成包括哪些元件？他們的作用是什么？ （繪制基因表達載體的模式圖）例5、（多選）一個基因表達載體的構(gòu)建應包括（ ）A目的基因 B啟動子 C終止子 D標記基因例6、下列關于基因表達載體的敘述不正確的是（ ）A啟動子是與RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，是起始密碼B啟動子和終止子都是特殊結(jié)構(gòu)的DNA短片段，對mRNA的轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用C標記基因是為了鑒別受體細胞中是否有目的基因從而便于篩選D基因表達載體的構(gòu)建視受體細胞及導入方式不同而有所差別反思總結(jié)當堂達標1、基因工程的操作步驟：制備重組DNA分子轉(zhuǎn)化受體細胞篩選

5、出獲得目的基因的受體細胞，培養(yǎng)受體細胞并誘導目的基因的表達獲取目的基因正確的操作順序是 （ ） A B C D2、下列關于基因工程的敘述，正確的是： （ ） A基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因為目的基因B細菌質(zhì)粒是基因工程常用的運載體C通常用一種限制性內(nèi)切酶處理含目的基因的DNA，用另一種處理運載體DNAD為育成抗除草劑的作物新品種，導入抗除草劑基因時只能以受精卵為受體3、圖為某種質(zhì)粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因，tctR為四環(huán)素抗性基因，P為啟動因子，T為終止子，ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點。（1）將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒表達載體分別用EcoRI酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有_、 _、_三種。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒，需要對這些連接產(chǎn)物進行 。（2）用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉(zhuǎn)化實驗。之后將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是 ；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是 。（3）目的基因表達時，RNA聚合