實驗四PCR基因擴增ppt課件_第1頁
實驗四PCR基因擴增ppt課件_第2頁
實驗四PCR基因擴增ppt課件_第3頁
實驗四PCR基因擴增ppt課件_第4頁
實驗四PCR基因擴增ppt課件_第5頁
已閱讀5頁，還剩18頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、l經過本實驗學習PCR反響的根本原理與實驗技術。l聚合酶鏈式反響(polymerase chain reaction,PCR)，是一種在體外快速擴增特定基因或DNA序列的方法，故又稱為基因的體外擴增法。l在待擴增的DNA片斷兩側和與其兩側互補的兩個寡核苷酸引物，經變性、退火和延伸假設干個循環(huán)后，DNA擴增2n倍。1.變性：在加熱或堿性條件下可使DNA雙螺旋的氫鍵斷裂，構成單鏈DNA，稱之為變性。2.退火：是模板與引物的復性。引物是與模板某區(qū)序列互補的一小段DNA片段。3.延伸：從結合在特定DNA模板上的引物為出發(fā)點，將四種脫氧核苷酸以堿基配對方式按53的方向沿著模板順序合成新的DNA鏈。實驗需

2、求為止。實驗需求為止。ParameterConcentrationTemplatepHdNTPsGelatinPrimersMg2+ oncentrationEnzymeTotal volume10 attomoles(1106 molecules)8.4（10mM Tris-Hcl）200 M(each one)100 g/ml (optional)0.5 M(each one);(0.11.0M)0.5mM 10mM1 unit25100l電泳儀電泳儀PCR儀儀移液器移液器l1、DNA模板l2、4種dNTPl3、引物1、引物2l4、Taq酶l5、瓊脂糖l6、DNA相對分子質量規(guī)范物l7、吸頭、50ul PCR管l10PCR緩沖液(含Mg2)l4dNTP (每種1mmol)lTag酶 1U/ullDNA模板l引物1: 5- GGGGAATTCATGGTGAGCAAGGGC-3l引物2: 5-GACCTGCAGGCATGCAAGCTTGGC-3 l引物溶液濃度 10pmol/ull1在0.5ml RCR管內配置20ul反響體系： CK(ul)1#(ul)模板01引物10.40.4引物20.40.410 PCR Buffer22Taq酶0.50.5dNTPs0.40.4ddH2O14.315.3Total2020l要求：l1、寫出本實驗目的、原理；l2、實驗器材及實驗步驟；

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論