1、 第九章第九章 二氫吡啶類鈣通道阻滯二氫吡啶類鈣通道阻滯 藥物的分析藥物的分析 The Analysis of dihydropyridines drugs學習要求：學習要求： 1.1.掌握：二氫吡啶類掌握：二氫吡啶類DHP)DHP)藥物的根本構造、典藥物的根本構造、典型藥物構造特征、鑒別方法、理化性質與分析方型藥物構造特征、鑒別方法、理化性質與分析方法間關系；鈰量法測定法間關系；鈰量法測定DHPDHP類藥物的原理類藥物的原理 2.2.熟習：熟習： DHP DHP類藥物有關雜質的檢查方法類藥物有關雜質的檢查方法 3.DHP3.DHP類藥物體內(nèi)分析樣品的處置方法類藥物體內(nèi)分析樣品的處置方法 二氫

2、吡啶類二氫吡啶類 dihydropyridines dihydropyridines，DHPDHP藥物藥物是鈣拮抗劑是鈣拮抗劑Calcium antagonistsCalcium antagonists, ,又稱鈣又稱鈣通道阻滯劑通道阻滯劑Calcium channel blockersCalcium channel blockers，臨床上鈣拮抗劑主要用于治療高血壓，心絞痛，臨床上鈣拮抗劑主要用于治療高血壓，心絞痛，心律失常，充血性心肌病及缺血性心臟病等。心律失常，充血性心肌病及缺血性心臟病等。是一類運用廣泛的心血管藥物是一類運用廣泛的心血管藥物 。Ch.P2021Ch.P2021年年收載收

3、載1717種本類藥物。種本類藥物。 鈣拮抗劑鈣拮抗劑Calcium Antagonists Calcium Antagonists ，也叫鈣通，也叫鈣通道阻滯劑道阻滯劑Calcium Channel BlockersCalcium Channel Blockers，主要，主要經(jīng)過阻斷心肌和血管平滑肌細胞膜上的鈣離子通經(jīng)過阻斷心肌和血管平滑肌細胞膜上的鈣離子通道，抑制細胞外鈣離子內(nèi)流，使細胞內(nèi)鈣離子程道，抑制細胞外鈣離子內(nèi)流，使細胞內(nèi)鈣離子程度降低而引起心血管等組織器官功能改動的藥物。度降低而引起心血管等組織器官功能改動的藥物。第一節(jié)第一節(jié) 二氫吡啶類的構造與性質二氫吡啶類的構造與性質一、常見藥

4、物的構造與物理性質一、常見藥物的構造與物理性質R5R4R2OOC*NR1COOR3HCH3123456R5R4R2OOC*NR1COOR3HCH3123456 含有苯環(huán)含有苯環(huán)-1，4-二氫吡啶環(huán)和二氫吡啶環(huán)和NH基基 3，5位酯基為必要基團，酯基中烷氧基不同活性不同，位酯基為必要基團，酯基中烷氧基不同活性不同，當一側烷氧基體積增大時，那么活性增大；當一側烷氧基體積增大時，那么活性增大； 4位為苯環(huán)取代，苯環(huán)鄰位和間位有吸電子基團時活性加位為苯環(huán)取代，苯環(huán)鄰位和間位有吸電子基團時活性加強強(-NO2,Cl等；等； 2，6位多為低級烷基，至少一側為低級烷基時有利于添位多為低級烷基，至少一側為低級

5、烷基時有利于添加活性加活性 R1,R2,R3,R4,R5的不同，構成不同的藥物。的不同，構成不同的藥物。CH3NO2NCOOCH3HCH3CH3CH2OOC *硝苯地平硝苯地平Nifedipin *尼群地平尼群地平 Nitrendipin 2,6-二甲基二甲基-4-(2-硝基苯基硝基苯基)-1,4-二氫二氫- 2,6-二甲二甲基基-4-(3-硝基苯基硝基苯基)-1,4- 二氫二氫- 3,5吡啶吡啶二甲酸甲乙酯。二甲酸甲乙酯。 3,5-吡啶二甲酸二甲酯吡啶二甲酸二甲酯(心痛定，拜新同心痛定，拜新同CH3NO2NCOOCH3CH3OOCHCH3*尼莫地平尼莫地平 Nimodipine *尼索地平尼

6、索地平 Nisodipine CH3NO2NHCH3CH3()2 CHOOCCOOCH2CH2OCH3CH3NO2NCOOCH3HCH3CH3() CH2OOCCH2(+/-)-4-(3-硝基苯基硝基苯基)-2,6-二甲基二甲基 -1,4-二氫吡啶二氫吡啶-3,5-二甲酸甲氧基乙二甲酸甲氧基乙基酯異丙酯基酯異丙酯;NoImageClCH3NCOOCH3HCH3CH3CH2OOCCl*非洛地平與尼群地平類似非洛地平與尼群地平類似NHCH3COOCH3CH3CH2OOCH2NCH2CH2OCH2SO3HCl苯磺酸氨氯地平絡活喜，安內(nèi)真苯磺酸氨氯地平絡活喜，安內(nèi)真 Amlodipine Besyla

7、te2-(2-氨基乙氧甲基氨基乙氧甲基)-4-(2-氯苯基氯苯基)-1,4-二氫二氫-6-甲甲基基-3,5-吡啶二甲酸甲乙酯苯磺酸鹽吡啶二甲酸甲乙酯苯磺酸鹽 NO2NHCH3CH3CH3OOCCOO(CH2)2N(CH3)CH2C6H5NO2NHCH3CH3OOCCOOCH(CH3)2CN 鹽酸尼卡地平鹽酸尼卡地平 尼伐地平尼伐地平Nilvaldipine Nicardipine Hydrochloride 2,6-二甲基二甲基-4-(3-硝基苯基硝基苯基)-1,4-二氫二氫吡啶吡啶-3-(N-芐基芐基-N-甲基氨基甲基氨基)-乙酯乙酯-5-甲酯鹽酸鹽甲酯鹽酸鹽 2-氰基一氰基一1,4一二氫一

8、一二氫一6一甲基一甲基-4-(3一硝基苯基一硝基苯基) 一一3,5-二羧酸二羧酸3一甲酯一甲酯6-異丙酯異丙酯尼伐地平與尼索地平構造類似尼伐地平與尼索地平構造類似二、主要理化性質二、主要理化性質 1.1.二氫吡啶環(huán)的復原性：可用氧化復原反響鑒別二氫吡啶環(huán)的復原性：可用氧化復原反響鑒別或含量的測定鈰量法；或含量的測定鈰量法； 2.2.硝基的氧化性：苯環(huán)上的硝基的氧化性：苯環(huán)上的-NO2-NO2具有氧化性，可具有氧化性，可與復原劑如鋅粉復原為芳伯氨基，重氮化與復原劑如鋅粉復原為芳伯氨基，重氮化- -巧合反響巧合反響 3.3.二氫吡啶環(huán)氨基質子解離性質：二氫吡啶環(huán)氨基質子解離性質： DHP DHP與

9、堿作用與堿作用可發(fā)生解離，與苯環(huán)構成共軛而發(fā)生顏色變化?？砂l(fā)生解離，與苯環(huán)構成共軛而發(fā)生顏色變化。CH3NO2NCOOCH3CH3OOCHCH3CH3NO2NCOOCH3CH3OOCHCH3+橙紅色橙紅色OH-H+ 4.4.光的不穩(wěn)定性：光的不穩(wěn)定性： DHP DHP藥物遇光發(fā)生光化學歧化藥物遇光發(fā)生光化學歧化作用，雜質來源。作用，雜質來源。 5.5.旋光性：旋光性：C4C4* *手性碳手性碳 6.6.生物堿的特性生物堿的特性 7.UV7.UV吸收光譜特性吸收光譜特性表：二氫吡啶類藥物的紫外吸收特征表：二氫吡啶類藥物的紫外吸收特征藥物藥物 溶劑溶劑 濃度濃度 g/ml max/min 硝苯地平

10、硝苯地平 無水乙醇無水乙醇 15 237，320355寬吸收寬吸收 尼莫地平 乙醇 10 237尼群地平尼群地平 無水乙醇無水乙醇 20 236，353/303 尼索地平 無水乙醇 10 237非洛地平非洛地平 乙醇乙醇 20 238，261第二節(jié)第二節(jié) 鑒別實驗鑒別實驗 一、化學鑒別法一、化學鑒別法 一與亞鐵鹽反響一與亞鐵鹽反響DHP藥物藥物Fe(OH)2Fe(OH)3 紅棕色紅棕色【尼群地平的鑒別【尼群地平的鑒別n乙醇乙醇2mln溶解溶解1.5mol/L H2SO4 1滴滴0.5mol/L KOH 1ml振搖振搖本品約本品約20mg 5%(NH4)2Fe(SO4)2 2ml灰綠色沉淀變?yōu)榧t

11、灰綠色沉淀變?yōu)榧t棕色棕色 二與氫氧化鈉試液反響二與氫氧化鈉試液反響 DPH藥物藥物 + NaOH DHP藥物藥物橙紅色橙紅色 硝苯地平、尼群地平、尼索地平硝苯地平、尼群地平、尼索地平【硝苯地平鑒別】【硝苯地平鑒別】(ChP2021)： 取本品約取本品約25mg，加丙酮，加丙酮1ml ，加，加20氫氧化氫氧化 鈉試液鈉試液35 滴，溶液顯橙紅色。滴，溶液顯橙紅色。 三沉淀反響三沉淀反響 DHPDHP類藥物具有生物堿特性，酸性水溶液類藥物具有生物堿特性，酸性水溶液中，?？膳c重金屬鹽類碘化鉍鉀、碘化中，?？膳c重金屬鹽類碘化鉍鉀、碘化汞鉀、碘汞鉀、碘- -碘化鉀、二氯化汞等和大分碘化鉀、二氯化汞等和大

12、分子的酸類磷鉬酸、硅鎢酸等沉淀劑反子的酸類磷鉬酸、硅鎢酸等沉淀劑反響生成難溶鹽或不溶性鹽、復鹽或配位化響生成難溶鹽或不溶性鹽、復鹽或配位化合物沉淀，而作鑒別。合物沉淀，而作鑒別。 例如：尼莫地平例如：尼莫地平+ +氯化汞醇試液氯化汞醇試液白色白色 尼群地平尼群地平+ +碘化鉍鉀試液碘化鉍鉀試液橙紅色復鹽橙紅色復鹽 【尼莫地平注射液鑒別】【尼莫地平注射液鑒別】 (ChP2021) 取本品適量約取本品適量約20mg，置分液漏斗中，加乙醚，置分液漏斗中，加乙醚30ml振搖提取，靜置，分取乙醚層，置水浴上振搖提取，靜置，分取乙醚層，置水浴上蒸干，放冷，殘渣加乙醇蒸干，放冷，殘渣加乙醇2ml，攪拌使溶解

13、，攪拌使溶解，移至試管中，加移至試管中，加1氯化汞溶液氯化汞溶液3ml，即發(fā)生白，即發(fā)生白色沉淀。色沉淀。 【尼群地平軟膠囊鑒別】【尼群地平軟膠囊鑒別】 取本品的內(nèi)容物取本品的內(nèi)容物4g，加乙醇稀釋至，加乙醇稀釋至10ml，加，加碘化鉍鉀試液碘化鉍鉀試液1ml，即發(fā)生橙紅色渾濁。，即發(fā)生橙紅色渾濁。(四重氮化四重氮化-巧合反響巧合反響 原理原理:硝基地平經(jīng)復原后，生成有芳伯胺構造的物質，硝基地平經(jīng)復原后，生成有芳伯胺構造的物質，在弱酸條件下亞硝酸鹽重氮化后，再與鹽酸萘乙在弱酸條件下亞硝酸鹽重氮化后，再與鹽酸萘乙二胺巧合構成紫紅色染料。二胺巧合構成紫紅色染料。 【硝基地平】【硝基地平】BP 取供

14、試品約取供試品約25mg，加，加10 ml鹽酸鹽酸-水水-乙醇乙醇1.5：3.5 :5)，溫熱，加鋅粒，溫熱，加鋅粒0.5g，5min后濾過，后濾過，0.1mo1/L亞硝酸鈉溶液亞硝酸鈉溶液5ml，加氨基磺酸胺，滴加堿性鹽酸萘乙，加氨基磺酸胺，滴加堿性鹽酸萘乙二胺試液二胺試液2ml，生成紅色。，生成紅色。 二、分光光度法二、分光光度法 一一UV法：本類藥物有法：本類藥物有UV吸收。吸收。 【尼群地平軟膠囊鑒別】【尼群地平軟膠囊鑒別】(ChP2021) 取本品的內(nèi)容物取本品的內(nèi)容物1g，置，置100 ml量瓶中，加無水乙量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，取醇稀釋至刻度，搖勻，取10ml，置，置

15、100ml量瓶中，量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，照分光光度法加無水乙醇稀釋至刻度，照分光光度法(二部附錄二部附錄)在在353nm與與303nm的波優(yōu)點測定吸收度，比值應的波優(yōu)點測定吸收度，比值應為為2.12.3。二紅外光譜法二紅外光譜法【尼群地平軟膠囊鑒別】【尼群地平軟膠囊鑒別】(ChP2021)(ChP2021) 本品約本品約100mg 100mg 丙酮丙酮10ml 10ml 暗處揮干暗處揮干溶解、過濾溶解、過濾濾液濾液殘渣殘渣 減壓枯燥減壓枯燥依法測定依法測定IR譜譜【尼群地平紅外鑒別】【尼群地平紅外鑒別】(ChP2021)(ChP2021)三、色譜法三、色譜法 一一HPLC法法 【尼莫地

16、平片鑒別】【尼莫地平片鑒別】(ChP2021)依法測定。供試品的主峰和對照品主峰的依法測定。供試品的主峰和對照品主峰的tR一致一致 二二TLC法法 【硝苯地平、尼莫地平片、注射液等鑒別】【硝苯地平、尼莫地平片、注射液等鑒別】(BP) 【硝苯地平鑒別】【硝苯地平鑒別】(USP33) 依法測定供試品的依法測定供試品的RfRf值一致。值一致。第三節(jié)第三節(jié) 有關物質的檢查有關物質的檢查 2,6-二甲基二甲基-4-(2-硝基苯硝基苯基基)-1,4-二氫二氫-3,5-吡啶吡啶二甲酸二甲酯二甲酸二甲酯CH3NO2NCH3CH3COOCH3CH3OOCNCH3CH3COOCH3NO2CH3OOCNONCOOC

17、H3CH3OOCHO或光光雜質I 硝苯地平 雜質IIn2,6-二甲基二甲基-4-(2-硝基硝基苯基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二吡啶二甲酸二甲酯甲酯n2,6-二甲基二甲基-4-(2-亞亞硝基苯基硝基苯基)-3,5-吡啶二吡啶二甲酸二甲酯甲酸二甲酯 硝苯地平降解氧化產(chǎn)物：硝苯地平降解氧化產(chǎn)物： 雜質雜質I: 2,6-二甲基二甲基-4-(2-硝基苯基硝基苯基)-3,5-吡啶二吡啶二甲酸二甲酯甲酸二甲酯 雜質雜質II: 2,6-二甲基二甲基-4-(2-亞硝基苯基亞硝基苯基)-3,5 -吡啶二甲酸二甲酯吡啶二甲酸二甲酯采用采用HPLC進展有關物質檢查進展有關物質檢查【雜質檢查方法】【雜質檢查方法】 供試

18、液供試液I：1mg/ml 供試液供試液II: 0.2mg/ml 對照品對照品I: 雜質雜質I:10g/ml+雜質雜質II:20g/ml對照品對照品II: 硝基地平：硝基地平：2g/ml+雜質雜質I:1 g/ml+雜質雜質II:1g/ml HPLC法測定法測定 流動相：甲醇流動相：甲醇- -水水(60:40) (60:40) ； 檢測波長檢測波長: :為為235nm235nm 硝苯地平的有關物質檢查方法為：硝苯地平的有關物質檢查方法為： .精細量取供試品溶液精細量取供試品溶液 I 與對照品溶液與對照品溶液 I I 各各20l，分別注入液相色譜儀，記錄，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主成分峰保管

19、時間的色譜圖至主成分峰保管時間的2倍。供試品溶倍。供試品溶液液 I 色譜圖中如有與對照品溶液色譜圖中如有與對照品溶液 I I 色色譜圖中雜質譜圖中雜質A與與B相應的峰，其峰面積不得大相應的峰，其峰面積不得大于對照品溶液于對照品溶液 I I 色譜圖中雜質色譜圖中雜質A和和B的面的面積積(0.1% )；如有其他雜質峰，單個雜質峰面積；如有其他雜質峰，單個雜質峰面積不得大于對照品溶液不得大于對照品溶液 I I 中硝苯地平的峰中硝苯地平的峰面積面積(0.2%);雜質峰面積總和不得大于對照品溶雜質峰面積總和不得大于對照品溶液液 I I 中硝苯地平的峰面積中硝苯地平的峰面積2.5倍倍0.5%。 3I:(C

20、V)L(%)=100S(CV)=100(CV)C=100C1 1010010.1%對照樣品對照樣品對照樣品雜質同理得：雜質同理得：雜質II:0.1%3:(CV)L(%)=100SKC=100C2 1010010.2%對照樣品對照樣品單個雜質3:(CV)L(%)=100SKC=100C2.5 2 1010010.5% 對照樣品對照樣品總雜質第四節(jié)第四節(jié) 含量測定含量測定一、鈰量法一、鈰量法 硫酸鈰作滴定劑具有高的氧化電位，且為一價硫酸鈰作滴定劑具有高的氧化電位，且為一價復原；不存在對環(huán)取代基的副反響，專屬性高復原；不存在對環(huán)取代基的副反響，專屬性高。本法既可用于原料，亦可用于片劑的測定本法既可用

21、于原料，亦可用于片劑的測定 Ce4+e Ce3+Red硝苯地平的含量測定 鈰量法鈰量法:ChP2021原料藥原料藥NHCH3COOCH3NO2OCH3OO3CHONO23COOCH3CHNH+2Ce(Cl4)3 CH3NO2NCOOCH3CH3OOCHCH32 Ce46HNCH3CH3COOCH3NO2CH3OOC2Ce 3Fe(ph)32Ce 4Fe(ph)33Ce3 橙紅色 無色 【硝苯地平含量測定】【硝苯地平含量測定】2021 取本品約取本品約0.4g，精細稱定，加無水乙醇，精細稱定，加無水乙醇50ml，微，微熱使溶解，加高氯酸溶液取熱使溶解，加高氯酸溶液取70高氯酸高氯酸8.5ml ，

22、 加水至加水至100ml 50ml、鄰二氮菲亞鐵指示液、鄰二氮菲亞鐵指示液3 滴，滴，立刻用硫酸鈰滴定液立刻用硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)滴定，至近終點時，滴定，至近終點時，在水浴中加熱至在水浴中加熱至50左右，繼續(xù)漸漸滴定至橙紅左右，繼續(xù)漸漸滴定至橙紅色消逝，并將滴定的結果用空白實驗校正。每色消逝，并將滴定的結果用空白實驗校正。每1ml硫酸鈰滴定液硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)相當于相當于17.32mg 的的C17H18N2O6。 0V -VFT% =100%Ws（）含量（ ）本法：本法： ChP(2021):硝苯地平、尼莫地平、尼群地平、硝苯地平、尼莫地平、尼群地平、非洛地平等非洛地平等 BP(2021)：硝苯地平、尼莫地平、尼群地平：硝苯地平、尼莫地平、尼群地平等