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文檔簡介

1、名詞解釋1 .基因工程:通過基因操作,將目的基因或DNM段與合適的載體連接轉入目標生物細胞,通過復制、轉錄、翻譯外源目的基因以及蛋白質的活性表達,使轉基因生物獲得新的遺傳性狀的操作。2 .基因克?。褐笇蜻M行分離和擴大繁殖等操作過程,目的在于獲得大量的基因拷貝3 .載體:將外源基因引入宿主細胞進行復制或表達的運載工具。4 .受體細胞:能攝取外源重組DNA并使其穩(wěn)定維持和表達,或有待于實施遺傳改良的細胞。5 .限制性內(nèi)切核酸酶:在細胞內(nèi)能夠識別雙鏈DNA分子中的特定核甘酸序列,并對DNA分子進行切割的一種酶。6 .黏性末端:指DNA分子在限制酶的作用下形成的具有互補堿基的單鏈延伸形成的末端結構

2、。7 .平末端:限制性內(nèi)切核酸酶在識別序列的對稱軸上切割,形成的片段末端。8 .同裂酶:指來源不同但識別相同靶序列的限制性內(nèi)切核酸酶。9 .同尾酶:指來源各異,識別的靶序列也各不相同,但切割后能產(chǎn)生相同黏性末端的限制性內(nèi)切核酸酶。10 .酶的星號活性:當條件改變時,許多限制酶的識別位點會改變,導致識別與切割序列的非特異性的現(xiàn)象。11 .DNA連接酶:是一種能夠催化雙鏈DNA±彼此相鄰的3'-OH和5'-P形成磷酸二酯鍵的核酸酶。12 .DNA聚合酶:是指在引物和模板的存在下,將dNTP1續(xù)地加到雙鏈DNA分子引物鏈的3'-OH末端,催化核甘酸聚合作用的酶。13

3、 .反轉錄酶:依賴RNA勺DN咪合酶(RNA指導的DN咪合酶)14 .克隆載體:用于攜帶DNA片段進入宿主細胞進行復制或保存的載體。15 .表達載體:可攜帶DNA片段進入宿主細胞進行復制并進行轉錄、翻譯的載體。16 .穿梭載體:可在原核細胞中復制,也可在真核細胞中擴增和表達的載體17 .質粒:是一種存在于細菌或真菌染色體外的小型環(huán)狀雙鏈DNA分子,可自主復制和表達。18 .質粒的拷貝數(shù)19 .質粒的不相容性:兩個質粒在同一宿主中細胞不能共存的現(xiàn)象。20 .“-互補:lacZ基因產(chǎn)物分為a鏈和3鏈兩部分,只有當兩者都存在時,才會表現(xiàn)出酶活性,該作用稱之為a-互補作用。21 .插入失活:在一個基因

4、位點中插入外源DNA片段,從而使該基因活性喪失的現(xiàn)象。22 .多克隆位點(MCS:包含多個單一限制性酶切位點的一段很短的DN際列。23 .瓊脂糖凝膠電泳:以瓊脂糖為支持物,在適當?shù)臈l件下對帶電生物大分子進行電泳的技術,主要用于DN冊子的分離、純化和鑒定。24 .Southern雜交:是先將分布在瓊脂糖凝膠上大小不同的變性DNA片段轉移到濾膜上,之后通過堿基互補配對,將濾膜與探針雜交,顯色鑒定。25 .探針:指能與特定靶分子發(fā)生特異性相互作用,并能被特殊方法所檢測的分子。聚合酶鏈式反應:是以DNW模板,在引物指導下由DNA聚合酶催化的對特定基因片斷進行的體外擴增反應。26 .引物:預擴增核酸片段

5、兩端的已知序列,決定特異性。27 .簡并引物:由于一個氨基酸可對應一個到多個密碼子,因此一段氨基酸序列可以有多個可能的編碼序列,稱之為簡并序列。相應合成這一段序列作PCFT增體系的引物。28 .目的基因:是基因工程中克隆的目標DNA分子,是一段特定序列的DNA片段,而并不一定是具有基因完整功能區(qū)的分子。29 .基因文庫:又稱DNAC庫,是指某個生物的基因組DNAecDNA段與適當?shù)妮d體在體外重組后,轉化宿主細胞,并通過篩選獲得大量的陽性菌落(或噬菌斑),所有菌落或噬菌斑的集合即為該生物的基因文庫。30 .基因組文庫:是將某一生物基因組DNM段化并全部克隆后所獲得的重組子群體的總稱,包含了這一生

6、物的全部遺傳信息。31 .cDNA文庫:是將生物特定的組織器官或發(fā)育時期的全部mRN©轉錄成cDNA并全部克隆成重組子,在該重組子群集中包含了其全部表達基因的轉錄本。32 .銜接物:用化學方法合成的一段8-12nt的含有一個或數(shù)個特定限制酶識別位點序列的平端雙鏈。33 .轉化:指以質粒為載體,將外源DNAt入處于感受態(tài)的E.coli等原核宿主細胞,并使其獲得新表型的過程。34 .感受態(tài)細胞:處于能吸收外源DNA分子生理狀態(tài)的細胞35 .感染:將以入噬菌體DNW載體的DNAM組分子包裝成病毒顆粒感染受體菌的過程;由噬菌體和細胞病毒介導的遺傳信息轉移過程也稱為轉導(transductio

7、n)。36 .轉染:即轉化與感染相結合,以噬菌體為載體,但不經(jīng)過蛋白包裝成病毒顆粒,而是用DNA1接酶使噬菌體DNA化,再通過質粒轉化方式導入受體菌。37 .重組子:含有重組DNA分子的轉化子。38 .篩選:經(jīng)過各種方法將外源DN酚子導入受體細胞后,獲得所需陽性克隆子的過程稱為克隆子的篩選。39 .閱讀框架:是基因的編碼區(qū),包含從起始密碼子至終止密碼子之間的cDNA序列。40 .啟動子:是RNAM合酶識別、結合并起始轉錄的一段DN際列。41 .增強子:是遠距離調節(jié)啟動子并提高轉錄效率的一段DN際列。42 .終止子:是為轉錄提供終止信號的一段DNA列。43 .沉默子:是遠距離調節(jié)啟動子以降低轉錄

8、速率的一段DN際列。44 .操縱子:由數(shù)個功能相關的結構基因及其調控區(qū)(操縱基因、啟動子及其它有調控功能的單位)組成。45 .復制子:是一段包含復制起始位點和反式因子作用區(qū)在內(nèi)的DNA區(qū)段。46 .植物轉化受體系統(tǒng):指用于轉化的外植體通過組織培養(yǎng)途徑或其它途徑,能高效、穩(wěn)定地再生無性系,并能接受外源DNA整合,對轉化選擇抗生素敏感的再生系統(tǒng)。47 .胚胎干細胞:是從早期胚胎內(nèi)細胞團中分離出的未分化、具有正常二倍體和發(fā)育全能性的細胞。48 .細胞核移植技術:是將一個體細胞核移植到另一個體的卵細胞中去,最終產(chǎn)生一個與供體細胞個體遺傳性狀一致的動物個體的技術。P223-22449 .基因治療:是指向

9、目的細胞引入正常功能的可表達的基因,從而修正由于基因缺陷所造成的遺傳性疾病。50 .分子標記:能反映生物個體或種群間基因組中某種差異特征的DNAt段,表現(xiàn)為核甘酸序列的任何差異,哪怕是單個核甘酸的變異。問答及填空:1 .基因工程的技術流程:?目的基因克隆?載體的準備?目的基因與載體的連接?重組DNA?;?轉染/轉導?重組體的篩選與鑒定?重組體的大量培養(yǎng),外源基因表達效應分析與開發(fā)應用2 .基因工程的基本條件:目的基因、載體、工具酶、受體細胞(宿主細胞)3 .基因工程的技術策略:(1) .強化基因的表達,改善生物性狀(2) .關閉特定基因的表達,改善生物性狀(3) .基因的異源表達賦予生物新的功

10、能(4) II型限制性核酸內(nèi)切酶命名原則:1 .用屬名的第一個字母和種名的頭兩個字母組成3個字母的略語表示寄主菌的物種名。大腸桿菌(Escherichiacoli)用Eco表示;流感嗜血菌(Haemophilusinfluenzae)用Hin表示。2 .若該菌有不同的變種或品系,再加上變種或品系的第一個字母,如EcoRI。3 .如果一種特殊的寄主菌內(nèi)有幾種不同的限制-修復系統(tǒng),用羅馬字母表示,如EcoRI,EcoRV。4 .限制酶前面要帶上R(Restriction),修飾酶前面要帶上M(Modification)。(現(xiàn)已省略)5 .產(chǎn)生星活性的原因及影響其酶活性的因素?導致星號活性發(fā)生的因素

11、高甘油含量(>5%,V/V);限制酶用量過大(>100U/科gDNA);低離子強度(<25mmol/L);高pH(>pH8.0);含有機溶劑(如二甲基亞碉、乙醇、二甲基乙酰胺等);Mn+、Cu2+、Co+>Zn2+等非M的二價陽離子存在。?抑制星號活性的方法盡量用較少的酶進行完全消化反應,這樣可以避免過度消化以及過高的甘油濃度;盡量避免有機溶劑的污染;將離子濃度提高到100-150mM將反應緩沖液的pH值降到7.0;2+二價離子用Mg。6 .DNA連接酶的種類及作用特點種類:大腸桿菌DNA1接酶、T4DNA1接酶、嗜熱菌DNA1接酶DNA1接酶催化的連接反應特點連

12、接反應發(fā)生在一條DNA鏈白3'-OH端和另一條DNA鏈白5'-P端之間;連接反應需要ATP或NADMg2+作為輔助因子與激活因子;DNA1接酶不能催化兩單鏈DN6子或環(huán)化單鏈DNA子的連接;只能連接雙鏈DNA分子的單鏈缺口(nick),不能連接雙鏈中的裂口(gap)。7 .常見工具酶的用途如:DN咪合酶:補齊5'-突起端?合成第二條cDNA?除去3'-端突起的單鏈DNA(在無dNTP時)?切口移位制備探針反轉錄酶:?以mRN朋模板合成其互補的DNA(cDNA)用于構建cDNA和基因克?。?對具5'端突出的DNA段的3'凹端進行補平和標記,制備雜交

13、探針;?代替Klenow片段或測序酶,用于DNA列分析。堿性磷酸酶:?DNA或RNA分子片段5'末端的去磷酸化,防止自身連接;在5'端標記之前,去除DNA或RNA分子的5'末端磷酸基團。%-32末端轉移酶:?用于克隆DNM段,給載體和外源DNA3'末端分別加上互補的同聚物尾巴,以便二者在體外連接。?用于DNA片段3'末端標記,催化a-32P-3'-脫氧核甘酸標記DNA片斷的3'末端;催化生物素等非放射性的標記物摻入到DNA片斷的3'-末端。?按照模板合成多聚核糖核昔同聚物。多核甘酸激酶:?DNA5端磷酸化?標記DNAeRNA勺5&

14、#39;端8 .質粒的基本性質:自主復制性、不相容性、轉移性、攜帶特殊的遺傳標記9 .理想質粒載體的必備條件和質粒載體人工構建的策略理想質粒載體的必備條件:?具有較小的分子質量和較高的拷貝數(shù);?具有盡可能多限制酶的單一酶切位點;?具有兩種以上的選擇標記基因;?缺失mob基因;?插入外源基因的重組質粒較易導入宿主細胞并復制和表達。質粒人工構建的策略P39-40?加入合適的選擇標記基因,如兩個以上,易于用作選擇;?增加或減少合適的酶切位點,便于重組;?縮短長度,切去不必要的片段,提高導入效率,增加裝載量;?改變復制子,變嚴謹為松弛,變少拷貝為多拷貝;?根據(jù)基因工程的特殊要求加裝特殊的基因元件。10

15、 .入和M13噬菌體的性質入噬菌體的性質?是E.coli的溫和型噬菌體。?入噬菌體顆粒中的DNA是一線性dsDNA分子,兩端各有12個堿基(5'-GGGCGGCGACCT-)的5'凸出黏性末端是互補的。進入細菌細胞的入DNA通過兩端的黏性末端配對形成環(huán)狀的dsDNA這種由黏性末端結合形成的雙鏈區(qū)段稱為cos位點(cohesiveendsite)。?含有60多個基因,整個基因組分為三部分11 .入噬菌體載體的構建與類型、各種載體承載量的大小。噬菌體載體的構建:?縮短長度,提高裝載量;?刪除重復的酶切位點,增加一些單一的酶切位點;?加裝選擇標記(免疫功能類標記和顏色反應類標記);?

16、構建琥珀密碼子的突變體。噬菌體載體的類型:P44-45插入型載體:載體長度37kb,插入片段大小0-14kb(51-37)置換型載體:載體長度26kb,最小裝載長度10kb(36-26),最大裝載長度25kb(51-26)12 .提取和純化DNA的步驟主要有:細胞裂解和DNA勺溶解與保護;去除與核酸結合的蛋白質及RNA等雜質;DNA的沉淀和純化。13 .如何檢測、評價提取的DN頗量:(一)紫外分光光度法測定DNARNA的濃度和純度?DNARNA鏈上堿基的苯環(huán)結構在260nm處有特異的紫外吸收峰,吸收強度不僅與它們總含量有關,還與它們的分子形狀、單雙鏈有關。?可用OD60/OD280值衡量DNA

17、/RN掰純度?純DNA勺OD60/OD280應為1.8,大于1.9表明有RNA虧染,小于1.6表明有蛋白質或酚污染;同時OD60/OD230應大于2.0,小于2.0表明溶液中有殘存的多糖、鹽和小分子雜質等。?純RNA勺OD60/OD280應介于1.7-2.0之間,小于1.7說明有蛋白質或酚的污染,大于2.0表明有異硫鼠酸月瓜殘存;同樣OD60/OD230應大于2.0,小于2.0表明有小分子及鹽和多糖存在。?(二)瓊脂糖凝膠電泳鑒定?(三)核酸的保存14 .DNA電泳的影響因素:?DNA子大小:分子越大,泳動越慢,遷移速率與線狀DNA分子質量的對數(shù)值成反比。?DNA子構型:超螺旋環(huán)狀線狀切口環(huán)狀

18、。?凝膠濃度:濃度越高,電泳速率越慢;濃度低的膠線性范圍較寬,濃度高的膠對小分子DNA較好的線性關系。?電場強度:強度高,電泳速度快,但分辨率低。?凝膠和電泳緩沖液中的澳化乙錠(EB):插入dsDNA造成其負電荷減少、剛性和長度增加。對超螺旋的DNA分子影響較大。15 .分子雜交的主要技術的原理、步驟及用途,探針的制備方法分子雜交的基本原理:具有互補特定核甘酸序列的ssDNA或RNA昆在一起時,其相應同源區(qū)段將會退火形成雙鏈結構。把一段已知基因(DNA或RNA)的核酸序列用合適的標記物予以標記,當作探針(probe),與變性后的單鏈基因組DNA或RNA等進行雜交。再用合適方法把標記物檢測出來,

19、就可確定靶核甘酸序列的拷貝數(shù)及表達豐度等。探針制備的方法:1.均勻標記:(1)切口平移法標記、(2)隨機引物法(6核甘酸引物標記法)、(3)PCFT增標記2.末端標記:5'末端標記法、3'末端標記法、T4聚合酶替代法。16.PCR技術的原理、步驟、體系及引物設計的原則PCR術的原理:(變性、復性、半保留復制)在有DNAII鏈、與DNA鏈互補的寡核甘酸引物、dNTPs及DNA聚合酶的情況下,當引物與單鏈的互補區(qū)結合后,在DN咪合酶的催化作用下即可進行DNA單鏈的5'-3合成反應。PC破術的基本過程P79?DNAII板的變性(denatureation):將待擴增DN劭口熱

20、到95c左右,使dsDNAM開成為單鏈并作為模板;?模板與引物的結合(退火annealing或復性):將體系溫度降至合適溫度(55C左右),使加入的引物與模板DNA兩端堿基序列互補結合;?引物延伸(extension):將體系溫度升到72c左右,Taq聚合酶催化dNTP按堿基互補原則連接在DNA引物3'端,使引物延伸,形成兩條與模板互補的新鏈。PC阪應的成分:1.緩沖?夜,2.MgCl2,3.dNTPs,4.引物,5.模板DNA6.TaqDNA聚合酶引物設計的3條基本原則:引物與模板的序列要緊密互補;引物與引物之間避免形成穩(wěn)定的二聚體或發(fā)夾結構;引物不能在模板的非目的位點引發(fā)DNA聚合

21、反應(即錯配)。17 .基因文庫的分類及操作步驟分類:外源DNA段、載體、宿主基因組DNA文庫的構建程序:?高純度大相對分子質量基因組DNA勺提取和大片段的制備;?高純度基因組DNA的部分酶切與脈沖電泳分級分離;?載體DNA的制備;?載體與外源片段的連接與轉化或侵染宿主細胞;?重組克隆的挑選和保存。18 .基因組DNAC庫與cDNA文庫的優(yōu)缺點?cDNA文庫的優(yōu)點(與基因組文庫相比)P116-117cDNA克隆以mRN朋材料,特別適用于某些RNA病毒等的基因組結構研究及有關基因的克隆分離;cDNA文庫的篩選比較簡單易行;假陽性的概率比較低;cDNA克隆可進行原核表達;cDNA克隆還可用于真核細

22、胞mRNA勺結構和功能研究。?cDNA文庫的缺點(與基因組文庫相比)包含的遺傳信息要遠遠少于基因組DNAt庫,并且受細胞來源或發(fā)育時期的影響;不能直接獲得基因內(nèi)含子序列和調控序列的結構與功能信息,不能克隆到基因組DNA中的非轉錄區(qū)段序列;cDNA文庫中,不同克隆的分布狀態(tài)總是反映著mRNA勺分布狀態(tài),即:高豐度mRNA的cDNA隆,所占比例較高,分離基因容易;低豐度mRNAjcDNA克隆,所占比例較低,分離基因困難。19 .外源DNA段與載體DNA段連接方式:一、黏性末端的連接(一)同一種酶產(chǎn)生的黏性末端的連接(二)不同種酶產(chǎn)生的黏性末端的連接二、平末端的連接1 .直接連接2 .人工加尾形成“

23、粘性末端”(1)同聚加尾法(2)銜接物(linker)連接法(3)接頭(adapter)分子連接法三、PCR產(chǎn)物的連接1 .引入酶切位點連接法2 .T-A克隆法20 .CaCl2法制備細胞感受態(tài)轉化重組DNA的原理及步驟。?原理:細菌處于0c的低滲CaCl2溶液中,細胞膨脹成球形,DNAWCa2+結合形成抗DNase的復合物粘附于細胞表面,經(jīng)42c短暫熱擊后,細胞膜形成許多間隙,DNA進入細胞。P139細菌感受態(tài)細胞的制備過程(CaCl2):21 .重組子的篩選與鑒定的方法與原理,尤其是插入失活法、P-半乳糖甘酶顯色法和核酸雜交法一、載體表型選擇法:P152-1531 .抗藥性標記插入失活選擇

24、法2 .3-半乳糖甘酶顯色反應選擇法二、根據(jù)插入基因的表型選擇法?原理:外源DN廊碼的基因對宿主菌株所具有的突變發(fā)生體內(nèi)抑制或互補效應,從而使被轉化的宿主細胞表現(xiàn)出外源基因編碼的表型特征三、DNA電泳檢測法四、PCR僉測法?原理:PCRt歸在模板序列上擴增出預期DNM斷。五、核酸雜交檢測法?原理:利用標記的核酸做探針與轉化細胞的DNA進行分子雜交,可以直接篩選和鑒定目的序列克隆。六、免疫化學檢測法P154-155?原理:利用抗體作為“探針”來檢測轉入受體菌并且表達出相應的蛋白質的外源基因。22 .影響外源基因表達的因素:一、閱讀框架對轉化基因表達的影響二、順式作用元件對轉化基因表達的影響三、翻

25、譯過程對表達的影響四、表達系統(tǒng)對表達產(chǎn)物的影響23 .原核與真核生物基因表達與調控的特點原核生物基因表達調控的特點:1 .原核生物基因表達以操縱子為單位。2 .原核生物只有一種RNA聚合酶。3 .原核生物無核膜,轉錄和翻譯過程是偶聯(lián)的。4 .原核生物基因一般不含內(nèi)含子,在原核細胞中缺乏真核細胞的轉錄后加工系統(tǒng)。5 .原核生物基因表達的調控主要在轉錄水平真核生物基因表達調控的特點:1 .基因組DNA勺存在形式可影響基因表達,其基因的表達調控比原核生物要復雜得多;2 .真核基因的轉錄和翻譯不是偶聯(lián)在一起的;3 .真核基因表達的調控是多層次的;4 .基因表達具有組織和細胞類型特異性;5 .不同的真核

26、細胞在基因表達調控中對信號分子的反應不同。24 .了解植物、動物和微生物基因工程的應用植物基因工程的應用(一)在植物遺傳改良中的應用(二)作為藥物生產(chǎn)的反應器動物基因工程的應用1 .利用轉基因技術改良動物遺傳性狀2 .利用轉基因動物生產(chǎn)生物大分子3 .異種器官移植4 .利用轉基因技術構建醫(yī)學動物模型5 .基因治療微生物基因工程的應用(一)微生物基因工程在農(nóng)業(yè)領域的應用(二)微生物基因工程在工業(yè)領域的應用(三)微生物基因工程在藥物生產(chǎn)上的應用(四)微生物基因工程在環(huán)境保護上的應用25 .常見分子標記的種類、原理?分子標記的類型Hibridization-basedmarkers以分子雜交為基礎的

27、DNAj示記技術(RFLP標記、DNA旨紋技術、原位雜交)PCR-basedmarkers以PCR反應為核心的分子標記技術(RAPD記、SSR標t己、SSLP標t己、SCARCE、AFLP標t己、STS標t己)Sequencingbasedmarkers新型的分子標記(SN%H己、EST標記)1 .限制性片段長度多態(tài)性(restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP)?原理:DNA序列上的微小變化,可能引起限制性內(nèi)切酶切點的丟失或產(chǎn)生,導致酶切片段長度的變化。2 .隨機擴增多態(tài)性DNAfe記(randomamplifiedpolymorphicDNA,RA

28、PD)?原理:用一個隨機引物(8-10個堿基)非定點地擴增基因組DNA然后用凝膠電泳分開擴增片段。3 .擴增片段長度多態(tài)性(amplifiedfragmentlengthpolymorphism,AFLP)?原理:先將基因組DNAffi兩種限制酶切成大小不等的片斷,并與含有粘性末端的人工接頭相連,形成不同酶切位點的限制性酶切片段,然后用與接頭和位點相匹配的引物進行預擴增,預擴增產(chǎn)物作為進一步PCR擴增的模板,再選用特異引物進行選擇性擴增,擴增后的產(chǎn)物經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳將特異的限制性片段分離。4 .簡單重復序列(simplesequencerepeat,SSR)?原理:根據(jù)兩端序列的保守性,設

29、計引物;進行PCR電泳分離,染色顯帶以檢測微衛(wèi)星序列多態(tài)性。一、名詞解釋(10個,20分)二、填空題(20分,每空1分)三、單項選擇題(10題,10分)四、判斷題(10題,10分)五、簡答題(30分,每小題6分)六、論述題(1題,10分)第二章填空題1 .枯草芽抱桿菌蛋白酶;(1)543'合成酶的活性;(2)345'外切核酸酶2 .堿性磷酸酶;5'端的磷酸基團3 .DNA聚合酶I:5'f3'外切核酸酶;5'f3'合成酶4 .S1核酸酶切割;DNA聚合酶補平5 .核酸水解酶H;RNA6 .5'-3舍成酶;3'-5'外

30、切核酸酶選擇題1.b;2,b;3.b,c,d,e;4,b;5.d;6.b;7,a;8.a;9.d;10.b;11.d;12.abc;13.a,b;14.a;15.c;16.d;17.c;18.B;19.D;20.D;21.D第三章1 .質粒載體、噬菌體載體、質粒-噬菌體混合載體(或克隆載體、表達載體、整合載體)2 .復制區(qū)、選擇標記、克隆位點3 .缺少選擇標記,克隆位點4 .(1)分子量大(2)酶的多切點(3)無選擇標記5 .75%105%6 .T-DNA區(qū);Vir區(qū);Con區(qū);Ori區(qū)7 .b;8.b;9.a,c,d,e;10.d20.答:這種方法是根據(jù)組織化學的原理來篩選重組體。主要是載體上帶有一個來自大腸桿菌的lac操縱子的DNA區(qū)段,這一區(qū)段編碼3-半乳糖甘酶氨基端的一個蛋白片段。IPTG(異丙基-3-D-硫代半乳糖甘)可以誘導該片段的合成,而該片段能與宿主細胞所編碼的3-半乳糖甘酶竣基端的一個蛋白片段互補(口-互補)。故暴露于誘導物IPTG的細菌含有編碼lacZ的質粒可同時合成該酶的兩種片段,該菌在

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