1、專(zhuān)題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)分層設(shè)計(jì)助學(xué)助記認(rèn)知更深刻理一理何養(yǎng)基,慨念膽青一口斷同體培養(yǎng)私 奈而鬻y皿血i判一判1 .所有的培養(yǎng)基中都要加入瓊脂。（X ）2 .微生物在液體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)可形成菌落。（X ）3 .培養(yǎng)不同微生物的培養(yǎng)基成分完全一樣。（X）4 .培養(yǎng)純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染。（，）5 .相對(duì)于消毒，滅菌對(duì)微生物的殺滅更徹底。（，）6 .無(wú)菌操作的對(duì)象只要是沒(méi)有生物活性的材料（如培養(yǎng)基、 接種環(huán)等）都可采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。（x）7 .培養(yǎng)基最常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。（，）8 .倒平板后，待平板冷凝之后需將其倒置。（，）9 .若皿蓋和皿底之

2、間濺上培養(yǎng)基，這個(gè)培養(yǎng)基不可再用。（V）10.采取平板劃線接種法時(shí)，每一次劃線前都要挑取菌種。（X）11 .對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)最好采用稀釋涂布平板法。（V）12 .需要一個(gè)不接種的培養(yǎng)基放在相同條件下培養(yǎng)以檢驗(yàn)培養(yǎng)基的滅菌是否合格。（，）悟一悟1 .牛肉膏提供的主要營(yíng)養(yǎng)是碳源、氮源、磷酸鹽和維生素， 蛋白陳提供的主要營(yíng)養(yǎng)是碳源、氮源和維生素。2 .溶化后如需調(diào)整pH,應(yīng)先調(diào)節(jié)pH,再滅菌。3 .培養(yǎng)基滅菌后要冷卻到 50 C左右時(shí)開(kāi)始倒平板，其原 因是瓊脂是一種多糖，在 98 c以上熔化，在44 C以下凝固， 倒平板時(shí)高于50 C會(huì)燙手，低于50 C時(shí)，若不及時(shí)操作，瓊 脂會(huì)凝固。4 .倒平板

3、時(shí)，要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰。通過(guò)灼燒滅菌， 防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。5 .平板冷凝后，要將平板倒置。因?yàn)槠桨謇淠?，皿蓋上 會(huì)凝結(jié)水珠，將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基， 又可避免培養(yǎng)基中的水分過(guò)快地蒸發(fā)。6 .在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿 底之間的部位，那么這個(gè)平板不能用來(lái)培養(yǎng)微生物，因?yàn)榭諝庵械奈⑸锟赡茉诿笊w與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。感悟體會(huì)：練一練1 .2019 江蘇高考題下列關(guān)于微生物實(shí)驗(yàn)操作的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌8 .接種前后，接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒C.接種后的培養(yǎng)皿要倒置，以防培養(yǎng)污染D.

4、菌種分離和菌落計(jì)數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基解析：接種室、接種箱等常用紫外線消毒法處理，接種環(huán)等 常用灼燒滅菌法處理，吸管、培養(yǎng)皿等常用干熱滅菌法處理，培 養(yǎng)基及多種器材用高壓蒸汽滅菌法處理，A項(xiàng)錯(cuò)誤；為了防止雜菌污染，每次接種前后，接種環(huán)都要進(jìn)行灼燒滅菌，B項(xiàng)正確；接種后，培養(yǎng)皿需要倒置，以防皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基造成污染， C項(xiàng)正確；分離菌種可以用平板劃線法和稀釋涂布平板法，后者 還可以用于微生物的計(jì)數(shù)，所用培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，D項(xiàng)正確。答案：A2. 2019 全國(guó)卷田回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問(wèn)題。（1）在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源、氮源的成分是（填“蛋白陳” “葡萄糖”或“ NaNC ）

5、。通常，制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不同來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的 pH,其原因是 o硝化細(xì)菌在沒(méi)有碳源的培養(yǎng)基上 （填“能夠”或“不能”）生長(zhǎng)，原因是（2）用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)一般需要將平板 （填“倒置” 或“正置”）。（3）單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌 落的形狀、大小、顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物，原因 是（4）有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過(guò) 處理， 這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。解析：（1）葡萄糖只能為細(xì)菌提供碳源，硝酸鈉為細(xì)菌提供 無(wú)機(jī)鹽，而蛋白陳既可以為細(xì)菌提供碳源，也可以為細(xì)菌提供氮源；由于不同的細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的最適宜pH是不同的，因此制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)

6、的細(xì)菌的不同來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH;硝化細(xì)菌屬于化能自養(yǎng)型微生物，其可以利用氨氧化釋放的能量將空 氣中的二氧化碳固定為有機(jī)物，因此硝化細(xì)菌可以在無(wú)碳培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。（2）用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將平板倒置，以防止 皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。（3）由于每一大類(lèi)微生物都有其獨(dú)特的細(xì)胞形態(tài)，因而其菌落形態(tài)特征也各異，因此根據(jù)菌落的形態(tài)、大小、顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物。（4） 有些使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán) 境。答案：（1）蛋白陳 不同細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的最適pH不同能夠硝化細(xì)菌可以利用空氣中的 CO作為碳源（2）倒置（3）在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自

7、穩(wěn)定的 菌落特征（4）滅菌二測(cè)麗題組呈現(xiàn)一自刪訓(xùn)標(biāo)精足考點(diǎn)1實(shí)驗(yàn)原理1.不同的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。下列有關(guān)一種 以CO為唯一碳源的自養(yǎng)微生物所需營(yíng)養(yǎng)的描述中，不正確的是 （）A.氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮素B.碳源物質(zhì)也為該微生物提供能量C.無(wú)機(jī)鹽是該微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)D.水是該微生物的營(yíng)養(yǎng)要素之一解析：培養(yǎng)基中的氮源物質(zhì)可以為該微生物提供必要的氮 素，A項(xiàng)正確；該微生物只能以二氧化碳作為唯一碳源，二氧化 碳不能為該微生物提供能量，B項(xiàng)錯(cuò)誤；無(wú)機(jī)鹽可以為微生物提供碳、氮以外的重要元素，是該微生物不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，C項(xiàng)正確；水是生物體新陳代謝不可缺少的物質(zhì)，是該微生物的營(yíng)

8、 養(yǎng)要素之一，D項(xiàng)正確。答案：B2. 2019 四川高二期末下列關(guān)于消毒和滅菌的說(shuō)法，錯(cuò) 誤的是（）A.人們常用化學(xué)藥劑對(duì)水源和雙手進(jìn)行消毒B.接種室和超凈工作臺(tái)可用紫外線進(jìn)行消毒C.培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶后可以采用干熱滅菌D.接種環(huán)可在火焰充分燃燒層進(jìn)行灼燒滅菌解析：用酒精擦拭雙手進(jìn)行消毒；用氯氣消毒水源， A項(xiàng)正 確；接種室和超凈工作臺(tái)等表面消毒，可用紫外線進(jìn)行消毒，B項(xiàng)正確；培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶后可以采用高壓蒸汽滅菌，C項(xiàng)錯(cuò)誤；接種環(huán)可在火焰充分燃燒層進(jìn)行灼燒滅菌， D項(xiàng)正確。答案：C3. 2019 平遙縣第二中學(xué)高二月考下列常用的無(wú)菌操作 中錯(cuò)誤的是（）A.用酒精擦拭雙手B.玻璃器皿（吸管、

9、培養(yǎng)皿）可用酒精擦拭C.用氯氣消毒水源D.實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行解析：用酒精擦拭雙手的方法是對(duì)操作者進(jìn)行消毒，A項(xiàng)正 確；玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）等應(yīng)用干熱滅菌，酒精擦拭屬于消 毒，不能殺滅所有微生物，B項(xiàng)錯(cuò)誤；飲用水源用氯氣進(jìn)行消毒， C項(xiàng)正確；實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行，防止空氣中 的雜菌污染，D項(xiàng)正確。答案：B考點(diǎn)2實(shí)驗(yàn)操作4. 2019 四川樹(shù)德中學(xué)高二月考關(guān)于制備牛肉膏蛋白月東固 體培養(yǎng)基的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.將稱(chēng)好的牛肉膏連同稱(chēng)量紙一同放入燒杯溶解B.可用手觸摸來(lái)確定培養(yǎng)基是否冷卻至50 C左右，再進(jìn)行倒平板C.待平板冷卻凝固510分鐘后將平板倒過(guò)來(lái)放置D.該培養(yǎng)

10、基可用于培養(yǎng)細(xì)菌，但需將pH調(diào)至酸性解析：稱(chēng)量時(shí)牛肉膏易粘附在稱(chēng)量紙上，應(yīng)將稱(chēng)好的牛肉膏連同稱(chēng)量紙一同放入燒杯溶解，A項(xiàng)正確；用手觸摸錐形瓶，當(dāng)錐形瓶剛剛不燙手時(shí)，培養(yǎng)基約為 50 C左右，此時(shí)倒平板可防 止培養(yǎng)基凝固，B項(xiàng)正確；待平板冷卻凝固 510分鐘后將平板 倒過(guò)來(lái)放置，以防止培養(yǎng)皿蓋凝結(jié)的水珠滴落，污染培養(yǎng)基， C 項(xiàng)正確；培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基應(yīng)將 pH調(diào)至近中性，D項(xiàng)錯(cuò)誤。答案：D5. 2019 四川樹(shù)德中學(xué)高二月考下列有關(guān)細(xì)菌純化培養(yǎng) 的說(shuō)法，不正確的是（）A.實(shí)驗(yàn)操作者接種前要用 70%的酒精棉球擦手消毒B.每次劃線后接種環(huán)要在酒精燈火焰上灼燒滅菌C.培養(yǎng)基上的每個(gè)單菌落都是由一個(gè)細(xì)

11、菌細(xì)胞分裂而來(lái)D.菌液梯度稀釋后用涂布法接種，得到單菌落便于計(jì)數(shù)解析：70%勺酒精可以消滅細(xì)菌，實(shí)驗(yàn)操作者接種前要用 70% 的酒精棉球擦手消毒，A項(xiàng)正確；每次劃線后接種環(huán)要在酒精燈 火焰上灼燒滅菌，殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，使每次劃線菌種數(shù)目減少，B項(xiàng)正確；培養(yǎng)基上的單菌落也可能由兩個(gè)連在一起的細(xì)菌 細(xì)胞分裂而來(lái)，C項(xiàng)錯(cuò)誤；菌液梯度稀釋后用涂布法接種，可用 于計(jì)數(shù)，D項(xiàng)正確。答案：C6. 2019 四川會(huì)考下列關(guān)于制備牛肉膏蛋白陳固體培養(yǎng) 基的敘述，正確的是()A.操作順序?yàn)橛?jì)算、稱(chēng)量、溶化、倒平板、滅菌B.將稱(chēng)好的牛肉膏連同稱(chēng)量紙一同放入燒

12、杯C.待培養(yǎng)基冷卻至40 C左右時(shí)進(jìn)行倒平板D.待平板冷卻凝固約 510 s后將平板倒過(guò)來(lái)放置解析：制備牛肉膏蛋白陳固體培養(yǎng)基的步驟是計(jì)算、稱(chēng)量、 溶化、滅菌、倒平板，A項(xiàng)錯(cuò)誤；將稱(chēng)好的牛肉膏連同稱(chēng)量紙一 同放入燒杯，加入少量的水，加熱，B項(xiàng)正確；待培養(yǎng)基冷卻至50 C左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板，C項(xiàng)錯(cuò)誤；待平板冷卻凝固約510 min后，將平板倒過(guò)來(lái)放置，使皿蓋在下，皿底 在上，D項(xiàng)錯(cuò)誤。答案：B7. 2019 黑龍江大慶實(shí)驗(yàn)中學(xué)高二期中為了保持菌種的 純度需要進(jìn)行菌種的保藏，下列有關(guān)敘述，不正確的是()A.臨時(shí)保藏的菌種容易被污染或產(chǎn)生變異B.對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法

13、C.臨時(shí)保藏的菌種一般是接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上D.對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用-4 C低溫保藏的方法解析：臨時(shí)保藏的菌種由于頻繁轉(zhuǎn)種， 容易被污染或產(chǎn)生變 異，A項(xiàng)正確；對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法， 在固體斜面培養(yǎng)基上菌落長(zhǎng)成后， 放入冰箱低溫保藏，B項(xiàng)正確； 臨時(shí)保藏的菌種一般是接種到試管的斜面培養(yǎng)基上，等到菌落長(zhǎng)成后，放入冰箱低溫保藏，C項(xiàng)正確；對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種， 可以采用甘油管藏的方法，即在 3 mL甘油瓶中加入1 mL甘油后 滅菌，將1 mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后， 放在20 C的冷凍箱中保存，D項(xiàng)錯(cuò)誤。答案：D8. 2019 福建高

14、考模擬請(qǐng)根據(jù)所學(xué)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 和應(yīng)用知識(shí)，回答下列問(wèn)題：(1)在微生物培養(yǎng)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有 、和高壓蒸汽滅菌。(2)滅菌結(jié)束后，待培養(yǎng)基冷卻至 50 C左右時(shí)，在酒精燈 火焰旁將培養(yǎng)基倒入滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿中，這個(gè)操作稱(chēng)為O此過(guò)程還需要將錐形瓶的瓶口迅速通過(guò) 火 焰， 目 的 是（3）如圖為連續(xù)劃線法示意圖，在圖中（填圖中序號(hào)） 區(qū)域更易獲得單菌落，判斷依據(jù)是O（4）稀釋涂布平板法常用于統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)，先將菌液 進(jìn)行一系列的 ,然后取少量菌液涂布在培養(yǎng)基表面，這種方法得到的菌落數(shù)比活菌的實(shí)際數(shù)目低，原因是解析：（1）常用的滅菌方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌和高 壓蒸汽滅菌。（

15、2）倒平板操作是指滅菌結(jié)束后，待培養(yǎng)基冷卻至 50 C左右時(shí)，在酒精燈火焰旁將培養(yǎng)基倒入滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿中。 為避免瓶口微生物污染培養(yǎng)基，此過(guò)程還需要將錐形瓶的瓶口迅速通過(guò)火焰。（3）據(jù)圖分析可知，圖示為平板劃線法得到的平板， 依據(jù)是每次劃線的菌種都來(lái)自上一次劃線的末端，最后一次劃線結(jié)束時(shí)更容易獲得單菌落，圖中區(qū)域更易獲得單菌落。（4）用稀釋涂布平板法接種之前，需要將菌液進(jìn)行梯度稀釋。 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上只能形成一個(gè)菌落， 故由此得到 的菌落數(shù)比活菌的實(shí)際數(shù)目低答案：（1）灼燒滅菌 干熱滅菌（2）倒平板 防止瓶口微生物污染培養(yǎng)基（3） 每次劃線的菌種都來(lái)自上一次劃線的末端，最后一

16、 次劃線結(jié)束時(shí)更容易獲得單菌落（4）梯度稀釋當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上只能 形成一個(gè)菌落三測(cè) 壽鼬5IU時(shí)制.難易適中應(yīng)考更高效一、選擇題1 . 2019 四川石室中學(xué)高二月考有關(guān)培養(yǎng)基配制的描述 正確的是（）A.液體培養(yǎng)基常用于菌種的分離、計(jì)數(shù)、鑒定B.任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽等成分C.依據(jù)人們的需求，配制出供微生物生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)D.微生物的生長(zhǎng)除受營(yíng)養(yǎng)因素影響外，還受到 pH滲透壓 等影響解析：固體培養(yǎng)基常用于菌種的分離、計(jì)數(shù)、鑒定，A項(xiàng)錯(cuò)誤；培養(yǎng)基一般包括含有碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水等，有的微生 物還需要生長(zhǎng)因子，B項(xiàng)錯(cuò)誤；人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不 同需求

17、，配制出的供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)叫培養(yǎng)基，C項(xiàng)錯(cuò)誤；微生物的生長(zhǎng)除受營(yíng)養(yǎng)因素影響外，還受到pH氧、滲透壓的影響，D項(xiàng)正確。答案：D2 . 2019 四川高二期末下列關(guān)于分離、純化、保藏大腸 桿菌的說(shuō)法，正確的是（）A.平板劃線法能對(duì)大腸桿菌進(jìn)行準(zhǔn)確的計(jì)數(shù)B.平板劃線結(jié)束后，操作者不用灼燒接種環(huán)C.稀釋涂布平板法能對(duì)大腸桿菌分離、計(jì)數(shù)D.臨時(shí)保藏法保存大腸桿菌不需要重新轉(zhuǎn)移解析：平板劃線法只能用來(lái)分離純化大腸桿菌，不能計(jì)數(shù)， A項(xiàng)錯(cuò)誤；為防止雜菌污染，平板劃線法中每次劃線后均要灼燒 接種環(huán)，B項(xiàng)錯(cuò)誤；稀釋涂布平板法既能計(jì)數(shù)大腸桿菌數(shù)目，又 能用于分離純化，C項(xiàng)正確；臨時(shí)保藏法保存大腸桿菌，36個(gè)

18、月需要重新轉(zhuǎn)移，D項(xiàng)錯(cuò)誤。答案：C3 .下列有關(guān)細(xì)菌培養(yǎng)的敘述，正確的是 （）A.在瓊脂固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的單個(gè)菌落含有多種細(xì)菌8 .在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)C.向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長(zhǎng)D.用固體培養(yǎng)基可對(duì)微生物進(jìn)行分離解析：培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，在瓊脂固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的單個(gè)菌落僅 含有一種細(xì)菌，A項(xiàng)錯(cuò)誤；細(xì)菌對(duì)抗生素敏感，在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制細(xì)菌而促進(jìn)真菌生長(zhǎng)，B項(xiàng)錯(cuò)誤；破傷風(fēng)桿菌是嚴(yán)格厭氧型細(xì)菌，向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能抑制破傷風(fēng)桿菌的生 長(zhǎng)，C項(xiàng)錯(cuò)誤；用固體培養(yǎng)基可對(duì)微生物進(jìn)行分離培養(yǎng)，D項(xiàng)正確。答案：D4.做“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)時(shí)，下列敘述正確的

19、是 ()A.任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽B.倒平板時(shí)，應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到 皿蓋上C.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌 落D.用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上解析：不同的微生物需要的營(yíng)養(yǎng)不同， 如自生固氮菌能利用 空氣中的N為氮源，因而培養(yǎng)基中無(wú)需添加氮源，A項(xiàng)錯(cuò)誤；倒平板過(guò)程中不能打開(kāi)培養(yǎng)皿的皿蓋，B項(xiàng)錯(cuò)誤；接種環(huán)經(jīng)火焰上灼燒后，應(yīng)待冷卻后才可以快速挑取菌落，C項(xiàng)錯(cuò)誤；接種后的培養(yǎng)皿是倒置的，所以用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在皿底上，D項(xiàng)正確。答案：D5. 2019 青海平安一中高一期中關(guān)于微生物的培養(yǎng)，下 列說(shuō)法正確的是()A

20、.操作者雙手、接種環(huán)、工作臺(tái)等都需要用適宜的方法滅 菌處理B.制備固體培養(yǎng)基的操作程序?yàn)橛?jì)算、稱(chēng)量、溶化、滅菌、 調(diào)pH倒平板C.待培養(yǎng)基冷卻至室溫后，在酒精燈火焰附近倒平板D.使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理后再丟棄解析：操作者雙手和工作臺(tái)需要進(jìn)行消毒處理，接種環(huán)需要進(jìn)行滅菌，A項(xiàng)錯(cuò)誤；制備固體培養(yǎng)基的操作順序?yàn)橛?jì)算、稱(chēng)量、溶化、調(diào)pH滅菌、倒平板，B項(xiàng)錯(cuò)誤；待培養(yǎng)基冷卻至 50 C 左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板， 冷卻到室溫時(shí)培養(yǎng)基已經(jīng)凝 固，C項(xiàng)錯(cuò)誤；使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理后再丟 棄，以防止雜菌污染環(huán)境，D項(xiàng)正確。答案：D二、非選擇題6. 2019 浙江高考模擬回答與

21、微生物培養(yǎng)及應(yīng)用有關(guān)的 問(wèn)題：(1)微生物培養(yǎng)中使用試管時(shí)，試管口通常用封口膜封口或 塞有棉花塞，其作用有兩個(gè)，一個(gè)是,另一個(gè)是(2)同一種菌液用血球計(jì)數(shù)板和平板菌落計(jì)數(shù)法同時(shí)計(jì)數(shù)， 所得結(jié)果不一樣，一般血球計(jì)數(shù)法要比平板計(jì)數(shù)法的數(shù)值，原因是(3)下圖是探究抗生素對(duì)某些試驗(yàn)菌的影響的實(shí)驗(yàn)，由該實(shí)驗(yàn)的結(jié)果可以得出這些試驗(yàn)菌中 菌種對(duì)抗生素抗性最強(qiáng)。一段時(shí)間后抑菌帶內(nèi)又長(zhǎng)出少數(shù)菌落，其原因是 出兩點(diǎn)即可)接種試粉菌培養(yǎng)后的結(jié)果抗生素杭曲譜試蕤解析：(1)微生物培養(yǎng)時(shí)必須嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，防止雜菌 污染培養(yǎng)物，使用試管時(shí)，試管口通常用封口膜封口或塞有棉花 塞，其作用有兩個(gè)，一個(gè)是通氣，另一個(gè)是防止雜

22、菌污染。(2)血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法是用顯微鏡鏡檢，對(duì)計(jì)數(shù)室內(nèi)的菌計(jì)數(shù)時(shí)， 分不清死活，同一種菌液若用血球計(jì)數(shù)板和平板菌落計(jì)數(shù)法同時(shí)計(jì) 數(shù)，所得結(jié)果不一樣，主要是因?yàn)檠蛴?jì)數(shù)板計(jì)數(shù)無(wú)論死活都會(huì) 被記錄上，平板計(jì)數(shù)法只能計(jì)數(shù)活的， 因此一般血球計(jì)數(shù)法要比 平板計(jì)數(shù)法的數(shù)值大。(3)培養(yǎng)后，試驗(yàn)菌C產(chǎn)生的透明圈最大， 說(shuō)明這些試驗(yàn)菌中，試驗(yàn)菌C對(duì)抗生素抗性最強(qiáng)，一段時(shí)間后抑 菌帶內(nèi)又長(zhǎng)出少數(shù)菌落，其原因可能是：該菌產(chǎn)生抗性突變，可 以分解抑菌物質(zhì)；落入了雜菌，抑菌物質(zhì)不能抑制雜菌的生長(zhǎng)等。答案：(1)通氣 防止雜菌污染(2)大血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)無(wú)論死活都會(huì)被記錄上，平板計(jì)數(shù) 法只能計(jì)數(shù)活的(3)試驗(yàn)菌C該菌

23、產(chǎn)生抗性突變，可以分解抑菌物質(zhì)；落入了雜菌，抑菌物質(zhì)不能抑制雜菌的生長(zhǎng)；抑菌物質(zhì)失效7. 2019 平遙縣第二中學(xué)高二月考下圖甲、乙是微生物 接種時(shí)常用的兩種方法，請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題：接種操作為什么一定要在火焰附近進(jìn)行？(2)圖甲是利用 法進(jìn)行微生物接種，圖乙是利用法進(jìn)行微生物接種。這兩種方法所用的接種工 具分別是和;對(duì)這兩種接種工具進(jìn)行滅菌和消毒的方法依次是和酒精消毒。(3) 圖乙還可用于 , 依據(jù)是(4)如圖是采用上述接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解，其接 種方法是(填圖甲或圖乙)。解析：(1)由于在酒精燈火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域，因此接 種操作常在火焰附近進(jìn)行。(2)圖甲和圖乙分別是平板劃線法和

24、稀釋涂布平板法，這兩種方法所用的接種工具分別是接種環(huán)和涂 布器；對(duì)接種環(huán)和涂布器都可以用灼燒滅菌法進(jìn)行滅菌處理。(3)稀釋涂布平板法除了可以用于分離菌種，還可以用于菌種的計(jì) 數(shù)，因?yàn)橐粋€(gè)菌落來(lái)源于樣液中的一個(gè)活菌，因此可以根據(jù)菌落的數(shù)量進(jìn)行計(jì)數(shù)。(4)識(shí)圖分析可知，圖中采用的是稀釋涂布平 板法進(jìn)行的接種，故接種方法是圖乙。答案：(1)火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域(2)平板劃線稀釋涂布平板接種環(huán)涂布器灼燒滅菌 (3)活菌計(jì)數(shù)一個(gè)菌落來(lái)源于樣液中的一個(gè)活菌(4)圖乙8 .某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí) 驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察、計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問(wèn)題。

25、(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白陳、淀粉分別為細(xì)菌的培養(yǎng)提供了和。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是 口 O(2)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是(3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水 樣品的平板置于 中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在 37 C。要 使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種 作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(4)培養(yǎng)20 h后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落， 這說(shuō)明湖水樣品中有 種細(xì)菌。一般來(lái)說(shuō)，菌落總數(shù)越多， 湖水遭受細(xì)菌污染的程度越。解析：用于培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中，一般含有微生物所需要的碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等成分，碳源、氮源一般分別由糖類(lèi) 和蛋白質(zhì)所提供。對(duì)培養(yǎng)基常

26、用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。 在檢測(cè)湖水中細(xì)菌的污染情況時(shí)，應(yīng)設(shè)置對(duì)照，才能得出可靠的結(jié)果。答案：(1)氮源碳源無(wú)機(jī)鹽水(2)高壓蒸汽滅菌(3)恒溫培養(yǎng)箱無(wú)菌水(4)多Wj9 .消毒和滅菌是兩個(gè)不同的概念，滅菌是指徹底殺滅微生 物使其永遠(yuǎn)喪失生長(zhǎng)繁殖的能力。消毒僅指殺死一部分對(duì)人體有害的病原菌而對(duì)被消毒的物體基本無(wú)害。(1)下列哪些事物適用于消毒處理()皮膚飲用水牛奶注射器培養(yǎng)皿接種環(huán)培養(yǎng)基果汁醬油手術(shù)刀A.B .C.D .以上全部(2)如圖是利用 法進(jìn)行大腸桿菌接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。為達(dá)到這一目的，操作上應(yīng)注意：每次劃線前要;冷卻后從上一區(qū)劃線 開(kāi)始劃；首尾區(qū)。（3

27、）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。 對(duì)固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是 2觀察培養(yǎng)基上是 否有菌落產(chǎn)生。解析：（1）消毒指用比較溫和的方法殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞， 適用于那些不耐高溫的液體，如牛奶、果汁、醬油，這樣 可以使其中的營(yíng)養(yǎng)成分不被破壞；另外對(duì)要求不是很?chē)?yán)格的皮膚、飲用水也用消毒的方法處理；而對(duì)于嚴(yán)格要求的注射器、 培養(yǎng)皿、接種環(huán)、培養(yǎng)基、手術(shù)刀等必須進(jìn)行滅菌處理， 所以，應(yīng)該用消毒的方法處理，A項(xiàng)正確。（2）如圖是利用平板劃線法進(jìn)行大腸桿菌接種，把聚集的菌種逐步稀釋分 散到培養(yǎng)基的表面。為達(dá)到這一目的，操作上應(yīng)注意：每次劃 線前要灼燒接種環(huán)；冷卻后從上一區(qū)劃線末端開(kāi)始劃線

28、；首尾區(qū)不連接。（3）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是 否被污染。對(duì)固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基 在適宜的溫度下放置適當(dāng)時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。答案：（1）A（2）平板劃線 灼燒接種環(huán) 末端 不連接（不重疊）（3）將未接種（接種等量無(wú)菌水）的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放 置適當(dāng)時(shí)間10 . 2019 云南高考模擬某培養(yǎng)基可用于分離土壤中特定 的微生物，其成分見(jiàn)表。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：葡萄 糖K2HPOKSONaClCaCOMgSO- 7H2O蒸儲(chǔ)水10 g0.2 g0.2 g0.2 g5 g0.2 g1 000 mL(1)該培養(yǎng)基能為微生物提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是 。在該培養(yǎng)基

29、和牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基上接種等量稀釋的土壤浸出液，若牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基上的菌落數(shù),則說(shuō)明該培養(yǎng)基具有選擇作用。(2)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是,實(shí)驗(yàn) 室中常使用 (設(shè)備)對(duì)培養(yǎng)基滅菌。為了獲得單 個(gè)的菌落弁計(jì)數(shù)，應(yīng)在該培養(yǎng)基中加入 弁采用法接種。(3)恰當(dāng)?shù)南♂尪仁怯?jì)數(shù)成功的關(guān)鍵，若樣品濃度過(guò)高，會(huì) 出現(xiàn)的問(wèn)題是 p某同學(xué)將不同稀釋度的菌液均取N毫升，分別接種在多個(gè)平面上， 進(jìn)行適宜條件 的培養(yǎng)，待菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)記錄結(jié)果， 得到M倍稀釋度的三個(gè)平 板菌落數(shù)分別為32、42和52,則每升菌液中的細(xì)菌數(shù)為 個(gè)。解析：(1)微生物培養(yǎng)基的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、氮源、水 和無(wú)機(jī)鹽，有的還需要特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如：生長(zhǎng)因子等。據(jù)表 分析可知，該培養(yǎng)基缺少氮源，在該培養(yǎng)基和牛肉膏蛋白陳培養(yǎng) 基上接種等量稀釋的土壤浸出液， 牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基上的菌落 數(shù)較多，說(shuō)明了該培養(yǎng)基確實(shí)有選擇作用。(2)獲得微生物純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是無(wú)菌操作，防止雜菌