1、會(huì)計(jì)學(xué)14/19/20222影響藥物的質(zhì)量反映出生產(chǎn)或貯藏過(guò)程中存在的問(wèn)題。對(duì)藥物所含雜質(zhì)進(jìn)行檢查既可保證藥品質(zhì)量和用藥的安全、有效，同時(shí)也為生產(chǎn)、流通過(guò)程的質(zhì)量保證和企業(yè)管理的考核提供依據(jù)。雜質(zhì)的存在導(dǎo)致的問(wèn)題：第1頁(yè)/共68頁(yè)4/19/20223概述 藥物的純度要求 雜質(zhì)的來(lái)源和種類 雜質(zhì)的限量檢查一般雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)檢查第2頁(yè)/共68頁(yè)4/19/20224第一節(jié) 概 述藥物的純度指藥物的純凈程度雜質(zhì)檢查也稱純度檢查一、藥物的純度要求一、藥物的純度要求1. 藥物純度藥物純度：是反映藥品質(zhì)量的一項(xiàng)重要指標(biāo)。雜質(zhì)超標(biāo)的后果：外觀性狀物理常數(shù)藥物的穩(wěn)定性活性降低，毒副作用增加第3頁(yè)/共68頁(yè)4/

2、19/20225如：ASA中除了SA外，還存在乙酰水楊酸酐、乙酰水楊酰水楊酸等SA的衍生物，具有致敏作用。OCCH3C O COOOH3CCOOOCOOHCOOCOCH3OHCOOHOCOCH3COOHASA SA其它示例見(jiàn)教材P38阿司匹林第4頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202262. 對(duì)藥物純度的認(rèn)識(shí)是在防治疾病的實(shí)踐中積累起來(lái)的，隨著分離檢測(cè)技術(shù)的提高，能進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)藥物中存在的新雜質(zhì)，從而加強(qiáng)對(duì)藥品生產(chǎn)工藝過(guò)程的控制，不斷提高藥物的純度要求對(duì)藥物純度的認(rèn)識(shí)是在防治疾病的實(shí)踐中積累起來(lái)的，隨著分離檢測(cè)技術(shù)的提高，能進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)藥物中存在的新雜質(zhì)，從而加強(qiáng)對(duì)藥品生產(chǎn)工藝過(guò)程的控制，不斷提高藥物的純度

3、要求，使之，使之不斷改進(jìn)不斷改進(jìn)，更加完善。，更加完善。如：鹽酸罌粟堿的特殊雜質(zhì)檢查ChP 1985，目視比色法檢查嗎啡ChP 1990，改為：薄層色譜法檢查有關(guān)物質(zhì)。原因：薄層或紅外發(fā)現(xiàn)，合成法生產(chǎn)的鹽酸罌粟堿中除了嗎啡，還有一未知物質(zhì)。ChP 2010，又改為：HPLC法檢查有關(guān)物質(zhì)。第5頁(yè)/共68頁(yè)4/19/20227OCH3HClNCH3OONCH3OCH3HClOCH3HClONC2H5再如：鹽酸哌替啶，即度冷丁()1948年收入BP，1970年經(jīng)GC分離鑒定出兩種無(wú)效雜質(zhì)()和()，有時(shí)高達(dá)20%30%。產(chǎn)生原因：工藝條件控制不當(dāng)ChP 2010：HPLC法檢查有關(guān)物質(zhì)。第6頁(yè)/共

4、68頁(yè)4/19/20228第7頁(yè)/共68頁(yè)4/19/20229質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中藥物的檢查項(xiàng)下包括：a 雜質(zhì)檢查b 有效性指與藥物療效有關(guān)的一些指標(biāo)。如：氫氧化鋁的制酸力，藥用碳的吸著力等c 安全性異常毒性，熱原，降壓物質(zhì)，無(wú)菌試驗(yàn)等d 藥物制劑要求重量差異，崩解時(shí)限，含量均勻度等第8頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202210第9頁(yè)/共68頁(yè)4/19/2022111 1雜質(zhì)的雜質(zhì)的來(lái)源來(lái)源：生產(chǎn)過(guò)程中引入生產(chǎn)過(guò)程中引入 貯藏過(guò)程中產(chǎn)生貯藏過(guò)程中產(chǎn)生2 2 依雜質(zhì)來(lái)源依雜質(zhì)來(lái)源分類分類：一般雜質(zhì)：一般雜質(zhì) 特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì) 工藝雜質(zhì)，降解產(chǎn)物，反應(yīng)物工藝雜質(zhì)，降解產(chǎn)物，反應(yīng)物 及試劑中混入的雜質(zhì)等及試劑中混入的

5、雜質(zhì)等 依雜質(zhì)毒性依雜質(zhì)毒性分類分類：信號(hào)雜質(zhì)：信號(hào)雜質(zhì) 毒性雜質(zhì)毒性雜質(zhì) 依雜質(zhì)理化性質(zhì)依雜質(zhì)理化性質(zhì)分類分類: :有機(jī)雜質(zhì)有機(jī)雜質(zhì) 無(wú)機(jī)雜質(zhì)無(wú)機(jī)雜質(zhì) 殘留溶劑殘留溶劑二、雜質(zhì)的來(lái)源與種類二、雜質(zhì)的來(lái)源與種類對(duì)于規(guī)定中的各種雜質(zhì)檢查項(xiàng)目，系指該藥品在既定工藝進(jìn)行生產(chǎn)和對(duì)于規(guī)定中的各種雜質(zhì)檢查項(xiàng)目，系指該藥品在既定工藝進(jìn)行生產(chǎn)和正常貯藏過(guò)程中可能含有或產(chǎn)生并控制的雜質(zhì)正常貯藏過(guò)程中可能含有或產(chǎn)生并控制的雜質(zhì)(如殘留溶劑、有關(guān)物質(zhì)如殘留溶劑、有關(guān)物質(zhì)等等)；改變生產(chǎn)工藝時(shí)需另考慮增修訂有關(guān)項(xiàng)目。；改變生產(chǎn)工藝時(shí)需另考慮增修訂有關(guān)項(xiàng)目。藥典凡例第藥典凡例第17條條第10頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202

6、212原料、中間體、副產(chǎn)物、無(wú)效異構(gòu)體或晶型、試劑、溶劑、制劑中新產(chǎn)生的雜質(zhì)等A + B C D + E原料原料中間產(chǎn)物中間產(chǎn)物副產(chǎn)物副產(chǎn)物產(chǎn)品產(chǎn)品試劑試劑溶劑溶劑催化劑催化劑金屬容器、管道、裝置金屬容器、管道、裝置異構(gòu)體多晶型異構(gòu)體多晶型做做制劑時(shí)用的輔料，新產(chǎn)生的雜質(zhì)等制劑時(shí)用的輔料，新產(chǎn)生的雜質(zhì)等第11頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202213+NNCH3OClCH3OH(CH2)6N4 HClClNCOCH3COCH2ClC6H12ClCH2COClClNHCH3COC2H5OHFe, HClCH3SO4-ONClCH3CH3C6H5(CH3)2SO4ONCl地西泮地西泮（安定）（安定）3-苯

7、苯-5-氯嗯呢氯嗯呢天然產(chǎn)物提?。禾烊划a(chǎn)物提?。?結(jié)構(gòu)相似、性質(zhì)相近結(jié)構(gòu)相似、性質(zhì)相近教材教材P39：碳酸酐酶抑制藥雙氯非那胺：碳酸酐酶抑制藥雙氯非那胺檢查：乙醇溶液的澄清度和顏色；氯化物；有關(guān)物質(zhì)等檢查：乙醇溶液的澄清度和顏色；氯化物；有關(guān)物質(zhì)等檢查：堿性溶液的澄清度；氯化物；有關(guān)物質(zhì)等檢查：堿性溶液的澄清度；氯化物；有關(guān)物質(zhì)等合成過(guò)程中合成過(guò)程中產(chǎn)生的雜質(zhì)：產(chǎn)生的雜質(zhì)：第12頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202214H2NCOCH2CH2N(C2H5)2O.HCl鹽酸普魯卡因注射液，高溫滅菌鹽酸普魯卡因注射液，高溫滅菌H2NCOCH2CH2N(C2H5)2OH2NCOHOHOCH2CH2N(C2H

8、5)2+對(duì)氨基苯甲酸對(duì)氨基苯甲酸做做制劑時(shí)用的輔料，新產(chǎn)生的雜質(zhì)等：制劑時(shí)用的輔料，新產(chǎn)生的雜質(zhì)等：阿司匹林：水楊酸的檢查阿司匹林：水楊酸的檢查教材教材P39：腎上腺素注射液：腎上腺素注射液第13頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202215無(wú)效、低效的異構(gòu)體或晶型：無(wú)效、低效的異構(gòu)體或晶型： 光學(xué)異構(gòu)體（左旋體，右旋體）兩種都有治療作用，但大小不同： 腎上腺素為左旋體，其升壓作用是右旋體的12倍； 鹽酸普萘洛爾左旋異構(gòu)體的- 受體阻斷作用比右旋體大60倍幾何異構(gòu)體（順式體，反式體）維生素A全反式的生物活性最高一種有治療作用，另一種主要產(chǎn)生副作用：氯胺酮，右旋副作用(中樞興奮)；兩種有不同的藥理作用：右旋

9、丙氧吩鎮(zhèn)痛，左旋止咳；兩種都有治療作用，主要副作用由其中一種產(chǎn)生：反應(yīng)停，左旋及其代謝物毒性；第14頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202216無(wú)效、低效的異構(gòu)體或晶型：無(wú)效、低效的異構(gòu)體或晶型： 多晶型(晶型不同，理化常數(shù)，溶解度，穩(wěn)定性，體內(nèi)吸收和療效也不同）無(wú)味氯霉素有多晶現(xiàn)象，B晶型易被酯酶水解而吸收，為有效晶型，而A晶型則不易被酯酶水解，活性很低生產(chǎn)過(guò)程中難以除凈；貯存過(guò)程中受光、熱、濕等影響控制藥物中無(wú)效、低效及具有毒性的異構(gòu)體或晶型，在藥物純控制藥物中無(wú)效、低效及具有毒性的異構(gòu)體或晶型，在藥物純度研究中日益受到重視度研究中日益受到重視第15頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202217嚴(yán)格控制藥品的貯

10、藏條件貯藏條件，是保證臨床用藥安全有效的一個(gè)重要方面。貯藏過(guò)程中：保管不當(dāng)、貯藏時(shí)間過(guò)長(zhǎng)在外界條件(如：濕度、溫度、光、空氣)影響或微生物作用下， 發(fā)生水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)變、聚合、潮解、發(fā)霉等變化，產(chǎn)生有關(guān)雜質(zhì)。后果： 外觀、物理常數(shù)、藥物穩(wěn)定性和質(zhì)量，療效降低甚至失去、產(chǎn)生毒性等。第16頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202218一般雜質(zhì)一般雜質(zhì): 在自然界分布比較廣泛，在多種藥物的在自然界分布比較廣泛，在多種藥物的生產(chǎn)或貯存過(guò)程中容易引入的雜質(zhì)。生產(chǎn)或貯存過(guò)程中容易引入的雜質(zhì)。如：氯化物、硫酸鹽、重金屬、酸堿度、水分、砷鹽、鐵鹽如：氯化物、硫酸鹽、重金屬、酸堿度、水分、砷鹽、鐵鹽.特殊

11、雜質(zhì)特殊雜質(zhì)：在特定藥物的生產(chǎn)和貯存過(guò)程中，因其：在特定藥物的生產(chǎn)和貯存過(guò)程中，因其生產(chǎn)工藝或藥物本身的性質(zhì)可能引入的雜質(zhì)。生產(chǎn)工藝或藥物本身的性質(zhì)可能引入的雜質(zhì)。第17頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202219藥典未規(guī)定的雜質(zhì)：一般不需要檢查。遇特殊情況：需要進(jìn)一步追蹤、檢查。 如：改變了原料、生產(chǎn)方法。新藥研究：要對(duì)純度、穩(wěn)定性進(jìn)行考察。了解可能引入的雜質(zhì)為制訂其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)；盡可能對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行分離，研究其結(jié)構(gòu)和降解機(jī)制，為藥物的生產(chǎn)、貯藏及新的藥物設(shè)計(jì)提供相關(guān)信息藥物的雜質(zhì)檢查也是藥物的雜質(zhì)檢查也是不斷發(fā)展變化的不斷發(fā)展變化的注意注意：藥典中規(guī)定的檢查項(xiàng)目，是指正常生產(chǎn)和儲(chǔ)存中可能產(chǎn)生并需控制

12、的雜質(zhì)。藥典中未規(guī)定檢查的雜質(zhì)，一般有以下幾種情況：正常生產(chǎn)和儲(chǔ)存中不可能引入；含量甚微，對(duì)人體和藥物質(zhì)量無(wú)不良影響；限量要求較寬，現(xiàn)有工藝生產(chǎn)的產(chǎn)品均能達(dá)到；對(duì)雜質(zhì)認(rèn)識(shí)不足，有待于積累資料第18頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202220藥物中雜質(zhì)的限量除考慮雜質(zhì)本身的性質(zhì)雜質(zhì)本身的性質(zhì)(安全性安全性)外，還要結(jié)合實(shí)際的生產(chǎn)水平實(shí)際的生產(chǎn)水平(生產(chǎn)的可行性生產(chǎn)的可行性)，產(chǎn)品的穩(wěn)定性產(chǎn)品的穩(wěn)定性，參考各國(guó)藥典的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)制訂。三、雜質(zhì)的限量三、雜質(zhì)的限量藥物中的雜質(zhì)在不影響療效、不產(chǎn)生毒性、保證藥物質(zhì)量的原則下，允許藥物存在有一定量的雜質(zhì)。這一允許量被稱為雜質(zhì)的限量。即藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量雜質(zhì)的限量

13、：雜質(zhì)的限量：100%量供試雜質(zhì)的最大允許量雜質(zhì)限量品限量表示(g/g)方法 ：%，ppm第19頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202221雜質(zhì)限量控制方法：對(duì)照法：有雜質(zhì)對(duì)照品 取一定量的被檢雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液和一定量的供試品溶液，相同條件下處理，比較反應(yīng)結(jié)果，以確定雜質(zhì)含量是否超過(guò)限量。反應(yīng)靈敏度法：供試液中加入一定量試劑，一定反應(yīng)條件下是否出現(xiàn)正反應(yīng)比較法：取一定量的供試品依法檢查，測(cè)定特定待檢雜質(zhì)的參數(shù)(如吸光度)，與規(guī)定限量比較，不得更大注意注意：平行原則平行原則不出現(xiàn)正反應(yīng)正反應(yīng)為合格限量檢查法限量檢查法(Limit test)：通常不要求測(cè)定其準(zhǔn)確含量，只需檢查雜質(zhì)是否超過(guò)限量定量測(cè)定法定量測(cè)定

14、法后二者示例見(jiàn)：教材 P41第20頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202222：葡萄糖中重金屬檢查取葡萄糖4.0g，加水23ml溶解后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，依法檢查重金屬（中國(guó)藥典，附錄H 第一法），含重金屬不得過(guò)百萬(wàn)分之五。問(wèn)應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液多少ml（每1ml相當(dāng)于10g的Pb）?2ml10100 . 4105CSLV100%SCVL66100%量供試雜質(zhì)的最大允許量雜質(zhì)限量品100%SCVL對(duì)照法雜質(zhì)限量計(jì)算方法：100%供試標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度品量第21頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202223：對(duì)乙酰氨基酚中氯化物檢查取對(duì)乙酰氨基酚(撲熱息痛，解熱鎮(zhèn)痛藥)2.0g，加水100m1，

15、加熱溶解后冷卻，濾過(guò)，取濾液25m1，依法檢查氯化物(中國(guó)藥典，附錄A)，所發(fā)生的渾濁與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液5.0ml(每1ml相當(dāng)于10g的Cl-)制成的對(duì)照液比較，不得更濃。問(wèn)氯化物的限量是多少?%100SVCL%01. 0%100251000 . 2510106注意：注意：u統(tǒng)一單位u求的目的（L？C？V? S? ）u是否稀釋u限量表示方法第22頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202224第二節(jié) 一般雜質(zhì)的檢查方法一般雜質(zhì)的檢查方法在中國(guó)藥典中收載于附錄中，藥典正文中直接引用。氯化物檢查法硫酸鹽檢查法鐵鹽檢查法 硫氰酸鹽法 巰基乙酸法重金屬檢查法 硫代乙酰胺法 硫化鈉法 微孔濾膜法砷鹽檢查法 古蔡氏法

16、二乙基二硫代氨基甲 酸銀法溶液顏色檢查法 目視比色法 分光光度法 色差計(jì)法 易碳化物檢查法溶液澄清度檢查法熾灼殘?jiān)鼨z查法干燥失重測(cè)定法 常壓恒溫干燥法 干燥劑干燥法 減壓干燥法與恒溫減壓干燥法 熱分析法 水分測(cè)定法殘留溶劑測(cè)定法第23頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202225一、氯化物檢查法一、氯化物檢查法1.原理原理：Cl+AgAgCl（白色）硝酸硝酸酸性條件下，微量氯化物與AgNO3溶液反應(yīng)，生成白色渾濁。與一定量標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液在相同條件下生成的渾濁比較，不得更大加硝酸的作用：1）加速AgCl生成，產(chǎn)生較好的乳濁2）避免Ag2CO3, Ag3PO4 , Ag2O等的形成，消除這些陰離子的干擾Cl的

17、濃度： 50-80g/50ml為宜。相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)NaCl 溶液(10g Cl/ml) 5.0-8.0mlH+第24頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202226mlmlml401025水稀硝酸水供試品mlml4010水稀硝酸標(biāo)準(zhǔn)液比較暗處搖勻水min5,500 . 13mlmlAgNO2.方法方法如溶液顯堿性，如溶液顯堿性，可滴加硝酸使成可滴加硝酸使成中性中性溶液如不澄清溶液如不澄清，應(yīng)濾過(guò)，應(yīng)濾過(guò)容器：容器：50ml納氏比色管納氏比色管第25頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202227用含硝酸的蒸餾水洗凈濾紙中Cl至洗液遇AgNO3不產(chǎn)生渾濁，再過(guò)濾供試液兩份供試液1份AgNO3反復(fù)過(guò)濾至澄清標(biāo)準(zhǔn)Cl與水，作為對(duì)照

18、液對(duì)照液1份AgNO3 作為樣品液樣品液比較對(duì)照液與樣品液對(duì)照液與樣品液的渾濁程度3.注意注意氯化物適宜濃度： 50-80g/50ml硝酸酸性：作用 酸度以50ml供試液中含稀硝酸10ml為宜供試液若不澄清供試液若有色，采用內(nèi)消色法解決避光黑色背景下，從上至下觀察第26頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202228Cl的存在狀態(tài)：的存在狀態(tài)：溶于水溶于水的藥物直接測(cè)定不溶于水不溶于水的藥物：加水振搖，過(guò)濾，取濾液檢查；若藥物在稀乙醇或丙酮中有一定溶解度，可加稀乙醇或丙酮溶解后再檢查；也可采用超聲，加熱等方法，使Cl溶解，取濾液或上清夜進(jìn)行檢查有機(jī)氯有機(jī)氯有機(jī)破壞第27頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202229二、

19、硫酸鹽檢查法二、硫酸鹽檢查法1.原理原理：SO42 + Ba2+ BaSO4(白色)標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液（100 g SO42 /ml ）2.方法方法mlml240稀鹽酸水供試品mlml240稀鹽酸水標(biāo)準(zhǔn)液后比較搖勻水min105052%25mlmlBaClH+第28頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202230酸及酸度：加稀鹽酸使成酸性，作用：防止BaCO3,Ba3(PO4)2 形成。但酸度不能過(guò)大，否則會(huì)使硫酸鋇溶解，降低靈敏度。以50ml供試液中含稀鹽酸2ml為宜溶液有色：內(nèi)消色法。藥物不易溶于水：加適量有機(jī)溶劑(如稀乙醇或丙酮)溶解后再檢查3.注意注意黑色背景下，從上至下觀察避光第29頁(yè)/共68頁(yè)4

20、/19/202231三、鐵鹽檢查法三、鐵鹽檢查法1.硫氰酸鹽法硫氰酸鹽法ChP USP為什么要檢查鐵鹽？可能會(huì)加快藥物的氧化和降解(1)原理原理：Fe3+ + 6SCN Fe(SCN)63 （紅色） H+標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液：硫酸鐵銨溶液FeNH4(SO4)2 12H2O (10 g Fe3+ /ml )第30頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202232(2)方法方法ml25水供試品ml25水標(biāo)準(zhǔn)液，搖勻比較水硫氰酸銨水mlmlml5033035mgml504過(guò)硫酸銨稀鹽酸第31頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202233(3)注意注意標(biāo)準(zhǔn)硫酸鐵銨配制時(shí)為防止水解，需加適量硫酸過(guò)硫酸銨的作用：氧化劑，氧化Fe2+ Fe3+

21、 ；防止光線導(dǎo)致的硫氰酸鐵配位離子還原或分解褪色過(guò)量硫氰酸銨的作用：反應(yīng)為可逆反應(yīng)，加過(guò)量硫氰酸銨試劑可增加生成的配位離子的穩(wěn)定性；提高反應(yīng)靈敏度；消除氯化物，PO43，SO42,枸櫞酸根等與鐵鹽形成有色配合物引起的干擾反應(yīng)在HCl酸性中進(jìn)行：可防止Fe水解。 酸度：50ml溶液中含稀鹽酸4mlFe3+的濃度：目視法：10-50g Fe3+ /50ml為宜，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)硫酸鐵銨FeNH4(SO4)2 12H2O 1.0-5.0ml； 若用吸光度比較，則在5-90g Fe3+ /50ml時(shí)，溶液的A與濃度線性關(guān)系良好。第32頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202234供試液與對(duì)照液色調(diào)不一致或呈色淺不易比較

22、：可加正丁醇或異戊醇提取環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物：需經(jīng)熾灼破壞Fe的存在形式：Fe2+無(wú)此反應(yīng)，需加入氧化劑過(guò)硫酸銨或硝酸(需加熱煮沸除去剩余硝酸）氧化Fe2+ Fe3+第33頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202235鐵鹽檢查法（2010年版二部）附錄 G 鐵鹽檢查法 除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品,加水溶解使成25ml，移置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸4ml與過(guò)硫酸銨50mg，用水稀釋使成35ml后，加30硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml, 搖勻；如顯色，立即與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液一定量制成的對(duì)照溶液（取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液，置50ml納氏比色管中，加水使成25ml,加稀鹽酸4ml與

23、過(guò)硫酸銨50mg，用水稀釋使成35ml，加30硫氰酸銨溶液3ml,再加水適量稀釋成50ml，搖勻）比較，即得。 如供試管與對(duì)照管色調(diào)不一致時(shí)，可分別移至分液漏斗中，各加正丁醇20ml提取，俟分層后，將正丁醇層移置50ml納氏比色管中，再用正丁醇稀釋至25ml，比較，即得。 標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液的制備 稱取硫酸鐵銨 FeNH4(SO4)212H2O 0.863g，置1000ml量瓶中，加水溶解后，加硫酸2.5ml，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。 臨用前，精密量取貯備液10ml，置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml相當(dāng)于10g的Fe) 第34頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202236鐵鹽 取

24、熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)?，加鹽酸1ml，置水浴上蒸干，再加稀鹽酸1ml 與水適量，置水浴上加熱，濾過(guò)，坩堝用水洗滌，合并濾液與洗液使成25ml，依法檢查（附錄 G），與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.0ml 用同一方法制成的對(duì)照液比較，不得更深(0.001%) 泛影酸中鐵鹽檢查： 泛影酸泛影酸第35頁(yè)/共68頁(yè)4/19/2022372.巰基醋酸法巰基醋酸法-BP(2) 注意注意 在加巰基醋酸試液前，先加入20%枸櫞酸溶液2 ml，使枸櫞酸與鐵離子形成配位離子，以免在氨堿性溶液中產(chǎn)生氫氧化鐵沉淀(1) 原理原理 巰基醋酸還原Fe3+為Fe2+，在氨堿性試液中巰基醋酸與Fe2+作用生成紅色配位離子。與硫氰酸鹽法比較，

25、較為靈敏，但試劑較貴與硫氰酸鹽法比較，較為靈敏，但試劑較貴第36頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202238四、重金屬檢查法四、重金屬檢查法 重金屬是指在實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉(即與S2-)作用顯色的金屬雜質(zhì)，如銀、鉛、汞、銅、鎘、錫、銻、鉍等。影響藥物的穩(wěn)定性和安全性。藥品生產(chǎn)過(guò)程中遇到鉛的機(jī)會(huì)比較多，鉛在體內(nèi)又易積蓄中毒，故檢查時(shí)以鉛作為代表。 第37頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202239ChP收載3種方法第一法第一法 硫代乙酰胺法第二法第二法 熾灼后的硫代乙酰胺法第三法第三法 硫化鈉法第38頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202240應(yīng)用范圍應(yīng)用范圍：在實(shí)驗(yàn)條件下供試液澄清、無(wú)色，對(duì)檢查無(wú)干擾或經(jīng)處理

26、后對(duì)檢查無(wú)干擾的藥物 一般是溶于水、稀酸、乙醇的藥物原理原理第一法第一法 硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法CH3CSNH2 + H2O CH3CONH2 +H2SH2S + Pb2+ 2H+ + PbS（黃-棕黑色）第39頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202241ml25規(guī)定方法供試品mlmlpH2525 . 3規(guī)定溶劑醋酸鹽緩沖液標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液后比較搖勻，硫代乙酰胺試液min22ml方法方法容器：容器：3支支25ml納氏比色管納氏比色管甲：甲：乙：乙：丙：丙：mlml，pH2525 . 3規(guī)定溶劑醋酸鹽緩沖液液與甲相同量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶與乙相同的溶劑溶解與乙相同量的供試品a、丙管中顯出的顏色不淺于甲管時(shí)，乙管中顯示的

27、顏色與甲管比較，不得更深；b、如丙管中顯出的顏色淺于甲管，應(yīng)取樣按第二法第二法重新檢查。標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液：硝酸鉛溶液。 10g Pb2/ml第40頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202242試品有微量試品有微量Fe3+：在弱酸性溶液中氧化硫化氫析出S產(chǎn)生混濁影響比色，可在甲、乙、丙三管中分別加入相同量的Vc 0.5-1.0g，使Fe3+還原成Fe2+再按上法檢查。注意注意pH3.5醋酸鹽緩沖液醋酸鹽緩沖液本反應(yīng)的pH對(duì)顯色有很大影響，在pH3-3.5時(shí)，PbS較完全。配制供試液(乙管)時(shí)，如使用的鹽酸超過(guò)1ml，氨試液超過(guò)2ml，或加入其他試劑進(jìn)行處理者，除另有規(guī)定外，甲管溶液(對(duì)照液)應(yīng)取同樣同量的試劑置瓷

28、皿中蒸干后，加醋酸鉛緩沖液(pH3.5)2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量，再用水或各品種項(xiàng)下規(guī)定的溶液稀釋成25ml。Pb2適宜比色范圍適宜比色范圍：10-20g/25ml，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液12ml觀察方法觀察方法：白色背景下，從上至下觀察供試液有色時(shí)供試液有色時(shí)：在甲管中滴加少量稀焦糖溶液或其他無(wú)干擾的有色溶液，使之與乙、丙管一致。如仍不能使顏色一致，應(yīng)取樣按第二法第二法檢查。 第41頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202243重金屬 取本品1.0g，加乙醇23ml溶解后，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml，依法檢查（附錄 H第一法），含重金屬不得過(guò)百萬(wàn)分之十 阿司

29、匹林原料藥中的重金屬檢查：第42頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202244第二法第二法 熾灼破壞后硫代乙酰胺法熾灼破壞后硫代乙酰胺法應(yīng)用范圍應(yīng)用范圍：在水、稀酸或乙醇中難溶，及含芳環(huán)或雜環(huán)的有機(jī)藥物原理原理：將供試品熾灼破壞后，殘?jiān)酉跛徇M(jìn)一步破壞，破壞完全后，蒸干，加鹽酸轉(zhuǎn)化為易溶于水的氯化物，再按第一法檢查第43頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202245方法方法：取各品種項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，按熾灼殘?jiān)鼨z查法(附錄 N)進(jìn)行熾灼處理，然后取遺留的殘?jiān)?，或直接取熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)?，供試品若為溶液，取各品種項(xiàng)下規(guī)定量的溶液，蒸發(fā)至干，再按上述方法后處理后取遺留的殘?jiān)?，供試品處理方法：使完全灰化熾灼放冷至氧?/p>

30、氮?dú)怏w除盡后蒸干加硝酸除盡低溫加熱至硫酸放冷緩緩熾灼至完全炭化供試品一定量硫酸C6005005 . 0105 . 0，ml，ml加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸氣除盡氧化氮蒸氣除盡后，放冷第44頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202246對(duì)照液：（乙管）取配制供試液的試劑，置瓷皿中蒸干后，ml2515ml(pH3.5)2ml水標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量水醋酸鹽緩沖液管微熱溶解后入納氏比色mlml，ml25(pH3.5)2ml152水醋酸鹽緩沖液紅色滴加氨試液對(duì)酚酞顯微加水鹽酸管微熱溶解后入納氏比色水浴蒸干供試液（甲管）：后比較搖勻，硫代乙酰胺試液min22ml第45頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202247注意注意：熾

31、灼溫度：500-600，以免溫度過(guò)高造成重金屬損失熾灼殘?jiān)酉跛崽幚砗?，必須蒸干，除盡氧化氮，否則亞硝酸可使H2S氧化，析出S，影響比色消除鹽酸或其它試劑中可能存在的重金屬的影響： 配制供試液時(shí)，使用鹽酸超過(guò)1ml(或與鹽酸1ml相當(dāng)?shù)南←}酸)，使用氨試液超過(guò)2ml，及用硫酸、硝酸進(jìn)行有機(jī)破壞或用其它試劑處理者，除另有規(guī)定外，對(duì)照液應(yīng)取同樣量試劑在瓷皿中蒸干后，依法檢查。含鈉或氟有機(jī)藥物用鉑坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿：消除腐蝕瓷坩堝引入重金屬的可能性觀察方法：白色背景下，從上至下觀察第46頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202248安乃近原料藥中的重金屬檢查：重金屬 取本品1.0g，置石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿

32、中，加硫酸1ml 使?jié)駶?rùn)，緩緩熾灼至硫酸蒸氣除盡，放冷，加硝酸0.5ml ，繼續(xù)熾灼至氧化氮蒸氣除盡后，在500600熾灼使完全灰化，放冷，加鹽酸2ml，置水浴上蒸干，加水15ml使溶解，滴加氨試液至對(duì)酚酞指示液顯中性，再加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水適量使成25ml，依法檢查（附錄 H 第一法），含重金屬不得過(guò)百萬(wàn)分之二十第47頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202249在堿性介質(zhì)中，用硫化鈉作顯色劑，使Pb2+生成PbS，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液以同法處理后所呈顏色比較第三法第三法 硫化鈉法硫化鈉法應(yīng)用范圍應(yīng)用范圍：溶于堿性水溶液，不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物?；前奉?，巴比妥類原理原理：注意

33、注意：方法方法：搖勻溶解后入納氏比色管供試品適量滴硫化鈉試液水試液520ml，5mlaOHN供試液：對(duì)照液：一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛液同法處理硫化鈉臨用新制。原因：硫化鈉對(duì)玻璃有一定腐蝕性，且久置后會(huì)產(chǎn)生絮狀物第48頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202250四種方法的比較：四種方法的比較：顯色劑酸堿度應(yīng)用范圍原理方法注意事項(xiàng)第一法硫代乙酰胺pH3-3.5第二法硫代乙酰胺pH3-3.5第三法硫化鈉堿性第49頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202251五、五、砷鹽（砷鹽（Arsenic）檢查法檢查法古蔡氏法二乙基二硫代氨基甲酸銀法（Ag-DDC）第50頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202252As3+ 3Zn + 3H+ AsH3+

34、3Zn2+AsO33-+ 3Zn + 9H+ AsH3+ 3Zn2+ +3H2OAsH3 + HgBr2 （試紙） 砷斑與2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液同法操作。 砷斑： As(HgBr)3 (黃色)； AsH(HgBr)2(棕色)； As2Hg3 (棕黑色)第一法第一法 古蔡氏法古蔡氏法原理原理:金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，氫與藥物中微量砷鹽反應(yīng)，生成具揮發(fā)性的砷化氫氣體，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃至棕色的砷斑，與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在同樣條件下生成的砷斑比較，顏色不得更深第51頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202253方法：方法：儀器裝置儀器裝置精密量取2ml，置A瓶中，加鹽酸5ml與水21ml，再加碘化鉀試液5ml與酸

35、性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，加鋅粒2g，立即將照上法裝妥的導(dǎo)氣管C密塞于A瓶上，并將A瓶置2540水浴中,反應(yīng)45分鐘，取出溴化汞紙?jiān)?，即?標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備取按各品種項(xiàng)下規(guī)定方法制成的供試品溶液，置A瓶中,照標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備，自“再加碘化鉀試液5ml”起，依法操作 樣品砷斑的制備相當(dāng)于2g砷。此時(shí)砷斑清晰第52頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202254標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的制備 稱取三氧化二砷0.132g，置1000ml量瓶中，加20氫氧化鈉溶液5ml溶解后，用適量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。 臨用前，精密量取貯備液10ml，置1000ml量瓶中，加稀硫酸10

36、ml，用水稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml相當(dāng)于1g的As) 第53頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202255供供試試品、品、HCl、H2O、Zn、KI、SnCl2Pb(Ac)2棉花棉花HgBr2試紙?jiān)嚰圓 砷化氫發(fā)生瓶B 中空磨口塞C 導(dǎo)氣管D 具孔有機(jī)玻璃旋塞E 具孔有機(jī)玻璃旋塞蓋標(biāo)準(zhǔn)砷斑標(biāo)準(zhǔn)砷斑樣品砷斑樣品砷斑與砷化氫反應(yīng)的靈敏度強(qiáng)于氯化汞，但色斑穩(wěn)定性差。故反應(yīng)中應(yīng)保持干燥及避光，并立即與標(biāo)準(zhǔn)砷斑比較第54頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202256 Pb(AC)2棉花棉花的作用：消除鋅粒和供試品中可能含有的少量的硫化物的影響。 Zn粒及供試品中可能含有少量S2,在酸性條件下產(chǎn)生 H2S，與HgBr2作

37、用，生成HgS，干擾測(cè)定，故在測(cè)砷管中部，用Pb(Ac)2棉花填充，以消除干擾。100 g S存在也不干擾。 S2- + 2H+ H2S H2S + HgBr2 2HBr + HgS （汞斑） H2S + Pb(Ac)2 PbS + 2HAc 第55頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202257KI和酸性和酸性SnCl2的作用：的作用： 將五價(jià)砷還原為三價(jià)砷，加快反應(yīng)速度； KI生成的I2被SnCl2還原成I-，I-與反應(yīng)中生成的Zn2+形成穩(wěn)定的配位離子，利于反應(yīng)向右進(jìn)行，促進(jìn)AsH3的生成 抑制銻化氫的生成。 100g Sb存在也不干擾 SnCl2與鋅形成Zn-Sn齊，去極化，從而使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)

38、生第56頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202258消耗KI，SnCl2 并氧化AsH3注意：注意：（S2,SO32,S2O32）+H+H2S或SO2 遇HgBr2試紙HgS或Hg (干擾測(cè)定) 供試品為含硫藥物含硫藥物:解決方法：可先加加HNO3處理處理，使硫化物氧化成SO42, 以消除干擾。例 硫代硫酸鈉 供試品為鐵鹽鐵鹽：解決方法：可先加酸性酸性SnCl2，使Fe3+ Fe2+，再檢查。 例 枸櫞酸鐵銨第57頁(yè)/共68頁(yè)4/19/2022592As3+ + 3SnCl2 + 6HCl 2As+ 3SnCl4 + 6H+膠態(tài)、棕褐色膠態(tài)、棕褐色 供試品為環(huán)狀環(huán)狀藥物:須先進(jìn)行有機(jī)破壞，有機(jī)破壞，否則結(jié)果偏低或難檢出Ca(OH)2例 呋塞米無(wú)水 Na2CO3 例 苯甲酸鈉堿破壞法 含銻含銻藥物，改用藥物，改用白田道夫白田道夫（Betterdorff ）法）法第58頁(yè)/共68頁(yè)4/19/202260第二法第二法 二乙基二硫代氨基甲酸銀法二乙基二硫代氨基甲酸銀法（silver diethyl dithio carbamate) （Ag-DDC法法）原理原理:金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，氫與藥物中微量砷鹽反應(yīng)，生成具揮發(fā)性的砷化