1、利用卡爾費(fèi)休容量法測定妥布霉素晶體中的水含量 作者：朱亮 諶怡 高毅穎 王靜康【摘要】 由于妥布霉素固體顆粒在常用滴定溶劑中的溶解度不大，采用常規(guī)的卡氏容量法難以快速精確的確定其水含量。本文討論了兩種新方法：第一種是改變滴定溶劑的組成，向其中添加一定量的甲酰胺甲酰胺甲醇(13，V/V)以提高樣品在溶劑中的溶解度；第二種方法是在超聲波的作用下把樣品溶于純甲酰胺中，把妥布霉素固體樣品轉(zhuǎn)化成液體樣品，再通過測定液體樣品的水含量間接確定妥布霉素固體的水含量。兩種方法都能精確測定妥布霉素的水含量，但后者與前者相比分析速度更快。上述兩種方法也適用于其它在卡氏 工作 溶劑中溶解度不大的氨基糖苷類物質(zhì)。 【關(guān)

2、鍵詞】 卡爾費(fèi)休法； 水含量； 妥布霉素 ABSTRACT As for the poor solubility of tobramycin crystalline product in working medium used in volumetric Karl Fischer titration, two new methods for the water content determination were investigated. The first way was introducing the sample directly in the methanolbased workin

3、g medium, modified by formamide formamidemethanol (13, V/V) in order to increase the solubility; the second way was dissolving them in pure formamide stimulated by ultrasonic and the water content of tobramycin was calculated indirectly by determining the moisture content of formamide solution. Both

4、 methods were able to accurately determine the water content in tobramycin and the latter was less timeconsuming. These methods were also applicable for the water content determination of other aminoglycosides that were not readily soluble in the working medium. KEY WORDS Karl Fischer method; Water

5、content; Tobramycin 妥布霉素是由黑暗鏈霉菌發(fā)酵獲得的一個(gè)具有廣譜抗菌活性的第二代氨基糖苷類抗生素1(圖1)。在低濃度下能抑制革蘭陰性菌，對(duì)銅綠假單孢菌有很強(qiáng)的抑制作用，比其它氨基糖苷類抗生素強(qiáng)28倍，被 臨床 廣泛 應(yīng)用 。妥布霉素一般以粉末狀的晶體形態(tài)存在，這種形態(tài)具有良好的流動(dòng)性和穩(wěn)定性，利于儲(chǔ)藏、運(yùn)輸和進(jìn)一步加工。妥布霉素具有強(qiáng)吸濕性2，直接暴露在空氣中很容易吸濕而產(chǎn)生團(tuán)聚、結(jié)塊等現(xiàn)象，因此在妥布霉素的生產(chǎn)和存儲(chǔ)過程中，需要一種快速而準(zhǔn)確的水含量檢測方法來監(jiān)控妥布霉素產(chǎn)品的水含量變化，至今關(guān)于妥布霉素水含量的檢測方法鮮見報(bào)道。 卡爾費(fèi)休滴定法簡稱卡氏滴定法，是在卡氏反

6、應(yīng)的基礎(chǔ)上建立的一種測定樣品水含量的新方法3?？ㄊ系味ǚy定結(jié)果準(zhǔn)確可靠、重復(fù)性好，滴定時(shí)間短，已被列為多種物質(zhì)快速測定水分的標(biāo)準(zhǔn)方法。 在卡爾費(fèi)休滴定過程中，樣品中的水分需要與溶劑直接接觸才能被檢測到4，這就要求樣品必須完全溶解在滴定溶劑中，使樣品中的水分得到充分的釋放。在卡氏反應(yīng)中，一般用甲醇作為工作溶劑，但是妥布霉素僅微溶于甲醇，因此提高妥布霉素在工作媒介中的溶解度成為采用卡氏滴定法測定妥布霉素水含量的前提。本文建立了兩種卡氏水分析樣品處理方法，并以此圖1 妥布霉素的化學(xué)結(jié)構(gòu) 精確確定妥布霉素樣品中的水含量，同時(shí)對(duì)兩種方法的分析結(jié)果進(jìn)行相應(yīng)的對(duì)比。 1 實(shí)驗(yàn)材料及方法 1.1 儀器和試劑

7、 卡爾費(fèi)休滴定儀(DL18，瑞士MettlerToledo公司)，超聲波清洗器(KQ3200E，昆山市超聲波儀器有限公司)， 電子 天平(AL204，瑞士MettlerToledo公司)，秒表(DM1001，東莞市塘廈永先電子儀器廠)。 甲酰胺(天津大學(xué)科威公司)，3A分子篩(天津江天化工技術(shù)有限公司)，二次蒸餾水(市售)，雙組分無吡啶卡爾費(fèi)休滴定劑(5mg H2O/ml)和溶劑(天津四友公司)，妥布霉素(重慶大新藥業(yè)有限公司，實(shí)驗(yàn)室重結(jié)晶提純)。 1.2 測定原理 卡爾費(fèi)休容量法是測量水分最專一、經(jīng)典的方法，其工作原理主要基于卡爾費(fèi)休反應(yīng)4，5。 ROH+SO2+ZZH+ROSO-2(1) ZH+ROSO-2+I2+H2O+2Z3ZH+ROSO-3+2I-(2) 總反應(yīng)： 3Z+ROH+SO2+I2+H2O3ZH+ROSO-3+2I-(3) 市售卡氏溶劑中ROH主要用甲醇，Z用咪唑替代。二氧化硫與甲醇反應(yīng)生成一種甲基硫酸化合物，而甲基硫酸化合物被咪唑中和。含硫的甲基酸根中的陰離子是反應(yīng)物，并且已存在于KF試劑中。水的加入使甲基酸根陰離子被氧化成甲基硫酸鹽，消耗了水。一旦所有的水都與碘進(jìn)行了反應(yīng)，滴定杯中的混合液中就會(huì)有游離態(tài)的碘，游離碘將促使離子導(dǎo)電并且降低電壓，以使極化電流穩(wěn)定，當(dāng)電壓降至某一設(shè)定值時(shí)，滴定終止6。 本文采用Mettler