蛋白質(zhì)的分離與純化_第1頁
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文檔簡介

蛋白質(zhì)分離純化的基本原則蛋白質(zhì)分離純化的基本原則l粗提：粗提：l 鹽析鹽析 有機(jī)溶劑沉淀有機(jī)溶劑沉淀l 結(jié)晶結(jié)晶 等電點(diǎn)沉淀等電點(diǎn)沉淀l精提精提 ：l 離心（離心（centrifugation）l 電泳（電泳（electrophoresis）l l 層析（層析（chromatography）l沉降系數(shù)（sedimentation constant）與蛋白質(zhì)的密度和形狀有關(guān)，也與介質(zhì)的密度和粘度有關(guān)l離心可用于兩個(gè)方面：l作為一種分離技術(shù)從混合物中分離一種成分l作為一種分析技術(shù)測定物質(zhì)的物理性質(zhì)，如分子量，密度，形狀及平衡結(jié)合常數(shù)（equilibrium binding constants）速度 時(shí)間蔗糖梯度速率區(qū)帶離心（速率區(qū)帶離心（rate-zonal centrifugation）IEFSDS-PAGE每一個(gè)點(diǎn)代表一條多肽鏈，每一條多肽鏈有自己的等電點(diǎn)和分子量。多肽鏈可以用染色法或放射自顯影進(jìn)行檢測流動(dòng)相固定相大分子小分子葡聚糖小株洗脫示意圖結(jié)合 洗脫曲線IEF 原理IEF 測 pI氨基酸層析圖譜

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