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1、從多年前上大學(xué)就搞不清六通閥的原理。前幾天終于有一個(gè)機(jī)會(huì)。讓我徹底明白了。我在閥上反復(fù)摸索,琢磨,終于明白了。大家看下示意圖。這個(gè)圖相當(dāng)于我們從六通閥前方“透視”這個(gè)閥的示意圖。實(shí)線部分表示轉(zhuǎn)子。虛線部分表示定子部分。中間紅色的表示定量環(huán)。黑色的表示廢液流出管。值得注意的是,在轉(zhuǎn)子上有兩個(gè)槽(而不是目前書(shū)上所見(jiàn)的三個(gè)槽!),定子是完全平的,除了那六個(gè)孔以外。這兩個(gè)槽是有一定弧度的。目的是為了不讓液體流的時(shí)候有死角。我的圖畫(huà)得不太好,這六個(gè)孔應(yīng)該是完全均等的。這一點(diǎn)請(qǐng)大家諒解。還有,圖中所畫(huà)的進(jìn)樣位置等比實(shí)際的要大.實(shí)際中,進(jìn)樣針口這個(gè)地方是很少的.而后面定子出來(lái)的管路并不是完全平的,而有像外斜
2、的.所以從后面看,好像這個(gè)定子的六個(gè)孔之間位置拉得很開(kāi).實(shí)際上里面是比較小的.不知這樣說(shuō)大家是否明白了?或者說(shuō)我說(shuō)清楚了?教材中錯(cuò)誤如下:1轉(zhuǎn)子中的連通槽只有兩個(gè),但教材中是三個(gè)。如果是三個(gè),閥就要漏液了。2廢液的流出在上樣和進(jìn)樣狀態(tài)下是不同的。位置不同。不是同一個(gè)出口出來(lái)的。當(dāng)我們進(jìn)樣(inject)后,如果再打一針進(jìn)去,這些樣品是不會(huì)帶到流動(dòng)相中的,而是直接從后面與進(jìn)樣口對(duì)著的位置的管子出來(lái)。這樣,我們進(jìn)樣后是不需要留針的,留也是白留。以前我老師教我時(shí)說(shuō)要留一下針,覺(jué)得這樣可能有利于樣品能被流動(dòng)相沖得完全一些。今天理解了這個(gè)圖之后,發(fā)現(xiàn)不是這么回事。因?yàn)樵趇nject之后,針就與那個(gè)流動(dòng)相
3、管路沒(méi)得一點(diǎn)關(guān)系了。打了樣品進(jìn)去直接出來(lái)了。所以,留針沒(méi)有任何意義。3從圖上也可以看出,進(jìn)樣時(shí)是一定要將針插在進(jìn)針口里的。有的人把針拔出來(lái)后再進(jìn)樣是肯定定不準(zhǔn)的。值得注意的是,盡管一再?gòu)?qiáng)調(diào)針要用平頭針,但實(shí)踐中仍有一些無(wú)知的人用帶尖的針。這是非常不可思議的。當(dāng)然,這是一些完全不懂液相的人操作。如果用尖針,在轉(zhuǎn)動(dòng)閥扳手過(guò)程中,針尖就會(huì)劃到圖中定子中上樣位置到進(jìn)樣位置之間的平面,就會(huì)形成一個(gè)槽。這樣會(huì)有什么樣的損害呢?很明顯,這樣,當(dāng)我們進(jìn)樣時(shí),由于有這樣一個(gè)槽存在,那么,打入定量環(huán)時(shí),樣品不會(huì)完全進(jìn)入定量環(huán),而會(huì)從左邊這個(gè)槽漏出來(lái)。這樣,打入樣品就根本就不會(huì)準(zhǔn)確。即使是用全量充滿的方法進(jìn)樣品,由
4、于左邊有一個(gè)槽,每次打樣品漏出的東東多少不一樣,這樣定量環(huán)就根本沒(méi)有起到定量的作用(見(jiàn)下圖)。這是教材和其它參考書(shū)中圖的錯(cuò)誤的實(shí)在所在!到目前為止,我還沒(méi)見(jiàn)過(guò)一個(gè)正確的圖示。不但是教材上搞錯(cuò),而且儀器說(shuō)明書(shū)上的示意圖,位置沒(méi)有與實(shí)際中的閥完全對(duì)上位置。儀器說(shuō)明書(shū)的圖是從定子方面往轉(zhuǎn)子方向來(lái)看的,所以讓人費(fèi)解。如果要能很好地直觀地理解,可以自己制作一個(gè)模型。用塑料即可。不得不指出的是,目前在網(wǎng)上流行一個(gè)外文的六通閥示意圖的動(dòng)畫(huà),那個(gè)圖是完全錯(cuò)誤的!我希望大家不要再被那個(gè)圖誤導(dǎo)了。除此之外,我看到有很多人在進(jìn)樣后沒(méi)有將閥扳回原來(lái)位置,覺(jué)得好像這樣能沖洗定量環(huán)更干凈。其實(shí)不然。在扳閥過(guò)程中,定量環(huán)中
5、液體受到高壓液體的沖洗,很快就沖走了。如果不放心,讓它停留在進(jìn)樣位置十來(lái)秒即可。但不宜長(zhǎng)時(shí)間這樣。大家想一想,定量環(huán)長(zhǎng)度約有十多厘米,而體積只有20ul.說(shuō)明什么?說(shuō)明它的管徑非常細(xì).那么這么細(xì)的管子在受到高壓液體的長(zhǎng)時(shí)間沖洗會(huì)是什么樣的情況呢?那自然是易受損了.因此,為了延長(zhǎng)六通閥的壽命,在進(jìn)樣后要及時(shí)扳回原來(lái)位置.現(xiàn)將六通閥的使用注意事項(xiàng)列如下:1進(jìn)樣前樣品要用0.22um微孔濾膜過(guò)濾.水相用水膜,有機(jī)相用有機(jī)膜.水相有機(jī)相相等也用有機(jī)膜.2進(jìn)樣前先打一至兩針不扳閥,以使定量環(huán)中上次殘留樣品沖洗干凈,保證充滿目標(biāo)樣品.3進(jìn)樣時(shí)要保證針插到位.用手指輕輕護(hù)住進(jìn)樣針前端玻璃,以免注射過(guò)程中由于后端有所搖動(dòng)而使針頭在管路中受力.4進(jìn)樣時(shí)一定要帶針.如果將樣品注滿定量環(huán)后就拔針,再扳閥,就不能保證定量環(huán)中液體完全被流動(dòng)相沖走.進(jìn)樣后一定要拔針。不拔針,由于受重力影響,針后端重力會(huì)以針與進(jìn)口處的接觸點(diǎn)為支點(diǎn),形成一個(gè)力矩。會(huì)使針變彎。而且,在多人做實(shí)驗(yàn)時(shí),容易碰到針,倘若不小心使針斷在里面,那麻煩就大了。我想大家都知道一個(gè)六通閥是八千到一萬(wàn)元。5進(jìn)樣后拔針,及時(shí)扳回閥.最多沖十秒左右即可.即使考慮可能定量環(huán)中有殘留物質(zhì),也不宜長(zhǎng)時(shí)間沖閥,而應(yīng)采用多次短暫時(shí)間沖閥.一般一次十秒左右.當(dāng)然,也有人認(rèn)為
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