1、血型blood group即血液的遺傳學差別。人類的血型包括紅細胞血型，白細胞血型及血清血型。屬于血型血清學的研討范圍。血型血清學是用免疫學的實際和方法來研討血型的一門科學。紅細胞的遺傳學差別稱為紅細胞血型。血型物質系紅細胞外表抗原。一、概念運用 : 1.法醫(yī)學個體識別和親子鑒定 2.臨床輸血，器官移植及人類 學研討特征： 個體特異性；終身不變案例一： 母 親 孩 子 可疑父親 B 型 A 型 O 型 討論：能否否認可疑父親是孩子的親生父親？二、 紅細胞血型的發(fā)現歷史許多世紀以來，醫(yī)生們不斷在探求用輸血來治療某些疾病。1875年，Landsteiner發(fā)現，將一個種族的動物紅細胞與另一個種族的

2、動物血清混合，發(fā)生了紅細胞凝集景象。1900 Landsteiner A、B、O1902 Decastello、Sturli AB Blood group Antigen in erythrocyte Antibody in serum A A Anti-B B B Anti-A AB A and B O Anti-A and Anti-B人類血型系一致覽 血型系統(tǒng) 發(fā)現年代 血型系統(tǒng) 發(fā)現年代 ABO 1901 MN 1927 P 1927 Rh 1939 Lutheran 1945 Kell 1946 Lewis 1946 Duffy 1950 Kidd 1951 Diego 1955 r

3、t 1956 I 1956 Xg 1962 Donbrock 1965 Colton 1967 UI 1968 EN 1969 Ahonen 1972 OK 1987 LKE 1987三、紅細胞血型的命名一 抗原的命名 1.用大寫字母命名，如 A B M 2.用大小寫字母命名，如 K k 與 S s 3.有些亞型抗原用右下角碼表示，如A1 A2 4.有些血型抗原用一大一小兩個字母后加右上角碼 命名，如Lea Leb 5.有些血型抗原在頭兩個字母后加數字表示，如 SC1 SC2 二 抗體的命名 普通在抗原前加“抗與半字線，如抗A； 有些紅細胞抗體以最先從血清中查出該抗 體的患者的名字命名，如Ke

4、ll三 基因及基因型的命名 普通用斜體表示，如ABH四、紅細胞血型抗原抗原抗原(Antigen 能與能與TCR/BCR結合，啟動免疫應對產生抗體結合，啟動免疫應對產生抗體 或效應淋巴細胞，并能與相應免疫應對產物發(fā)生或效應淋巴細胞，并能與相應免疫應對產物發(fā)生特異性結合的物質。特異性結合的物質?？乖奶卣骺乖奶卣?免疫原性免疫原性(immunogenicity) 刺激機體產生抗體刺激機體產生抗體或致敏淋巴細胞的才干?；蛑旅袅馨图毎牟鸥?。 抗原性抗原性(antigenicity) / 免疫反響性免疫反響性(immunoreactivity) 抗原可以與其所誘生的抗抗原可以與其所誘生的抗體或致敏淋

5、巴細胞特異性結合的才干體或致敏淋巴細胞特異性結合的才干 ?？乖膬煞N根本特性抗原的兩種根本特性 1.1.免疫原性免疫原性(immunogenecity) (immunogenecity) 指抗原指抗原分子可以刺激機體產生免疫應對分子可以刺激機體產生免疫應對( (產生特產生特異性抗體及免疫效應細胞異性抗體及免疫效應細胞) )的性質。的性質。 1. 1.完全抗原完全抗原complete antigen) complete antigen) 具有免疫原性和抗原性的物質。具有免疫原性和抗原性的物質。 2.2.半抗原半抗原h(huán)aptenhapten，又稱不完全，又稱不完全抗原抗原incomplete an

6、tigen incomplete antigen 無免疫無免疫原性，只需抗原性的物質。原性，只需抗原性的物質。 3.3.載體載體carriercarrier 賦予半抗原賦予半抗原以免疫原性的蛋白質。以免疫原性的蛋白質。 半抗原半抗原 + + 蛋白質蛋白質 完全抗原完全抗原完全抗原與半抗原一紅細胞血型抗原分類紅細胞血型抗原根據化學構造可分為3類 類 型 型 特 異 性 決 定 族 例 糖 脂 質 寡 糖 ABH P 膜內蛋白 蛋白質 Rh Kell 糖 蛋 白 蛋白質 寡糖 MN Ss紅細胞膜構成：50的蛋白質 40的脂質 缺乏10的糖 多為側鏈 抗原決議族 紅細胞膜抗原二紅細胞血型抗原的分布大

7、部分紅細胞血型抗原位于紅細胞膜上ABH抗原除了位于紅細胞膜上以外，還廣泛分布于人體組織，體液及分泌液中 Lewis抗原原始存在于人血漿中，后被吸附到紅細胞膜上三紅細胞血型抗原引起 免 疫 反 應1、 原發(fā)性免疫反響 當機體第一次暴露于外來抗原時，抗體產生慢，量少，維持時間短，稱為原發(fā)性免疫反響，亦稱初次應對。 原發(fā)性免疫反響產生的抗體大多是IgM2、繼發(fā)性免疫反響 當抗體下降期再次以同樣的抗原免疫機體，那么產生大量的抗體，稱為繼發(fā)性免疫反響，亦稱再次應對。3、 免疫反響的個體差別 機體對外來抗原刺激所發(fā)生的免疫反響受遺傳控制 人類染色體上有特異性免疫反響基因，能控制機體對不同抗原發(fā)生免疫反響三

8、 紅細胞血型與疾病的關聯 ABO血型不合可以引起輸血反響，新生兒溶血及移植排斥反響 Kell與慢性肉芽腫性疾病有關 Rhnull與Rhmod血型與遺傳性裂口紅細胞溶血性貧血有關 五、紅細胞血型抗體 免疫球蛋白Immunoglobulin ，Ig是指具有抗體活性或化學構造與抗體類似的球蛋白 抗體Antibody, Ab 是B細胞識別抗原后增 殖分化為槳細胞所產生的一種蛋白質，主要存在于血清等體液中，能與相應抗原特異性地結合，具有免疫功能 一 免疫球蛋白的根本構造 四肽鏈構造 一切Ig的根本單位都是四條肽鏈的 對稱構造。兩條重鏈H 和兩條輕鏈L 。每條重鏈 和輕鏈分為氨基端和羧基端。 氨基端氨基端

9、羧基端羧基端 可變區(qū) 根據氨基酸陳列順序的不同分 為可變區(qū) V 和恒定區(qū) C 比較不同 抗體 V區(qū)的氨基酸序列， 發(fā)現VH 和V L 各有3 個區(qū)域的氨 基酸組成和和陳列順序特別易變 化，這些區(qū)域稱為高變區(qū) 。 三個 高變區(qū)共 同組成 Ig抗原結合部位， 該部位也稱為 互 補性決議區(qū) 恒定區(qū) 重鏈和輕鏈的 C區(qū)分別稱為 CH 和 CL ，不同類 Ig的重鏈 CH 長度不 一，同一種屬動物中，同一類別Ig 分子 C區(qū)氨基酸的組成和陳列順序比較恒 定。 鉸鏈區(qū) 位于CH1與CH2 之間，含有豐富的 脯氨酸，因此易伸展彎曲，而且易被木瓜蛋白酶 ，胃蛋白酶等水解。 二免疫球蛋白的功能區(qū)功能區(qū)的作用有：

10、 VH 和 VL是結合抗原的部位； CH和 CL 上具有部分同種異型的遺傳標志； IgG的CH2 和IgM的 CH3 具有補體 C1q 結合位點，可啟動補體活化經典途徑； IgG 可經過胎盤； IgG、 IgA、 IgM、 IgD、 IgE 人類Ig 根據其重鏈穩(wěn)定區(qū)的分子構造和抗原特異性的不同，分為五類：三 紅細胞血型抗體分類 分為天然抗體與免疫抗體兩類 1、 天然抗體 未曾與有關的抗原接觸過的抗體稱為天 然抗體。又稱為規(guī)那么抗體。 這類抗體大部分是IgM，最適反響溫度 為40c200c，可在鹽水介質與紅細胞 發(fā)生凝集反響，故又稱為完全抗體或寒 冷抗體。 植物凝集素也屬于天然抗體2、 免疫抗

11、體 抗原刺激機體所產生的抗體。因不經常存在于血清中，故又稱為不規(guī)那么抗體。 此類抗體大部分為IgG，最適反響溫度為370C，需參與其他試劑才干使紅細胞發(fā)生凝集反響，故又稱為不完全抗體或暖和抗體 Antibody of ABO system 天然抗體天然抗體 免疫抗體免疫抗體IgM IgG溫度低時抗體滴度高溫度低時抗體滴度高 溫度升高時溫度升高時 370C 抗體滴度高抗體滴度高容易被可溶性血型物質中和容易被可溶性血型物質中和 只能部分被可溶性血型只能部分被可溶性血型物質中和物質中和分子量分子量 100萬萬 分子量分子量 16萬萬不能經過胎盤不能經過胎盤 能經過胎盤能經過胎盤在鹽水中與相應紅細胞發(fā)

12、生在鹽水中與相應紅細胞發(fā)生 通常在鹽水中不發(fā)生聚通常在鹽水中不發(fā)生聚集，僅在酶集，僅在酶聚集聚集 處置或白蛋白溶液中發(fā)處置或白蛋白溶液中發(fā)生聚集生聚集 六. 紅細胞凝集一 概念 在紅細胞的懸液中參與相對應的抗血清，抗體在細胞抗原決議族之間構成橋梁，使細胞結合成塊，這種景象稱為紅細胞凝集反響正常情況下，紅細胞膜上富含唾液酸，其N乙酰神經氨酸殘基電離，使紅細胞帶負電荷，因同性相斥而使紅細胞彼此分別，懸浮于介質中，不發(fā)生凝集反響。紅細胞之間的間距約為25nm二 紅細胞動電位構成原理 紅細胞膜外表攜帶的負電荷可吸引介質中的正離 子，在紅細胞周圍構成一正離子團。 由紅細胞外表的負電荷與正離子團外自在正離

13、子間構成的電位差稱為紅細胞的動電位zeta potential 動電位的大小取決于紅細胞外表負電荷的程度與介質中的離子濃度，也決議了紅細胞間距，與凝集反響的發(fā)生有親密關系 三 凝集反響的步驟 1、致敏 抗原與抗體 特異性結合 當介質中參與抗血清時，抗體的特異性結合部位與抗原決議族構造互補，由離子間 相反電荷、氫鍵、離子鍵、疏水鍵等而發(fā)生 結合，即致敏。這種結合是可逆的。 紅細胞紅細胞 凝凝 集集 抗原抗體結合力表示圖抗原抗原抗體抗體氫鍵結合力氫鍵結合力 O ON NO ON NH HH H靜電引力靜電引力- - -+ + +范得華力范得華力- -+ + +- -+ +- - -+ +疏水作用力

14、疏水作用力排斥的水排斥的水抗原抗原-抗體反響受多種要素影響抗體反響受多種要素影響2、凝集反響 結合了抗體的紅細胞構成網 狀團塊 紅細胞被致敏后，可以發(fā)生凝集反響， 也可以不發(fā)生凝集反響。取決于抗體的 特征、抗原決議族的多少與部位、以及 紅細胞動電位的大小?？贵w的分子特征 IgG抗體呈Y或T形，有兩個抗原結合的部位。相距14nm，只能銜接相距14nm的紅細胞。不能使懸浮于鹽水介質中的紅細胞發(fā)生凝集。IgM有十個抗原結合部位，最大間隔約30nm，能使懸浮于鹽水介質中的紅細胞發(fā)生凝集。抗原決議族的數目與部位A抗原與B抗原抗原決議族多，能使正常生理鹽水中的紅細胞發(fā)生凝集。RhD抗原結合部位少，且位于紅

15、細胞膜內，所以不常使紅細胞凝集。Coombs test 紅細胞凝集反響表示圖紅細胞凝集反響表示圖 凝凝 1 天然抗體完全抗體天然抗體完全抗體 IgM 抗人球蛋白抗體抗人球蛋白抗體 2 免疫抗體不完全抗體免疫抗體不完全抗體IgG 完全完全 12不凝不凝七、紅細胞凝集反響的促進要素 1、 減少紅細胞的間距 蛋白水解酶如胰蛋白酶、菠籮蛋白酶等或神經氨酸酶處置紅細胞，裂解紅細胞外表的神經氨酸，減小紅細胞外表的負電荷數量， 到達降低紅細胞的動電位的目的； 在反響體系中參與牛血潔白蛋白，可降低介質中離子的介電常數并中和紅細胞外表的神經氨酸，到達降低紅細胞動電位的目的； 用低離子強度溶液如7% 葡萄糖溶液、

16、 10%蔗糖溶液等作為反 應介質，可以減少紅細胞吸引的陽離子數量，到達降低紅細胞的動電應的目的 2、在抗體間搭橋 運用抗球蛋白實驗法，在含有紅細胞和抗體的反響溶液中參與與抗體對應的第二抗體抗球蛋白抗體，銜接已致敏紅細胞上的抗體，間接使紅細胞構成網狀團塊凝集血血 球球 凝凝 集集 抗人球蛋白實驗又稱Coombs實驗，是檢測不完全抗體的抗原抗體反響的經典方法 直接抗球蛋白實驗 檢測在體內被抗體或補體所致敏的紅細胞，用于診斷自家免疫溶血性貧血，新生兒溶血癥及溶血性輸血反響等。 間接抗球蛋白實驗 檢測紅細胞在體外與抗體的反響，用以測定某 些紅細胞的血型、鑒定不規(guī)那么抗體及作輸血前的配型等。 間接抗球蛋

17、白實驗的原理 待分型檢測的紅細胞與抗血清反響，相應血型抗體使紅細胞致 敏。然后參與抗人球蛋白血清，抗人球蛋白抗體與致敏紅細胞上的血型抗體發(fā)生抗原抗體反響，好像在致敏紅細胞間 搭橋，使紅細胞出 現可見凝集，證明待測紅細胞上具有與抗血型抗體相對應的抗原。陰 性結果那么證明待測紅細胞上沒有與血型抗體相對應的抗原，綜合紅細 胞的反響結果，判別紅細胞的血型。 八、紅細胞血型的生物學功能主要生物學功能：平安輸血和器官移植配型此外，還有以下功能： 1、運送蛋白質 2、細胞因子受體 3、紅細胞酶 4、補體受體 第二節(jié)ABO血型目的要求 1.掌握 ABO血型系統(tǒng)的基因構造與抗原生 成的遺傳途徑2.熟習 ABO血

18、型系統(tǒng)亞型的DNA根底與血 清學特征 3.了解 血型抗原的種類與分類 ABO血型基基因因型型表表現現型型抗抗體體漢漢族族表表現現型型頻頻率率AA、AOA 型型B 抗抗體體0.3131BB、BOB 型型A 抗抗體體0.2806ABAB 型型無無抗抗體體0.0977OO 型型A 抗抗體體和和 B 抗抗體體0.3086ABH抗原的構造 ABH抗原有三種類型： 1水溶性糖蛋白 ：主要存在于人體液、分泌液和組織中，但不見于紅細胞和血清中 2醇溶性糖脂類 ：主要存在于紅細胞及其他組織細胞，但不見于腦組織和體液 3 膜糖蛋白 ：主要是位于細胞膜的離子交換蛋白 -Band3 和葡萄糖轉運蛋白- Band4、5

19、。H物質 H物質生成ABO血型抗原的根底物質 由19 號染色體上 FUT1 基因座編碼的 2 - L -巖藻糖轉移酶 2 FUT1 作用于血型前體物質而產生的 血型前體物質:由多種單糖有順序地銜接而成前體物質分類 型 Gal 1 -3GlcNAc 1 R 型 Gal 1 -4GlcNAc 1 -R 型 Gal 1 -3GalNAc 3 1 -R 型 Gal 1 -3GalNAc 3 1 -R 型 Gal 1 -3Gal 1 -R 型 Gal 1 -4Glc 1 -R 前體物質分布 型、型存在于人類，型純粹是化學合成的型存在于分泌液、血漿及內胚層衍生的組織中，不存在于紅細胞膜上型存在于紅細胞、分

20、泌液和外胚層、中胚層來源組織中 型1A -銜接酯質型位于紅細胞膜；2O或A-連 接粘蛋白型存在分泌液中 型存在于紅細胞膜 型存在于乳汁和尿液中ABH抗原生成的遺傳途徑 人類19號染色體上存在著三個基因座：FUT1H、FUT2SE、 FUT3 FUT1基因座上有兩個等位基因：H和h，組成三種基因型：HH、Hh、hh H基因的編碼產物為： a2-L-巖藻糖轉移酶，催化巖藻糖以a1、2銜接在前體物質糖鏈末端的D半乳糖上，生成H抗原 ABH抗原生成的遺傳途徑 人類第9號染色體上存在著A、B、O三個等位基因 A基因-N-乙酰-D-氨基-半乳糖胺轉移 酶-N-乙酰-D-氨基-半乳糖胺GalNAc轉移至H物

21、質糖鏈末端的D-半乳糖第3個碳原 子上生成A抗原 B基因-D-半乳糖轉移酶-D-半乳糖轉移至H物質糖鏈末端的D-半乳糖第3個 碳原子上而生成B抗原 O基因-無酶活性的蛋白-O型個體沒有糖基轉移酶表達，沒有AB抗原生成，而只需H抗原 ABO血型系統(tǒng)抗原的合成受位于9號染色體長臂(9q34)上的IA，IB，Io三個等位基因控制。 IA和IB為共顯性、 Io為隱性基因，由此構成6種基因型和四種表型.ABH抗原生成的遺傳途徑紅細胞膜上紅細胞膜上ABHABH抗原的生物合成抗原的生物合成 H H基因基因 a-L-a-L-巖藻糖轉移酶巖藻糖轉移酶 半乳糖半乳糖+ +乙?；咸前芬阴；咸前?H H物質物質

22、前體物質前體物質 IAIA基因基因 IBIB基因基因 a-N-a-N-乙酰半乳糖胺轉移酶乙酰半乳糖胺轉移酶 a-D-a-D-半乳糖轉移酶半乳糖轉移酶 N-N-乙酰半乳糖胺乙酰半乳糖胺 半乳糖半乳糖 A A抗原抗原 B B抗原抗原 R R R OA B ABO血型的抗原構造血型的抗原構造 1,31,31,21,21,31,31,31,31,31,21,3ABH抗原生成的遺傳途徑O等位基由于無功能基因，不能編碼轉移酶，產生H物質后不能進一步產生其他抗原，故O型紅細胞上只需H抗原純合子hh個體不能產生H物質，即使有A、B、O基因也不能表達，紅細胞上無A、B、H抗原ABO血型系統(tǒng)的分子根底ABO血型系

23、統(tǒng)的分子根底ABO基因座位于人類第九號染色體上，全長約18Kb，有七個外顯子A與B之間有七個單堿基不同，其中四個核苷酸對第176位、235位、266位及268位氨基酸置換擔任ABO血型系統(tǒng)的分子根底O與A序列一樣，區(qū)別在于O基因G261缺失，閱讀框移位，終止密碼提早出現，編碼截短蛋白如今將O基因命名為O1基因，除了O1外還有兩個等位基因： O1v及O2， O1v是O1變異體A基因包括A1及A2兩個等位基因ABO血型系統(tǒng)的分子根底ABO基因很復雜，不同群體A1基因不完全一樣有些不常見的ABO基因編碼A及B亞型抗原。ABO基因序列與其他基因部分序列結合組成雜種基因，影響親子鑒定ABO血型的表型與基

24、因型 紅細胞 血清中抗體 糖基轉移酶基因型 表型AA AO A 抗B 3-N-乙酰-D-氨基半乳糖轉移酶BB BO B 抗A 3-D-半乳糖轉移酶 AA AB _ 3-N-乙酰-D-氨基半乳糖轉移酶 和3-D-半乳糖轉移酶 OO O 抗A和抗B _ABO血型的亞型及變異型Subgroup of ABO system亞型指屬于同一血型抗原，但抗原構造亞型指屬于同一血型抗原，但抗原構造和性能或抗原位點有一定差別所引起的和性能或抗原位點有一定差別所引起的變化。變化。ABO血型的亞型及變異型一A亞型 主要有A1，A2 兩種亞型； A1比A2多4倍 A1型的紅細胞有A及A1兩種抗原，A2型的紅細胞只需A

25、抗原 A1與A2型兩種抗原有量和質的區(qū)別。 量的區(qū)別：A1型紅細胞上的A抗原位點比A2 型紅細胞多2/3至3/4，而H活性那么較A2型弱。 A2型紅細胞能從B型血清中吸收抗A，遺留抗A1ABO血型的亞型及變異型質的區(qū)別：A2型能對A1抗原刺激產生抗A1，證明A2型紅細胞上缺乏A1型紅細胞的抗原決議族；A1型與A2型抗原分別受ABO基因座上的A1與A2基因控制A1與A2基因是ABO基因座上的稀有基因，按孟德爾定律遺傳ABO血型的亞型及變異型 A的弱亞型：比A2亞型還弱；其特征是隨著紅 細胞上A抗原位點數目的減少，抗 原性逐漸減弱，H活性相應地增 強。 弱A亞型包括A3、Ax、Am、Ay、Ael等

26、，其紅細胞上的H物質量正常，或多于正常ABO血型的亞型及變異型二B亞型 發(fā)現了B3，Bm,Bel等弱B亞型三Cis-AB型 Cis-AB型是指A與B基因同在一條染色體上以基因符合物的方式遺傳的一種稀有ABO血型，其基因型是AB/OCis-AB型Cis-AB型的血清學特點： 1. Cis-AB型的紅細胞與抗A及抗B血清 反響很弱，與抗H試劑的反響較強 2. Cis-AB型的A抗原表達比A2B型的A2抗原 強，比A1B型的A1抗原弱 3. Cis-AB型的B抗原弱，像B3或By Cis-AB型4. Cis-AB型血清中含有弱抗B5.分泌型個體唾液中有少量的B物質，H物質量多Cis-AB型的產生的緣

27、由： 1. A、B基因不等互換 2. ABO基因發(fā)生單堿基錯義突變獲得性B 抗原 是指A型個體檢測出B型活性的景象 1A型個體，血清中有正常的抗B抗體；2獲得性B 抗原的抗原性很弱 3分泌型個體體液中有正常量的A與H物質；而不含B物質 4常發(fā)生于患癌癥或感染性疾病患者，特別是 多 見于結腸癌與直腸癌患者； 5獲得性B是一過性的，程度隨病情變化而變 化。獲得性B 抗原發(fā)活力制尚在探求中，能夠為： 1.大腸埃希菌O86與其他細菌的純化脂多糖及蛋白質脂多糖可被吸附到A型和O型紅細胞上，后者獲得了B樣抗原，此種獲得性B稱為“過路人抗原型 2.細菌等微生物的脫乙酰酶將A抗原特異性單糖N乙酰半乳糖胺轉變?yōu)?/p>

28、半乳糖，后者很像B型抗原決議族的半乳糖，此種獲得性B稱為“脫乙酰酶型ABO抗體一、天然抗體 1、抗A與抗B抗體 其產生能夠是某些細菌外表具有與人類紅細胞上ABH抗原性類似的糖基團，在生命早期，機體針對這些抗原刺激而產生的抗體，能與A、B、H抗原發(fā)生交叉反響 天然抗A與抗B抗體主要是IgMABO抗體O型與B型血清中的抗A有兩類，即抗A與抗A1抗A可以與A1及A2型紅細胞發(fā)生反響，而抗A1只與A1型紅細胞反響ABO抗體2、抗A，B抗體 O型血清中除了含有抗A和抗B外，還含有一種既能與A細胞反響，也能與B細胞反響的抗體，稱為抗A，B，又稱為交叉反響抗體 O型血清中的抗A，B比單獨的抗A或抗B活性強，

29、常用來檢查A與B的弱亞型 抗A，B大多屬于IgGABO抗體3、抗H抗體 分為兩類：一類產生于Oh型，另一類以冷 凝集素的方式存在于A1型或A1B型的血清 中 Oh型紅細胞上缺乏H抗原 由于O、A、B或AB型紅細胞均含有H成分 ，故血清中很少有抗H的存在ABO抗體二、免疫抗體 抗A及抗B可以是免疫抗體，多為IgG 其產生可以是：1.輸ABO血型不相容的血液 2.母嬰ABO血型不相容，尤 其是O型母親懷A或B型胎 兒 3.注射純化了的A或B物質ABO抗體三、本身抗體 很少見，可以引起本身免疫溶血性貧血、致命溶血及腎衰四、器官移植產生的抗體 是移植供者的器官的同時也移植了其淋巴網 狀組織，將供者的抗

30、體帶入了受者體內 ABO血型表現型的測定1.Principle：紅細胞血型抗原與相應抗體特異：紅細胞血型抗原與相應抗體特異性結合，可發(fā)生凝集反響。性結合，可發(fā)生凝集反響。2.Method2.Method：正向定型：用知抗體特異性的血清檢查紅細胞的正向定型：用知抗體特異性的血清檢查紅細胞的抗原抗原反向定型：用知血型的紅細胞檢查血清中的抗體反向定型：用知血型的紅細胞檢查血清中的抗體ABO血型血清學分型方法 正定型試驗反定型試驗 型別判定 抗A 抗B A-RBC B-RBC O A B ABABO血型表現型的測定弱A及弱B抗原的測定，除了用抗A、抗B等血清外，還運用抗A，B及抗H等抗血清，并測分泌型

31、唾液中的ABH物質ABO血型 DNA分型方法PCR- RFLP PCR - DGCE SSCP Maldi -TOF 質譜分析 Sequencing H抗原缺失型一紅細胞上H抗原完全缺失，非分泌型孟買型。用Oh表示 典型的孟買型紅細胞無A，B，H抗原，血清中含有抗A，抗B及抗H。 機制：FUT1基因錯義突變及FUT2基因缺失1952年在印度孟買發(fā)現一種特殊的血型這種紅細胞既無A抗原和B抗原，也無H抗原。他們的基因型為hh，不能產生H物質，即使有IA和(或)IB基因，也不能構成A抗原或(和)B抗原但IA IB基因可向后代遺傳，這種特殊的型,稱為孟買型H抗原缺失型二紅細胞部分H抗原缺乏副孟買型 紅

32、細胞H抗原部分缺失是FUT1基因座突變基因純合子的產物，這種基因只產生活性弱的H轉移酶，全部轉為A或B抗原三)紅細胞無或有少量H抗原分泌型 機制復雜：能夠涉及第三基因座分泌型和非分泌型 分泌形狀受一對等位基因Se與se控制。 純合子SeSe與雜合子Sese均分泌ABH物質到分泌液中，稱為ABH分泌型； 純合子sese不分泌ABH至分泌液中，稱為ABH非分泌型。分泌型和非分泌型一、分泌型 O分泌型唾液中只含H物質；A分泌型中含A與H物質；B型分泌液中含B與H物質；AB型中含ABH物質 分泌型中均分泌H物質到唾液中。換言之，只需唾液中查到H物質者均屬于分泌型分泌型和非分泌型 人類19號染色體上存在

33、著三個基因座：FUT1H、FUT2SE、 FUT3 SE基因編碼：2 - L -巖藻糖分泌型轉移酶，產生H抗原，存在于體液及分泌液中 H基因編碼：2 - L -巖藻糖轉移酶 2 FUT1 ，作用于血型前體物質生成H抗原 分泌型和非分泌型二、非分泌型 se基由于隱性基因，不能編碼2 - L -巖藻糖分泌型轉移酶，故不能作用于分泌腺細胞產生ABH物質雙構造基因雙構造基因是指第19 號染色體兩個嚴密連 鎖的基因座 FUT1 H和 FUT2 Se FUT1 FUT2 產物 2- L- FUT 2- FUT 底物 型糖鏈 I型糖鏈 作用 產生 H物質 只作用于分泌腺細胞 基因型和表型FUT1基因座 H

34、h HH Hh hh H H 無H FUT2基因座 Se se SeSe Sese sese 分泌型 非分泌型 ABO血型的發(fā)育血型的發(fā)育5-6周胎兒紅細胞已可測出周胎兒紅細胞已可測出ABH抗原，妊娠期間抗原，妊娠期間濃度增長不快。濃度增長不快。新生兒新生兒A、B抗原相當于成人抗原相當于成人25-50%。18個月才干充分表現出抗原性。個月才干充分表現出抗原性。24歲完全發(fā)育成熟，抗原強度終身不歲完全發(fā)育成熟，抗原強度終身不 變變 ABO血型的遺傳血型的遺傳ABO血型系統(tǒng)按孟德爾定律遺傳，子代ABO基因型中，一個基因來自生父，一個基因來自生母，在法科學中可用于處理親子鑒定的問題假設遇基因交融決議

35、的表現型時，很容易得出錯誤的鑒定結論第三節(jié) Lewis血型目的要求 1.掌握 Lewis 血型系統(tǒng)的基因構造與抗原生成的遺傳途徑2.熟習 Lewis 血型系統(tǒng)抗體的特征Lewis血型的發(fā)現歷史 1946年Mourant在一個名叫Lewis的病人血清中首先發(fā)現一種天然抗體，大約與22%的英國人紅細胞發(fā)生反響，被稱為抗-Lea。1948年Andresen發(fā)現了抗-Leb抗體。 這兩種抗體將人類的紅細胞分成四種表現型紅細胞的Lewis表現型紅細胞的Lewis表現型： Le(a+b-) Le(a-b+) Le(a-b-) Le(a+b+)Lewis血型系統(tǒng)的ISBT的命名： 編號 系統(tǒng)名 ISBT標志

36、名 基因名 染色體定位 007 Lewis LE FUT3 19p13.3 Lewis血型特征一、這是一種存在于唾液與血漿中的可溶性抗原，紅細胞獲得Lewis表型是經過從血漿吸附Lewis物質于紅細胞上二、紅細胞Lewis表型受ABH分泌形狀影響， 雖然Lewis基因和分泌基因是獨立遺傳的三、Lewis表型可受ABO表型的影響，即A1可減低Leb以及Lea 唾液中Lewis物質與紅細胞Lewis表現型的關系 凡唾液或血清中含有Lea物質而不含Leb物質者，紅細胞上只需Lea，為Le(a+b-)型； 當唾液中含少量的Lea物質者，含大量的 Leb物質時，紅細胞上只需只需Leb，為Lea-b+型

37、lele純合子不產生Lea與Leb抗原，紅細胞為Lea-b-型 Lewis抗原產生的遺傳途徑 人類19號染色體上存在著三個基因座： FUT1H、FUT2SE、 FUT3LE FUT3LE基因座上有一對等位基因：LE 和le。LE基因編碼4L巖藻糖基轉移酶 le基由于沉默基因。 Lewis抗原產生的遺傳途徑 Lea抗原的產生：由4L巖藻糖基轉移酶催化巖藻糖銜接在型前體物質糖鏈末端的N乙酰葡萄糖胺上而生成 Leb抗原的產生：在H基因編碼產物，SE基因編碼產物共同作用下，由4L巖藻糖基轉移酶催化巖藻糖銜接到H物質上而成 Lewis 抗原構造抗原構造Lewis抗原產生的遺傳途徑當Le基因存在時，產生唾

38、液中的 Lea抗原；當同時又有Se與H基因存在時，那么產生Leb抗原 lele純合子不產生Lea與Leb抗原。Se基因是調理基因，能使分泌細胞中的H基因執(zhí)行功能，與Le基因作用，產生Leb抗原。Lewis抗原產生的遺傳途徑當FUT1基因不表達時，那么是Le(a+b-)型當同時FUT3基因不表達時，那么產生Lea-b-型Lewis抗體 抗Lea與抗Leb兩種奇異的抗體，多存在于Lea-b-型血清中Lewis抗體能在40C與紅細胞鹽水懸液發(fā)生凝集反響，像完全冰冷抗體IgMLewis抗體能結合補體，如用含補體的新穎血清，在370C反響可產生溶血，這種抗體又像不完全抗體IgGLewis抗體有些Lewi

39、s抗體只需抗球蛋白實驗才干測出來，酶能加強反響。Le(a-b+)型很少產生抗Lea，由于這種人的唾液及血清中含Lea物質。產生抗Lea的Lea-b-型都是分泌型抗Leb是一種弱抗體，產生抗Leb個體是非分泌型Lewis抗體Lewis抗體很少引起溶血性輸血反響。緣由能夠是： Lewis抗體在370C時無活性； 供者血漿中含有Lewis抗原，可以中和受者血中的Lewis抗體 由于Lea抗原和Leb抗原是由血漿中吸附而來，故輸入Lea型或Leb型血液時，吸附在紅細胞外表的Lea或Leb抗原被放散到受者血中，紅細胞不被受者血液中的抗體所凝集Lewis抗體大多數Lewis抗體是IgM，能結合補體，不能通

40、過胎盤，加之新生兒Lewis抗原的抗原性很弱，所以Lewis血型系統(tǒng)不會涉及新生兒溶血癥Lewis抗原的發(fā)育新生兒紅細胞與抗Lea及抗Leb血清的反響比較弱或不反響，能夠是Lewis基因不活潑，血漿中的Lewis物質含量較少之故嬰幼兒Lea的抗原頻率比Leb高，且發(fā)育也較Leb抗原快。Lewis抗原的發(fā)育在Le(a+b-)型向成人Le(a-b+)發(fā)育過程中，有時會出現一過性的Le(a+b+)型，闡明Leb抗原系由Lea抗原轉變而來。六歲以前作Lewis血型測定結果不可靠，由于不能反映孩子成人后Lewis表現型Rh血型的發(fā)現歷史 Landsteiner在在1940年做動物實驗時，發(fā)現恒年做動物實

41、驗時，發(fā)現恒河猴和多數人體內的紅細胞上存在河猴和多數人體內的紅細胞上存在Rh血型的血型的抗原物質，故而命名的。抗原物質，故而命名的。 凡是人體血液紅細胞上有凡是人體血液紅細胞上有Rh抗原又稱抗原又稱D抗抗原的，稱為原的，稱為Rh陽性，而缺乏陽性，而缺乏Rh抗原的人抗原的人是是Rh陰性。陰性。Rh血型的抗原性強度能夠僅次于血型的抗原性強度能夠僅次于A及及B抗原抗原目前曾經發(fā)現的目前曾經發(fā)現的Rh抗原曾經超越抗原曾經超越48個個在在Rh抗原中以抗原中以D抗原為最強抗原為最強,以下依次以下依次E、 C、c、e純合子比雜合子抗原強度強純合子比雜合子抗原強度強臨床上將含有臨床上將含有D抗原的紅細胞稱為抗

42、原的紅細胞稱為Rh陽性，不陽性，不含含D抗原的為抗原的為Rh陰性陰性|RhRh抗原抗原: :有有4040多種多種, ,其中其中D,C,E,c,eD,C,E,c,e五種關系親密五種關系親密|人體中無天然抗人體中無天然抗D D凝集素凝集素, ,由后天刺激產生由后天刺激產生|臨床意義：臨床意義：1.1.再次輸血時產生溶血反響再次輸血時產生溶血反響| 2. 2.再次妊娠時發(fā)生死胎再次妊娠時發(fā)生死胎|每次輸血時，都必需做血交叉實驗每次輸血時，都必需做血交叉實驗| 有四種命名法 Wiener命名法； Fisher-Race命名法 Rosenfield數字命名法 ISBT數字命名法 ISBT數字命名法：D、

43、C、E、c、e抗原分 別為RH1、RH2、RH3、RH4、 RH5 Rh抗原 由 2個RhAG 和2 個RH蛋白分子構成四聚體，約 170kD RHD 蛋白30kD) 表達 D 抗原 RHCE蛋白30kD 同時表達CcEe四種抗原 N 端前41個氨基酸完全一樣；僅31 位和35 位氨基酸不同 ； 抗原表位完全不同 ； 均跨膜 12 次，構成6 個細胞外環(huán) ； 均無任何糖側鏈 控制控制Rh抗原的基因定位于抗原的基因定位于lp36.2-p34。研討。研討闡明闡明,Rh基因座位由二個相關的構造基因基因座位由二個相關的構造基因RHD和和RHCE組成。組成。RHD和和RHCE基因都有基因都有10個外個外

44、顯子組成顯子組成,長度為長度為75kb。Rh基因組構造遺傳控制：受控于1號染色體短臂上D和CE位點。D基因的產物為D抗原。CE基因的產物為C、c、E、e抗原，它們是同一構造基因的產物，但在轉錄過程中有1-2個外顯子不同。假設D位點上一對等位基因均發(fā)生突變或缺失，那么為Rh(-)，其他為Rh(+)。Rh血型系統(tǒng)的復合抗原血型系統(tǒng)的復合抗原RHCE基因可以編碼ce、Ce、CE及cE四種復合抗原；編碼復合抗原的復合基因必需是以順式位于同一條染色體上復合抗體只能與具有相對應的復合抗原的紅細胞發(fā)生反響復合抗原的法醫(yī)學意義為利用復合抗體可以推測Rh血型的基因型Rh單倍型、基因型和表現型基因復合物DCe、d

45、ce、DcE、Dce、dcE、dCe、DCE、dDE這八種單倍型，可以組成36種基因型，18種表現型D抗原及其變異型(一)D+型除ABO血型以外，臨床上最重要的是RhD抗原。 RhD抗原性很強，可以引起溶血性輸血反響、新生兒溶血癥、及本身免疫溶血性貧血RhD抗原的頻率很高，歐洲與北美白種人為82%88%，亞洲人為99%，遠東某些地域為100%不同抗原有質的區(qū)別和量的差別?？乖康淖兓憩F為抗原性的強弱：型的抗原量最多，抗原性最強；弱抗原量較少，抗原性較弱；el抗原量最少，抗原性最弱二型型的遺傳背景不都一樣歐洲白種人是RHD基因缺失非洲黑人型是完全非活化RHD，這種非活化的RHD基因稱為RHD假

46、基因三三DU (弱弱D：是：是D抗原量的減少，而非質的變抗原量的減少，而非質的變化；具有化；具有D抗原一切的表位，抗原一切的表位，但表達很弱；由但表達很弱；由RHD基因發(fā)生突基因發(fā)生突變，變，D蛋白跨膜區(qū)與細胞膜內區(qū)氨基蛋白跨膜區(qū)與細胞膜內區(qū)氨基酸發(fā)生置換而產生酸發(fā)生置換而產生 四不完全抗原是指抗原某些表位缺失，其他表位正常，血中產生同種抗抗體，是蛋白細胞膜外環(huán)發(fā)生了改動的結果Rh抗原缺失型抗原缺失型 一、一、D- 只需只需D抗原，缺乏抗原，缺乏C、c、E、e抗原?？乖?。其其D抗原活性強，能與不完全抗抗原活性強，能與不完全抗D抗體在鹽水抗體在鹽水中反響中反響緣由：有完好的緣由：有完好的RHD基因和基因和RHCE基因，基因，但但RHCE基因非活化或發(fā)生剪切