1、一、實驗?zāi)康囊?、實驗?zāi)康?.學(xué)習(xí)并掌握觀察放線菌形態(tài)的基本方法，初學(xué)習(xí)并掌握觀察放線菌形態(tài)的基本方法，初步了解放線菌的形態(tài)特征。步了解放線菌的形態(tài)特征。2.觀察酵母菌的形態(tài)及出芽生殖方式，學(xué)習(xí)區(qū)觀察酵母菌的形態(tài)及出芽生殖方式，學(xué)習(xí)區(qū)分酵母菌死活細(xì)胞的實驗方法。分酵母菌死活細(xì)胞的實驗方法。3.掌握酵母菌的一般形態(tài)特征及其與細(xì)菌的區(qū)掌握酵母菌的一般形態(tài)特征及其與細(xì)菌的區(qū)別。別。二、實驗原理二、實驗原理 放線菌菌落在培養(yǎng)基上著生牢固，與基質(zhì)結(jié)合放線菌菌落在培養(yǎng)基上著生牢固，與基質(zhì)結(jié)合緊密，難以用接種針挑取。緊密，難以用接種針挑取。 放線菌細(xì)胞一般呈分枝無隔的絲狀，菌絲體分放線菌細(xì)胞一般呈分枝無隔的絲

2、狀，菌絲體分為在培養(yǎng)基內(nèi)部的基內(nèi)菌絲和伸出培養(yǎng)基表面的氣為在培養(yǎng)基內(nèi)部的基內(nèi)菌絲和伸出培養(yǎng)基表面的氣生菌絲。氣生菌絲上部分化成孢子絲，呈螺旋狀、生菌絲。氣生菌絲上部分化成孢子絲，呈螺旋狀、波浪狀或分枝狀。菌絲呈各種顏色，有的能分泌水波浪狀或分枝狀。菌絲呈各種顏色，有的能分泌水溶性色素到培養(yǎng)基內(nèi)。孢子絲長出孢子，孢子形狀溶性色素到培養(yǎng)基內(nèi)。孢子絲長出孢子，孢子形狀各異。由于孢子的存在使菌落表面呈干粉狀。各異。由于孢子的存在使菌落表面呈干粉狀。 放線菌的孢子絲形狀和孢子排列情況是放線菌放線菌的孢子絲形狀和孢子排列情況是放線菌分類的重要依據(jù)。分類的重要依據(jù)。 酵母菌是不運動的單細(xì)胞真核微生物，其大小

3、通酵母菌是不運動的單細(xì)胞真核微生物，其大小通常比常見細(xì)菌大幾倍甚至十幾倍。大多數(shù)酵母以常比常見細(xì)菌大幾倍甚至十幾倍。大多數(shù)酵母以出芽方式進(jìn)行無性繁殖，有的分裂繁殖；有性繁出芽方式進(jìn)行無性繁殖，有的分裂繁殖；有性繁殖是通過接合產(chǎn)生子囊孢子。本實驗通過美藍(lán)染殖是通過接合產(chǎn)生子囊孢子。本實驗通過美藍(lán)染液浸片來觀察酵母的形態(tài)和出芽生殖方式。液浸片來觀察酵母的形態(tài)和出芽生殖方式。 美藍(lán)是一種無毒性的染料，它的氧化型呈藍(lán)色，美藍(lán)是一種無毒性的染料，它的氧化型呈藍(lán)色，還原型無色。用美藍(lán)對酵母的活細(xì)胞進(jìn)行染色時，還原型無色。用美藍(lán)對酵母的活細(xì)胞進(jìn)行染色時，由于細(xì)胞的新陳代謝作用，細(xì)胞內(nèi)具有較強(qiáng)的還由于細(xì)胞的新

4、陳代謝作用，細(xì)胞內(nèi)具有較強(qiáng)的還原能力，能使美藍(lán)由藍(lán)色的氧化型變?yōu)闊o色的還原能力，能使美藍(lán)由藍(lán)色的氧化型變?yōu)闊o色的還原型。因此，具有還原能力的酵母活細(xì)胞是無色原型。因此，具有還原能力的酵母活細(xì)胞是無色的，而死細(xì)胞或代謝作用微弱的衰老細(xì)胞則呈藍(lán)的，而死細(xì)胞或代謝作用微弱的衰老細(xì)胞則呈藍(lán)色或淡藍(lán)色，借此即可對酵母菌的死細(xì)胞和活細(xì)色或淡藍(lán)色，借此即可對酵母菌的死細(xì)胞和活細(xì)胞進(jìn)行鑒別。胞進(jìn)行鑒別。放線菌菌落形態(tài)放線菌菌落形態(tài)酵母菌菌落形態(tài)酵母菌菌落形態(tài)酵母菌形態(tài)酵母菌形態(tài) 三、實驗器材三、實驗器材1.1.菌種：放線菌菌種：放線菌插片培養(yǎng)物插片培養(yǎng)物，啤酒酵母，啤酒酵母（芽殖）（芽殖），裂殖裂殖酵母酵母（

5、子囊和子囊孢（子囊和子囊孢子）子） ，假絲假絲酵母酵母2.2.染色液：染色液：0.10.1呂氏堿性美藍(lán)染色液呂氏堿性美藍(lán)染色液3.3.器材：器材：顯微鏡，載玻片，蓋玻片等顯微鏡，載玻片，蓋玻片等四、實驗步驟四、實驗步驟1.1.取一片放線菌插片，放在載玻片上（有菌的取一片放線菌插片，放在載玻片上（有菌的一面朝上），顯微鏡下觀察（低倍一面朝上），顯微鏡下觀察（低倍高倍）。高倍）。2.2.水浸片法觀察酵母菌：水浸片法觀察酵母菌：在載玻片中央加一滴在載玻片中央加一滴美藍(lán)染色液，用接種環(huán)挑取少許酵母菌放入美藍(lán)染色液，用接種環(huán)挑取少許酵母菌放入染液中，混合均勻，蓋上蓋玻片（染液中，混合均勻，蓋上蓋玻片（勿使產(chǎn)生勿使產(chǎn)生氣泡），氣泡），顯微鏡下觀察（低倍顯微鏡下觀察（低倍高倍）。高倍）。 注意觀察酵母菌的注意觀察酵母菌的形態(tài)大小、芽殖、裂形態(tài)大小、芽殖、裂殖（子囊和子囊孢子）和假菌絲，區(qū)分死活殖（子囊和子囊孢子）和假菌絲，區(qū)分死活細(xì)胞。細(xì)胞。 五、實驗結(jié)果五、實驗結(jié)果 繪圖：放線菌（孢子絲、孢子）繪圖：放線菌（孢子絲、孢子） 酵母菌