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文檔簡介

1、TF : 轉(zhuǎn)錄因子 HnRNA :核不均一RNATn :轉(zhuǎn)座子Intron:內(nèi)含子TIC:轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物LacZ: -半乳糖苷酶基因ZZF :鋅指結(jié)構(gòu)CAP : CRP:Exon : 外顯子ORF :開放閱讀框(可讀框)Ribozyme : 核酶snRNA :condon :密碼子Nls :核定位序列PCR:聚合酶鏈式反應(yīng) promoter:啟動子 Trp :色氨酸bZIP :堿性-亮氨酸拉鏈Enhancer :增強子UTR :非翻譯區(qū)CTD :Operon :操縱子HTH :螺旋-轉(zhuǎn)折-螺旋TBP :TATA結(jié)合蛋白HLH:螺旋-環(huán)-螺旋 : 轉(zhuǎn)錄起始因子step-loop : 莖-環(huán)結(jié)構(gòu)S

2、hine-Dalgarno sequence:SD序列 Operator:操縱元件cAMP:環(huán)腺苷酸fMet:甲酰甲硫氨酸SSB:單鏈結(jié)合蛋白Klenow: 克列諾片段CDNA:互補DNAGF:名詞解釋1.半保留復(fù)制:DNA在復(fù)制過程中,每條鏈分別作為模板合成新鏈,產(chǎn)生互補的兩條鏈。這樣新形成的兩個DNA分子與原來DNA分子的堿基順序完全一樣。因此,每個子代分子的一條鏈來自親代DNA,另一條鏈則是新合成的,這種復(fù)制方式被稱為DNA的半保留復(fù)制。2.轉(zhuǎn)座子:是指存在于染色體DNA上可自主復(fù)制和位移的基本單位,分為插入序列和復(fù)合式轉(zhuǎn)座子兩類。3.C值反?,F(xiàn)象:是指C值往往與種系進化的復(fù)雜程度不一致

3、,某些低等生物具有較大的C值,也稱C值謬誤。4.啟動子:是一段位于結(jié)構(gòu)基因5端上游區(qū)的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之與模板DNA準確地相結(jié)合并具有轉(zhuǎn)錄起始的特異性。5.斷裂基因:指基因的編碼序列在DNA分子上不是連續(xù)排列的,而是被不編碼的序列所隔開。6. RNA編輯(editing):指轉(zhuǎn)錄后的RNA在編碼區(qū)發(fā)生堿基的加入,丟失或轉(zhuǎn)換等現(xiàn)象。7.遺傳密碼: DNA(或mRNA)中的核苷酸序列與蛋白質(zhì)中氨基酸序列之間的對應(yīng)關(guān)系稱為遺傳密碼。8.無義突變:結(jié)構(gòu)基因中某個核苷酸的改變可能產(chǎn)生終止密碼子(UAG、UGA、UAA),使蛋白質(zhì)合成提前終止,合成無功能的或無意義的多肽,這種突變稱為無義

4、突變。9.分子伴侶:這是一類在細胞內(nèi)能幫助新生肽鏈正確折疊與裝配組裝成為成熟蛋白質(zhì),但其本身并不構(gòu)成被介導的蛋白質(zhì)組成部分的一類蛋白因子,在原核生物和真核生物中廣泛存在。10. 弱化子:是指原核生物操縱子中能顯著減弱甚至終止轉(zhuǎn)錄作用的一段核苷酸序列,該區(qū)域能形成不同的二級結(jié)構(gòu),利用原核生物轉(zhuǎn)錄與翻譯的偶聯(lián)機制對轉(zhuǎn)錄進行調(diào)節(jié)。11. 選擇性剪接:同一基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物由于不同的剪接方式形成不同mRNA的過程稱為選擇性剪接。12.探針(probe):指能與特定靶分子發(fā)生特異性相互作用,并能被特殊方法所檢測的分子。 13.多核糖體:多個核糖體在一個信使核糖核酸(mRNA)分子上串成的顆粒體。信使核糖核酸

5、在核糖體中有一段裸露的序列。每個核糖體可以獨立完成一條肽鏈的合成。14. 不對稱轉(zhuǎn)錄:DNA鏈是有極性的,RNA聚合酶以不對稱的方式與啟動子結(jié)合,使得轉(zhuǎn)錄只能沿著一個方向進行。對一個基因而言,互補鏈中只有一條鏈被轉(zhuǎn)錄成RNA.15.信號肽:在起始密碼子之后,有一段編碼疏水性氨基酸序列的RNA區(qū)域,被稱為信號肽序列,他負責把蛋白質(zhì)引導到細胞內(nèi)不同膜結(jié)構(gòu)的亞細胞器中。16回文序列:具有反向重復(fù)的DNA序列。通常是DNA結(jié)合蛋白的識別部位,也是限制性核酸內(nèi)切酶識別位點的序列特征。17.內(nèi)含子:構(gòu)成斷裂基因的DNA序列基因中不編碼的間隔序列稱為內(nèi)含子,內(nèi)含子是從信使RNA中消失的區(qū)域。18.阻遏蛋白:

6、與操縱元件結(jié)合后能減弱或阻止所調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控蛋白19.強終止子:內(nèi)在終止子,又稱為不依賴于因子的終止。20.增強子:能強化轉(zhuǎn)錄起始的序列為增強子或強化子(enhancer)。21.端粒酶:一種自身攜帶模板的逆轉(zhuǎn)錄酶,由RNA和蛋白質(zhì)組成,RNA組分中含有一段短的模板序列與端粒DNA的重復(fù)序列互補,而其蛋白質(zhì)組分具有逆轉(zhuǎn)錄酶活性,以RNA為模板催化端粒DNA的合成,將其加到端粒的3端,以維持端粒長度及功能。22.A型DNA:DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的一種構(gòu)象。相鄰堿基對之間相距0.27nm,在75%相對濕度條件下,DNA分子每匝螺旋有11個堿基對,堿基平面與螺旋成20角23.Klenow片段(克列諾

7、片段,Klenow fragment,或稱克列諾酶,Klenow enzyme): DNA聚合酶I經(jīng)胰蛋白酶或枯草桿菌蛋白酶部分水解生成的C末端605個氨基酸殘基片段。該片段保留了DNA聚合酶I的5-3聚合酶和3-5外切酶活性,但缺少完整酶的5-3外切酶活性。24.安慰性誘導物:指的是與轉(zhuǎn)錄調(diào)控中實際誘導物相似的一類高效誘導物,但不是該誘導酶的底物。25.轉(zhuǎn)錄元件: 指在同一條核酸鏈上,起調(diào)控基因表達作用的核酸序列。26. 轉(zhuǎn)錄泡: 是RNA聚合酶結(jié)合在啟動子上以后,使啟動子附近的雙鏈解旋并解鏈所形成的結(jié)構(gòu)既轉(zhuǎn)錄泡,它是以促使底物核糖核苷酸與模板的堿基配對。27通用型轉(zhuǎn)錄因子:作為轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合

8、物組分的轉(zhuǎn)錄因子。28輔助遏物:能夠結(jié)合或者激活轉(zhuǎn)錄阻遏物,從而阻礙基因的轉(zhuǎn)錄和抑制蛋白質(zhì)合成的物質(zhì)。29. 下游啟動子:RNA聚合酶識別的啟動子,常位于起始轉(zhuǎn)錄點的下游。問答1、染色體DNA復(fù)制過程中通常具有的共同特征有哪些?復(fù)制過程為半保留方式;形成復(fù)制叉結(jié)構(gòu);復(fù)制起點具有特殊結(jié)構(gòu);原核生物單點起始,真核生物多點起始,復(fù)制方向多為雙向,也有單向;復(fù)制方式呈多樣性,(直線型、Q型、滾動環(huán)型等);新鏈合成需要引物,引物RNA長度般為幾個10個核苷酸,新鏈合成方向53,與模板鏈反向,堿基互補;復(fù)制為半不連續(xù)的,以解決復(fù)制過程中,兩條不同極性的鏈同時延伸問題,即條鏈可按53方向連續(xù)合成稱為前導鏈,

9、另一條鏈先按53方向合成許多不連續(xù)的岡崎片段(原核生物一般長1000-2000個核苷酸,真核生物一般長100-200個核苷酸),再通過連接酶連接成完整鏈,稱后隨鏈,且前導鏈與后隨鏈合成速度不完全致,前者快,后者慢;復(fù)制終止時,需切除前導鏈、岡崎片段的全部引物,填補空缺,連接成完整DNA鏈;復(fù)制的高度忠實性。修復(fù)和校正DNA復(fù)制過程出現(xiàn)的損傷和錯誤,以確保DNA復(fù)制的精確性。2、核小體是如何組裝的?兩對H3、H4組成四聚體首先與組成核小體的DNA中段120bp相結(jié)合,隨后兩個H2A、H2B二聚體分別與其上下級的DNA結(jié)合,形成完整的核小體核心,146bp長的DNA以左手方式環(huán)繞組蛋白八聚體1.7

10、5圈,DNA在核心兩端各延伸10bp。一分子H1與核小體結(jié)合,使進出核小體核心兩端的DNA區(qū)域緊密靠攏而穩(wěn)定。3.DNA修復(fù)的主要類型有哪些?(1)直接修復(fù);(2)切除修復(fù);(3)雙鏈斷裂修復(fù);(4)重組修復(fù);(5)SOS修復(fù)。4、簡述遺傳密碼具有哪些特征?遺傳密碼具有以下特點:1、方向性:密碼子的閱讀方向從5到3。2、簡并性:在密碼子表中,除Met、Trp各對應(yīng)一個密碼外,其余氨基酸均有兩個以上的密碼,對保持生物遺傳的穩(wěn)定性具有重要意義。3、密碼的通用性,但也有例外。地球上的一切生物都使用同一套遺傳密碼,但個別例外,如某些哺乳動物線粒體中的UGA不是終止密碼而是色氨酸密碼子。4、讀碼的連續(xù)性

11、:從起始密碼始到終止密碼止,需連續(xù)閱讀,不可中斷。增加或刪除某個核苷酸會發(fā)生移碼突變。無標點符號且相鄰密碼子互不重疊。5、有起始密碼子和終止密碼子 :64組密碼子中,AUG 和GUG既是Met和Val的密碼子,又是起始密碼子;有三組密碼不編碼任何氨基酸,而是多肽鏈合成的終止密碼子:UAG、UAA、UGA。6、變偶性:密碼的專一性主要由頭兩位堿基決定,第三位堿基重要性不大,因此在與反密碼子的相互作用中具有一定的靈活性。5、真核生物轉(zhuǎn)錄調(diào)控的原理?答: 不同DNA轉(zhuǎn)錄元件與相應(yīng)的轉(zhuǎn)錄因子的相互作用,以及不同轉(zhuǎn)錄因子之間的相互作用是真核基因復(fù)雜的轉(zhuǎn)錄調(diào)控的基本機制.6、原核生物基因表達調(diào)控的特點?調(diào)

12、控主要以操縱子為轉(zhuǎn)錄單位進行將功能相關(guān)的基因組織在一起,同時開啟或關(guān)閉基因表達即經(jīng)濟有效有保證其生命的需要。調(diào)控主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄水平上,有正調(diào)控和負調(diào)控兩種類型。轉(zhuǎn)錄于翻譯在時空上相藕聯(lián)。7、因子是如何作用的?RNA Pol轉(zhuǎn)錄DNA 因子附著到RNA識別位點上 因子跟在RNAPol 后沿RNA移動 RNA Pol在終止位點停下,并被因子追上 在轉(zhuǎn)錄泡中因子 使DNA-RNA雜種雙鏈解開 轉(zhuǎn)錄終止,釋放出 RNA Pol,因子和 RNA 8、增強子的作用特點? 位于轉(zhuǎn)錄起始位點上游能強化轉(zhuǎn)錄起始的序列稱為增強子或強化子(enhancer)。又稱遠上游序列(far upstream seguenc

13、e)其特點是: 增強效應(yīng)十分明顯,一般能使基因轉(zhuǎn)錄頻率增加10-200倍 增強效應(yīng)與其位置和取向無關(guān),不論增強子以什么方向排列(53或35),甚至和靶基因相距3kb,或在靶基因下游,均表現(xiàn)出增強效應(yīng);大多為重復(fù)序列,一般長約50bp,適合與某些蛋白因子結(jié)合。其內(nèi)部常含有一個核心序列:(G)TGGA/TA/TA/T(G),該序列是產(chǎn)生增強效應(yīng)時所必需的; 增強效應(yīng)有嚴密的組織和細胞特異性,說明增強子只有與特定的蛋白質(zhì)(轉(zhuǎn)錄因子)相互作用才能發(fā)揮其功能 沒有基因?qū)R恍?,可以在不同的基因組合上表現(xiàn)增強效應(yīng) 許多增強子還受外部信號的調(diào)控,如金屬硫蛋白的基因啟動區(qū)上游所帶的增強子,就可以對環(huán)境中的鋅、鎘

14、濃度做出反應(yīng)。9、什么是SD序列?SD序列的作用是什么?答:位于mRNA起始密碼子上游815bp部位的49bp的一致序列富含嘌呤堿基。作用:能與小亞基16s rRNA的3端反向互補。10、大腸桿菌轉(zhuǎn)有哪兩種類型的終止子結(jié)構(gòu)特點是什么。終止子包括:強終止子,弱終止子強終止子:內(nèi)在終止子,又稱為不依賴于因子的終止。 強終止子的結(jié)構(gòu)特點:(1) 有回文結(jié)構(gòu)存在;(2)莖的區(qū)域富內(nèi)含G-C;(3) 強終止子3端上有6個U;弱終止子 :需要因子,又稱為依賴性終止子。因子通過催化NTP的水解促使新生RNA鏈從三元轉(zhuǎn)錄復(fù)合物中解離。4種核苷酸組成的64個密碼子中,其中61個是編碼氨基酸的密碼子,有三組密碼不

15、編碼任何氨基酸,是多肽鏈合成的終止密碼子:UAG、UAA、UGA。不能與tRNA的反密碼子配對,但能被終止因子或釋放因子識別,終止肽鏈的合成。11、什么是啟動子,啟動子的作用與功能,共有序列是什么是指能被RNA聚合酶識別、結(jié)合并啟動基因轉(zhuǎn)錄的一段DNA序列。(1)-10序列- Pribnow盒:TATAAT;(2)-35bp序列:TTGACA操縱子至少有一個啟動子,一般在第一個結(jié)構(gòu)基因5上游,控制整個結(jié)構(gòu)基因群的轉(zhuǎn)錄?,F(xiàn)已證實大部分啟動子都存在這兩段共同序列,即位于10 bp處的TATA區(qū)和35 bp處的TTGACA區(qū),它們是RNA聚合酶與啟動子的結(jié)合位點。1)10 bp功能是:RNA pol

16、緊密結(jié)合; 形成開放啟動復(fù)合體;使RNA pol定向轉(zhuǎn)錄。2)35 bp處的TTGACA區(qū)其功能是:為RNA pol的識別位點。亞基識別-35序列,為轉(zhuǎn)錄選擇模板-35和-10序列的距離是穩(wěn)定的,此與RNA pol的結(jié)構(gòu)有關(guān)。12、簡述因子的作用1.因子的作用是負責模板鏈的選擇和轉(zhuǎn)錄的起始,它是酶的別構(gòu)效應(yīng)物,使酶專一性識別模板上的啟動子。核心酶在T7噬菌體DNA上約有1300個結(jié)合位點,平均結(jié)合常數(shù)為21011。2.因子可以極大地提高RNA聚合酶對啟動子區(qū)DNA序列的親和力,酶底結(jié)合常數(shù)提高103倍,酶底復(fù)合物的半衰期可達數(shù)小時甚至數(shù)十小時。3.因子還能使RNA聚合酶與模板DNA上非特異性位

17、點的結(jié)合常數(shù)降低104倍,使酶底復(fù)合物的半衰期小于1秒。13、原核生物DNA復(fù)制過程?1、在復(fù)制起始點OriC上,旋轉(zhuǎn)酶作用下,DnaA蛋白首先結(jié)合于49bp的重復(fù)序列處,其次DnaB蛋白(解旋酶)在DnaC蛋白的協(xié)助下與313bp的重復(fù)序列(富含A-T)結(jié)合并解鏈,促使SSB蛋白和DnaG蛋白(引物酶)結(jié)合,并開始合成引物RNA2、在DNA聚合酶III的作用下半不連續(xù)地合成前導鏈和后隨鏈3、在DNA聚合酶I的作用下切除RNA引物并用一段DNA填補此空缺4、在DNA連接酶的作用下,將DNA片段連接成完整的DNA鏈5、在拓樸異構(gòu)酶作用下使套在一起的兩個雙鏈環(huán)狀DNA分子分離成游離的兩個雙鏈環(huán)狀D

18、NA分子。 14、原核生物蛋白質(zhì)合成的過程? 1、氨基酸的活化:即在特異氨酰-tRNA合成酶的作用下,消耗ATP并經(jīng)aa-AMP中間產(chǎn)物(含酸酐鍵),將氨基酸活化為相應(yīng)的氨酰-tRNA(含酯鍵);2、多肽鏈合成的起始:即在起始因子IF-3、IF-2及IF-1的協(xié)助下,消耗GTP,依次形成三元復(fù)合物(IF-330SmRNA)、30S前起始復(fù)合物(IF-230SmRNAfMet-tRNAMet)、70S起始復(fù)合物(30SmRNAfMet-tRNAMet50S),此時fMet-tRNAMet占據(jù)P位,而A位暫為空位;3、多肽鏈合成的延伸:即在EF-T、肽酰轉(zhuǎn)移酶和EF-G等的作用下,依次進行:(1)

19、、進位:即EF-T作用下,新的氨酰-tRNA進入A位,該步需GTP及Mg2+的參與;(2)、肽鍵形成:即在肽酰轉(zhuǎn)移酶的作用下,將P位上氨基酸(或肽鏈的羧基末端氨基酸)上的-COOH移至A位處與A位上氨基酸的-NH2形成肽鍵,空載tRNA留在P位,此步反應(yīng)需要Mg2+和K+的存在;(3)、移位:即在EF-G的作用下,消耗GTP,核糖體便沿mRNA鏈(5到3)移動一個密碼子的距離,使原留在P位上的空載tRNA移到E位并由此脫落,原來處于A位上的肽酰-tRNA被轉(zhuǎn)移到P位,空出A位,如此循環(huán)下去,直到A位上出現(xiàn)終止密碼子;4、多肽鏈合成的終止:即當A位上出現(xiàn)終止密碼子時,RF-1或RF-2在RF-3

20、的協(xié)助下,識別并與終止密碼子結(jié)合,停止多肽鏈的延伸,與此同時使肽酰轉(zhuǎn)移酶發(fā)生變構(gòu),酶的活性從轉(zhuǎn)肽作用改變?yōu)樗庾饔?,從而使多肽鏈得以釋放出來,最后翻譯機器全部分離;5、新生多肽鏈的加工:因為加工后才能成為有活性的蛋白質(zhì)。(1)、在分子伴侶的協(xié)助下,新生肽鏈進行折疊;(2)、新生多肽鏈的加工與修飾;(3)、亞單位的聚合。15、乳糖操縱子結(jié)構(gòu)模型主要內(nèi)容?Z、Y、A基因的產(chǎn)物由同一條多順反子的mRNA.該mRNA分子的啟動區(qū)(P)位于阻遏基因(I)與操縱區(qū)(O)之間,不能單獨起始半乳糖苷酶和透過酶基因的高效表達。操縱區(qū)是DNA上的一小段序列(僅為26bp),是阻遏物的結(jié)合位點。當阻遏物與操縱區(qū)相結(jié)

21、合時,lac mRNA的轉(zhuǎn)錄起始受到抑制。誘導物通過與阻遏物結(jié)合,改變它的三維構(gòu)象,使之不能與操縱區(qū)相結(jié)合,從而激發(fā)lac mRNA的合成。(令)簡述乳糖操縱子的調(diào)控答:1、負調(diào)控:當無乳糖時,阻遏蛋白與操縱基因結(jié)合,RNA聚合酶不能結(jié)合啟動子或從啟動子上解離,轉(zhuǎn)錄不能進行(基因關(guān)閉);當有乳糖時,則相反。2、正調(diào)控:當無葡萄糖時,cAMP水平升高,cAMP-CRP復(fù)合物結(jié)合CRP位點,促進RNA聚合酶結(jié)合啟動子,轉(zhuǎn)錄能進行(基因打開);當有葡萄糖時,則相反。16、細胞內(nèi)DNA復(fù)制的高度忠實性是如何通過多種因素實現(xiàn)的? 1、堿基互補配對原則:這使DNA聚合酶能夠正確地選擇dNTP底物;2、DN

22、A聚合酶的自我校正功能:3 5外切酶活性;3、RNA引物的作用:DNA聚合酶實施“自我校正”功能,必須利用引物鏈來檢驗3端的堿基配對正確與否,在驗明正身和確認無誤之后才開始合成,但引物短序列合成時錯配率高且不易校正,采用RNA而不是DNA作引物,即使有錯配也無妨,因為以后DNA聚合酶I可去除RNA引物并用正確短DNA片段來填補,從而避免致死突變的發(fā)生;4、DNA聚合酶催化DNA鏈按5 3方向延伸的反應(yīng)機制:如果DNA聚合酶按35方向合成DNA,那就必須在延長中的DNA鏈的5末端保留有活性的三磷酸基團以驅(qū)動下一個dNTP的3-OH與之反應(yīng),但若出現(xiàn)了錯配而將其校對水解下來,5端就僅剩下一個磷酸基

23、團了,要繼續(xù)鏈的延長合成,能量將從何而來?否則就不要進行校對或另備一套使5端重新磷酸化的酶系統(tǒng),因此對于隨時校正在DNA復(fù)制中出現(xiàn)的錯配而言,dNTP加到引物鏈的3端要比加在5端經(jīng)濟方便和有效;5、幾種校正和修復(fù)系統(tǒng):如錯配校正系統(tǒng)切除存在于新合成的DNA鏈中錯配的核苷酸。17、簡述色氨酸的衰減(弱化)調(diào)控?(1)培養(yǎng)基中色氨酸濃度低,負載有色氨酸的tRNATrp就少,翻譯通過兩個相鄰色氨酸密碼子的速度就慢,當4區(qū)被轉(zhuǎn)錄完成時,核糖體才進行到1區(qū)(或停留在兩個相鄰的trp密碼子處),前導區(qū)2-3配對,不形成3-4配對的終止結(jié)構(gòu),轉(zhuǎn)錄繼續(xù)進行。(2)培養(yǎng)基中色氨酸濃度高,核糖體順利通過兩個相鄰的色氨酸密碼子,在4區(qū)被轉(zhuǎn)錄之前,核糖體就到達2區(qū),使得2-3不能配對,3-4區(qū)自由配對形成莖-環(huán)狀終止子結(jié)構(gòu),轉(zhuǎn)錄停止。所以,弱化子

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