1、SDS-PAGE30%聚丙烯酰胺溶液 30% （w/v） Acrylamide【組分濃度】各種組分名稱配制不同體積所需各成分的體積（mL）或質(zhì)量（g）30%Acr-Bis(29:1)1000ml100ml29%Acrylamide(丙烯酰胺)290g29g1%BIS（ N,N'-亞甲丙烯酰胺）10g1g【配制方法】將29克丙烯酰胺和1克N,N'-亞甲丙烯酰胺溶于總體積為 60ml溫?zé)幔?7 C左右）的去離子水中，充 分?jǐn)嚢枞芙?，補加水至終體積為100ml。0.45叩 微孔濾膜過濾除菌和雜質(zhì)， 儲于棕色瓶，4 'C避光（用鋁箔紙包扎起來）保存。嚴(yán)格核實 PH不得超過7.0

2、，因可以發(fā)生脫氨基反應(yīng)是光催化或堿催化的。使用期不 得超過兩個月，隔幾個月須重新配制。如有沉淀，可以過濾?！颈４鏃l件】4 C避光（用鋁箔紙包扎起來）保存【注意事項】丙烯酰胺具有很強的神經(jīng)毒性并可通過皮膚吸收，其作用具有累積性。稱量丙烯酰胺和N,N'-亞甲丙烯酰胺時應(yīng)戴手套和面具?？烧J(rèn)為聚丙烯酰胺無毒，但也應(yīng)謹(jǐn)慎操作，因為它還可能含有少量未聚合材料。1MTris-HCL ( pH6.8)(濃縮膠 buffer)【組分濃度】1MTris-HCL名稱用量備注Tris12.1g去離子水80ml濃鹽酸9ml（36%的濃鹽酸）預(yù)實驗已確定去離子水加入去離子水定容至 100ml后，室溫保存【配制方法

3、】稱量121.1gTris堿溶于800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙?，?>0.7mL的濃HCL調(diào)節(jié)所需要的pH 值（7.4-大約0.7mL，7.6-大約0.6mL , 8.0-大約0.42mL ），將溶液定容至1L,高溫高壓滅菌后，室溫保 存。應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大， 溫度每升高1 C，溶液的pH值大約降低0.03個單位。【保存條件】室溫保存?！咀⒁馐马棥繉θ梭w有刺激性，請注意適當(dāng)防護(hù)。1.5MTris-HCL (pH8.8)(分離膠 buffer)【組分濃度】1.5MTris-HCL名稱用量備注Tris18.17g去離子水80ml

4、濃鹽酸3ml（36%的濃鹽酸）預(yù)實驗已確定去離子水加入去離子水定容至 100ml后，室溫保存【配制方法】1L稱量181.7gTris堿溶于800mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙?，加濃HCL調(diào)節(jié)所需要的pH值=8.8，將溶液定容至 1L ,高溫高壓滅菌后， 室溫保存。(1.5mmol/LTris-HCL(pH8.8):18.15gTris 和 48ml1mol/LHCL 混合，加水稀釋到100ml終體積。過濾后4°c保存。)【保存條件】室溫保存【注意事項】應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因為Tris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大， 溫度每升高C，溶液的pH值大約降低0.03個單位。10

5、%十二烷基硫酸鈉SDS溶液-10%(w/v)SDS【組分濃度】10%(w/v)SDS名稱用量備注SDS10g去離子水80ml加入去離子水定容至 100ml后，室溫保存【配制方法】稱取2g高純度的SDS置于100200ml燒杯中，加入約16ml的去離子水，68 C加熱溶解，滴加濃鹽 酸調(diào)節(jié)PH至7.2，定容至20ml后，室溫保存【保存條件】室溫保存【注意事項】對人體有害，請注意防護(hù)。10%過硫酸銨溶液-10%(w/v)AP【組分濃度】10%(w/v)過硫酸銨名稱用量備注過硫酸銨0.1g去離子水1ml現(xiàn)配現(xiàn)用【配制方法】稱取0.1g過硫酸銨置于1.5ml離心管，加1mL去離子水吹打溶解，4 C保存

6、【保存條件】4 C保存【注意事項】10%過硫酸銨溶液在4 C保存時，可使用 2周左右，超過期限會失去催化作用5XTris-甘氨酸電泳緩沖液-5 Tfe-Glycine buffer (SDS-PAGE電泳緩沖液)【組分濃度】各種組分名稱配制不同體積所需各成分的體積(mL)或質(zhì)量(g)1000ml500ml0.125M Tris15.1g1.25M glycine(甘氨酸)94.0g0.5%(W/V)SDS5.0g【配制方法】稱取15.1gTris，94.0g甘氨酸(glycine )，5.0gSDS，用800ml蒸餾水或去離子水溶解，充分?jǐn)嚢枞芙?，定容?000ml，室溫保存。得0.125mo

7、l/L Tris-1.25 mol/L甘氨酸電極緩沖液。臨用前稀釋5倍?！颈４鏃l件】室溫保存，兩年有效?！咀⒁馐马棥颗渲坪玫碾娪疽菏褂脮r間不宜超過兩周。電泳緩沖液可以回收，回收后可再使用1-2次，但為了取得最佳的電泳效果，應(yīng)使用新電泳液5 >SDS-PAGE 加樣緩沖液-5 S0S-PAGE Loading Buffer 【組分濃度】0.25MTris-HCL(pH6.8);10%(W/V)SDS ;0.5%(W/V) BPB(溴酚藍(lán));50%(V/V)甘油；5%(W/V) B -巰基乙醇(2-ME)各種組分名稱配制不同體積所需各成分的體積(mL)或質(zhì)量(g)5ml3ml1MTris-H

8、CL(pH6.8)1.25mlSDS0.5gBPB(溴酚藍(lán))25mg甘油2.5ml(0.5mL/份)分裝，室溫保存，使用前加25 gL2-ME/小份，保存一個月左右。性巰基乙醇(2-ME)0.25ml【配制方法】量取 1.25mL 1MTris-HCL ( pH6.8 )，0.5g SDS，25mg BPB，2.5mL 甘油，置于 10mL 塑料離心管 中，加去離子水溶解后，定容至 5mL，小份(0.5mL/份)分裝，于室溫保存。使用前將 25 勺2-ME加 入到每小份中。加入 2-ME的Loading Buffer可在室溫下保存一個月左右?！颈４鏃l件】-20 'C保存，至少一年有效?！咀⒁馐马棥縎DS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X)中含少量DTT和巰基乙醇，有輕微刺激性氣味，必須完全溶解后再使用。 摘自Takara商品目錄-實驗室常規(guī)試劑配制方法TEMED原液直接使用 考馬斯亮藍(lán)R-250染色液【組分濃度】0.1%(w/v)考馬斯亮藍(lán)R-250，25%(v/v)異丙醇，10%(v/v)冰醋酸各種組分名稱配制不同體積所需各成分的體積(mL)或質(zhì)量(g)1000ml400ml備注考馬斯亮藍(lán)R-2501.0g0.4g異丙醇250ml10