1、編輯課件編輯課件水產(chǎn)品的檢驗(yàn)水產(chǎn)品的檢驗(yàn)編輯課件編輯課件的安全現(xiàn)狀水產(chǎn)品水產(chǎn)品編輯課件編輯課件水產(chǎn)品質(zhì)量安全現(xiàn)狀水產(chǎn)品質(zhì)量安全現(xiàn)狀我國(guó)是水產(chǎn)品生產(chǎn)大國(guó)，我國(guó)是水產(chǎn)品生產(chǎn)大國(guó)， 連續(xù)多年居世連續(xù)多年居世界首位界首位.水產(chǎn)食品營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美水產(chǎn)食品營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美, 并具有低脂肪、高蛋白、營(yíng)養(yǎng)平衡性好并具有低脂肪、高蛋白、營(yíng)養(yǎng)平衡性好的特點(diǎn)的特點(diǎn), 深受人們的喜愛(ài)。深受人們的喜愛(ài)。由于水產(chǎn)品易受海、淡水域環(huán)境污染的由于水產(chǎn)品易受海、淡水域環(huán)境污染的影響和藥物在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的大量使用影響和藥物在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的大量使用, 因因此水產(chǎn)品安全性倍受國(guó)內(nèi)外的關(guān)注。水此水產(chǎn)品安全性倍受國(guó)內(nèi)外的關(guān)注。水產(chǎn)品和

2、人們的生活健康密切相關(guān)，所以產(chǎn)品和人們的生活健康密切相關(guān)，所以需要國(guó)家地方和行業(yè)制定相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)來(lái)保需要國(guó)家地方和行業(yè)制定相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)來(lái)保障水產(chǎn)品的質(zhì)量安全。我國(guó)正在積極開障水產(chǎn)品的質(zhì)量安全。我國(guó)正在積極開展?jié)O業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化體系建設(shè)，已經(jīng)制定了相展?jié)O業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化體系建設(shè)，已經(jīng)制定了相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)。關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)。編輯課件編輯課件水產(chǎn)品主要安全問(wèn)題水產(chǎn)品主要安全問(wèn)題水水產(chǎn)品產(chǎn)品組胺組胺組胺是魚體中游離組氨酸在組胺酸脫羧酶催化下組胺是魚體中游離組氨酸在組胺酸脫羧酶催化下,發(fā)發(fā)生脫羧反應(yīng)而形成的一種胺類。通常是由某些特定生脫羧反應(yīng)而形成的一種胺類。通常是由某些特定魚種因時(shí)間魚種因時(shí)間/溫度處理不當(dāng)而形成的。組胺中毒是溫度處理不

3、當(dāng)而形成的。組胺中毒是水產(chǎn)食品存在的主要安全問(wèn)題之一水產(chǎn)食品存在的主要安全問(wèn)題之一,世界各地尤其是世界各地尤其是沿海地區(qū)組胺中毒事件時(shí)有發(fā)生。組胺危害是水產(chǎn)沿海地區(qū)組胺中毒事件時(shí)有發(fā)生。組胺危害是水產(chǎn)品生產(chǎn)加工過(guò)程中較難控制的一類危害，因?qū)ζ涞钠飞a(chǎn)加工過(guò)程中較難控制的一類危害，因?qū)ζ涞目刂菩柝灤┯趶脑系匠善返乃a(chǎn)加工全流程之中。控制需貫穿于從原料到成品的水產(chǎn)加工全流程之中。01水水 產(chǎn)品產(chǎn)品無(wú)機(jī)砷無(wú)機(jī)砷砷元素廣泛存在于自然界砷元素廣泛存在于自然界,砷與其化合物被運(yùn)用在農(nóng)砷與其化合物被運(yùn)用在農(nóng)藥、除草劑、殺蟲劑中藥、除草劑、殺蟲劑中,對(duì)環(huán)境造成的污染越來(lái)越嚴(yán)對(duì)環(huán)境造成的污染越來(lái)越嚴(yán)重。這些以

4、各種形態(tài)進(jìn)入海洋生態(tài)系統(tǒng)中的砷化合重。這些以各種形態(tài)進(jìn)入海洋生態(tài)系統(tǒng)中的砷化合物很容易進(jìn)入水生生物組織中并在其中富集起來(lái)，物很容易進(jìn)入水生生物組織中并在其中富集起來(lái)，給水產(chǎn)品造成重大污染。因此給水產(chǎn)品造成重大污染。因此,對(duì)水產(chǎn)品中砷的檢測(cè)對(duì)水產(chǎn)品中砷的檢測(cè)十分重要。十分重要。02編輯課件編輯課件水產(chǎn)品主要安全問(wèn)題水產(chǎn)品主要安全問(wèn)題水水 產(chǎn)品產(chǎn)品甲基汞甲基汞汞（汞（hg）及其化合物是環(huán)境中廣泛存在的一類持久）及其化合物是環(huán)境中廣泛存在的一類持久性污染物，對(duì)人類健康造成很大的威脅，汞及其化性污染物，對(duì)人類健康造成很大的威脅，汞及其化合物曾大量用于殺蟲劑、殺菌劑、化妝品等領(lǐng)域。合物曾大量用于殺蟲劑、

5、殺菌劑、化妝品等領(lǐng)域。工業(yè)廢水、廢氣、含汞化合物中的汞會(huì)通過(guò)人類活工業(yè)廢水、廢氣、含汞化合物中的汞會(huì)通過(guò)人類活動(dòng)進(jìn)入到外界環(huán)境中，且會(huì)在食物鏈中逐漸富集。動(dòng)進(jìn)入到外界環(huán)境中，且會(huì)在食物鏈中逐漸富集。目前每年仍有大量的各種形態(tài)的汞排放到外界環(huán)境目前每年仍有大量的各種形態(tài)的汞排放到外界環(huán)境中，造成很大的污染環(huán)境中的汞污染物經(jīng)過(guò)大氣沉中，造成很大的污染環(huán)境中的汞污染物經(jīng)過(guò)大氣沉降、水的流動(dòng)等方式最終進(jìn)入到地表水中，對(duì)水產(chǎn)降、水的流動(dòng)等方式最終進(jìn)入到地表水中，對(duì)水產(chǎn)品養(yǎng)殖和生存環(huán)境造成很大的污染，養(yǎng)殖環(huán)境中各品養(yǎng)殖和生存環(huán)境造成很大的污染，養(yǎng)殖環(huán)境中各種形態(tài)汞化合物很容易被水產(chǎn)品吸收和富集，嚴(yán)重種形態(tài)

6、汞化合物很容易被水產(chǎn)品吸收和富集，嚴(yán)重影響水產(chǎn)品質(zhì)量，由于其在水產(chǎn)品中殘留時(shí)間長(zhǎng)，影響水產(chǎn)品質(zhì)量，由于其在水產(chǎn)品中殘留時(shí)間長(zhǎng)，并有可能通過(guò)食物鏈進(jìn)行傳遞，進(jìn)而對(duì)人類產(chǎn)生巨并有可能通過(guò)食物鏈進(jìn)行傳遞，進(jìn)而對(duì)人類產(chǎn)生巨大的危害。因此，對(duì)水產(chǎn)品中汞殘留進(jìn)行檢測(cè)勢(shì)在大的危害。因此，對(duì)水產(chǎn)品中汞殘留進(jìn)行檢測(cè)勢(shì)在必行。必行。0102編輯課件編輯課件的測(cè)定法組胺組胺編輯課件編輯課件組胺測(cè)定法組胺測(cè)定法1、分光光度法（、分光光度法（GB/T 5009.45）012、液相色譜法（、液相色譜法（GB5009.2082016）023、高效液相色譜、高效液相色譜-紫外檢測(cè)法（參考紫外檢測(cè)法（參考文獻(xiàn)：徐麗文獻(xiàn)：徐麗,

7、劉琳劉琳,王宗奇王宗奇,孟慧琴孟慧琴,張雪張雪琰琰.高效液相色譜高效液相色譜-紫外檢測(cè)法測(cè)定水產(chǎn)紫外檢測(cè)法測(cè)定水產(chǎn)品中組胺含量品中組胺含量J.食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)報(bào),2014,5(12):3790-3794）03編輯課件編輯課件第一法：分光光度法第一法：分光光度法 (1)原理：樣品中的組胺用正戊醇提取后，在弱堿性條件下與重氮鹽發(fā)生反應(yīng)生產(chǎn)橙色的偶氮化合物，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。 (2)方法說(shuō)明：適用于水產(chǎn)品等含有組胺的食品。 本方法的檢出限為50mg/kg。 (3)樣品前處理：秤取一定量絞碎并混勻的樣品，加入三氯乙酸溶液浸泡以提取組胺并沉淀蛋白質(zhì)，過(guò)濾。吸取適量濾液，用氫氧化鈉

8、溶液調(diào)制堿性，組胺游離，用正戊醇萃取游離組胺。吸取適量正戊醇提取液，加鹽酸至酸性，組胺成為鹽酸鹽而易溶于水溶液，反萃取至鹽酸溶液中，合并鹽酸提取液并稀釋定容。 (4)測(cè)定方法：將樣品的鹽酸提取液偶氮化后測(cè)定480nm的吸光度。標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。編輯課件編輯課件第二法：液相色譜法第二法：液相色譜法 （1）原理：水產(chǎn)品(魚類及其制品、蝦類及其制品)、肉類:試樣用5%三氯乙酸提取,正已烷去除脂肪,三氯甲烷-正丁醇(1+1)液液萃取凈化后,丹磺酰氯衍生,C18色譜柱分離,高效液相色譜-紫外檢測(cè)器檢測(cè),內(nèi)標(biāo)法定量。酒類(葡萄酒、啤酒、黃酒等)、調(diào)味品(醋和醬油):試樣用丹磺酰氯衍生,C18色譜柱分離,高效

9、液相色譜-紫外檢測(cè)器檢測(cè),內(nèi)標(biāo)法定量。 （2）范圍：本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中色胺、-苯乙胺、腐胺、尸胺、組胺、章魚胺、酪胺、亞精胺和精胺含量的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于酒類(葡萄酒、啤酒、黃酒等)、調(diào)味品(醋和醬油)、水產(chǎn)品(魚類及其制品、蝦類及其制品)、肉類中生物胺的測(cè)定。 （3）檢出限：20mg/kg編輯課件編輯課件試樣制備 4.1 試樣制備 取水產(chǎn)品及肉類樣品的可食部分約500g,充分勻質(zhì),均分成兩份裝入潔凈容器中,密封,于-20保存。 4.2提取 準(zhǔn)確稱取已經(jīng)絞碎或勻漿后的水產(chǎn)品、肉類10g(精確至0.01g),置于100mL具塞錐形瓶中,加入500L內(nèi)標(biāo)使用液 (1.0mg/mL)與樣品充分混

10、勻,加入20mL5%三氯乙酸溶液和振蕩提取30min,轉(zhuǎn)移至50mL具塞離心管中,5000r/min離心10min,轉(zhuǎn)移上清液至50mL容量瓶中,殘?jiān)?0mL5%三氯乙酸溶液再提取一次,合并上清液,用5%三氯乙酸稀釋至刻度,待凈化。編輯課件編輯課件凈化及萃取 4.3凈化 4.3.1 除脂肪:移取上述試樣提取液10mL于25mL具塞試管中,加入0.5g氯化鈉渦旋振蕩至氯化鈉完全溶解后加入10mL正己烷,渦旋振蕩5min,靜置分層后棄去上層有機(jī)相,下層試樣溶液加入10mL正己烷再除脂一次。 4.3.2 萃取:移取5mL上述除脂肪后的試樣溶液于10mL具塞離心管中,用5mol/L氫氧化鈉溶液(幾滴

11、)調(diào)節(jié)pH至12.0左右。加入5mL的正丁醇/三氯甲烷(1+1)混合溶液,渦旋振蕩5min,5000r/min離心5min,轉(zhuǎn)移上層有機(jī)相于另一個(gè)10mL具塞離心管中,下層樣液再萃取一次,合并萃取液,用正丁醇/三氯甲烷(1+1)稀釋至刻度。取5mL萃取液加入200L鹽酸(1mol/L),混勻后40水浴下氮?dú)獯蹈?加入1mL鹽酸(0.1mol/L)渦旋振蕩,使殘留物完全溶解,待衍生。編輯課件編輯課件衍生及標(biāo)準(zhǔn)曲線制作 4.4 衍生 4.4.1 試樣的衍生:在上述待衍生的試樣溶液中依次加入1mL飽和碳酸氫鈉溶液、100L氫氧化鈉溶液(1mol/L)、1mL衍生試劑,渦旋混勻1min后置于60 恒溫

12、水浴中衍生15min,取出,分加入100L谷氨酸鈉溶液,振蕩混勻,60恒溫反應(yīng)15min。取出,冷卻至室溫,于每個(gè)離心管中加入1mL水,渦旋混合1min,40水浴下氮吹除去丙酮(約1mL),加入0.5g氯化鈉渦旋振蕩至氯化鈉完全溶解后加入5mL乙醚,渦旋振蕩2min,靜置分層后,吸出上層有機(jī)相(乙醚層),再萃取一次,合并乙醚萃取液,40水浴下氮?dú)獯蹈伞＜尤?mL乙腈渦旋振蕩使殘留物完溶解,0.22m 濾膜針頭濾器過(guò)濾于進(jìn)樣小瓶,待測(cè)定。 4.4.2 標(biāo)準(zhǔn)的衍生:分別移取1mL生物胺標(biāo)準(zhǔn)系列溶液,置于10mL具塞試管中,依次加入250L內(nèi)標(biāo)使用液(100mg/L),以下操作同試樣的衍生步驟。編輯

13、課件編輯課件衍生及標(biāo)準(zhǔn)曲線制作 5.測(cè)定方法 色譜柱為C18柱(柱長(zhǎng)250mm,柱內(nèi)徑4.6mm,柱填料粒徑5m),紫外檢測(cè)波長(zhǎng)254nm,進(jìn)樣量20L,柱溫35,流動(dòng)相 A為90%乙腈/10%(含0.1%乙酸的0.01mol/L乙酸銨溶液),流動(dòng)相 B為10%乙腈/90%(含0.1%乙酸的0.01mol/L乙酸銨溶液),流速0.8mL/min。將試樣的衍生溶液注入高效液相色譜儀中,測(cè)得峰面積,以保留時(shí)間定性。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測(cè)液中各目標(biāo)化合物的濃度。 52標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 將20L系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作液的衍生液分別注入高效液相色譜儀,測(cè)得目標(biāo)化合物的峰面積,以系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為橫坐標(biāo),以

14、目標(biāo)化合物的峰面積與內(nèi)標(biāo)的峰面積的比值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。編輯課件編輯課件其他測(cè)定法：高效液相色譜其他測(cè)定法：高效液相色譜- -紫紫外檢測(cè)法外檢測(cè)法 1)原理：高效液相色譜法由于其具有分析速度快、柱效高、檢測(cè)靈敏度高、定量分析 準(zhǔn)確等特點(diǎn), 基本取代了其他方法, 是目前生物胺含量分析測(cè)定的主要手段。衍生方法主要有柱前衍生和柱后衍生, 常用的衍生化試劑有鄰苯二甲醛、丹磺酰氯、偶氮試劑和苯甲酰氯等, 鄰苯二甲醛存在衍生物不穩(wěn)定等不足, 苯甲酰氯不溶于水, 衍生效果差, 偶氮顯色法容易受到基質(zhì)中雜質(zhì)的干擾, 影響測(cè)定結(jié)果。丹磺酰氯具有較理想的衍生效果和穩(wěn)定時(shí)間。而有些標(biāo)準(zhǔn)中用鹽溶液作為流動(dòng)相,

15、會(huì)對(duì)分析柱造成損害。對(duì)高效液相色譜法測(cè)定水產(chǎn)品(鯖魚)中組胺含量的試驗(yàn)方法進(jìn)行改進(jìn),建立一種提取方法簡(jiǎn)單、衍生物穩(wěn)定、操作方便的檢測(cè)方法。 (2)方法說(shuō)明：適用于魚和蝦等具有有毒生物胺的水產(chǎn)品。 本方法的檢出限為50mg/kg。 (3)樣品前處理：稱取2 g(精確至 0.001 g)已粉碎的樣品于 50 mL刻度離心管中, 用移液槍加入10 mL的0.4mol/L 高氯酸溶液,渦旋提取2 min,上離心機(jī)于4000 r/min 離心5 min, 將上清液移入25 mL棕色容量瓶中。在下層的殘?jiān)性偌尤?0 mL的0.4 mol/L的高氯酸溶液, 渦旋提取2min,離心后轉(zhuǎn)移上清液于容量瓶中,用

16、0.4mol/L 高氯酸溶液將其定容至刻度。編輯課件編輯課件其他測(cè)定法：高效液相色譜其他測(cè)定法：高效液相色譜- -紫紫外檢測(cè)法外檢測(cè)法 樣品衍生：量取1 mL樣品溶液于5 mL離心管中, 依次加入2 moL/L氫氧化鈉溶液100L、飽和碳酸氫鈉溶液300L和10 mg/mL丹磺酰氯溶液2 mL, 蓋緊蓋子, 在40下避光反應(yīng)40min, 每5min 振蕩1次。反應(yīng)完畢后, 加入濃氨水100L 終止衍生化反應(yīng), 放置 30 min。用甲醇將其定容至刻度5 mL, 混合均勻, 過(guò)0.45m的有機(jī)濾膜, 待測(cè)。 (4)測(cè)定方法：色譜柱: Waters C18柱(150 mm4.6mm, 5m); 流

17、速:1.0mL/min; 柱溫: 35 ; 進(jìn)樣量: 20L; 檢測(cè)器: 紫外檢測(cè)器; 檢測(cè)波長(zhǎng): 254 nm; 流動(dòng)相: A: 甲醇, B: 水; 梯度洗脫。編輯課件編輯課件的測(cè)定法無(wú)機(jī)砷無(wú)機(jī)砷編輯課件編輯課件無(wú)機(jī)砷測(cè)定法無(wú)機(jī)砷測(cè)定法1、液相色譜、液相色譜-原子熒光光譜法（原子熒光光譜法（GB 5009.11-2014）2、液相色譜、液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜電感耦合等離子體質(zhì)譜法法 （GB 5009.11-2014）3、液相、液相-原子熒光法（參考文獻(xiàn)：盧原子熒光法（參考文獻(xiàn)：盧亭亭,夏慧麗夏慧麗,張今君張今君.液相液相-原子熒光法測(cè)原子熒光法測(cè)定水產(chǎn)品中無(wú)機(jī)砷方法的研究定水產(chǎn)品中無(wú)

18、機(jī)砷方法的研究J.食品食品研究與開發(fā)研究與開發(fā),2017,38(13):179-181）030201編輯課件編輯課件第一法：液相色譜第一法：液相色譜- -原子熒光光原子熒光光譜法譜法 (1)原理：食品中無(wú)機(jī)砷經(jīng)稀硝酸提取后，以液相色譜進(jìn)行分離，分離后的目標(biāo)化合物在酸性環(huán)境下與KBH4 反應(yīng)，生成氣態(tài)砷化合物，以原子熒光光譜儀進(jìn)行測(cè)定。按保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。 (2)精密度：在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的20%。檢出限：0.03mg/kg (3)樣品前處理： 稱取約1.0g水產(chǎn)動(dòng)物濕樣（準(zhǔn)確至0.001g)，置于50mL塑料離心管中，加人20mL0.15m

19、ol/L 硝酸溶液，放置過(guò)夜。于90C恒溫箱中熱浸提2.5h，每0.5h振搖1mm。提取完畢，取出冷卻至室溫， 8000 r/min離心15 min。取5 mL上清液置于離心管中，加人5 mL正己烷，振搖1 min后，8000 r/min離心15min，棄去上層正己烷。按此過(guò)程重復(fù)一次。吸取下層清液，經(jīng)0.45m有機(jī)濾膜過(guò)濾C18小柱凈化后進(jìn)樣。按同一操作方法作空白試驗(yàn)。編輯課件編輯課件測(cè)定方法 （4)測(cè)定方法：原子熒光檢測(cè)參考條件：負(fù)高壓：320 V;砷燈總電流：90 mA;主電流/輔助電流：55/35;原子化方式：火焰原子化；原子化器 溫度：中溫。載液：0%鹽酸溶液，流速4mL/min;還

20、原劑：30g/L硼氫化鉀溶液，流速4mL/min;載氣流速： 400 mL/min;輔助氣流速：400 mL/min。 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：亞砷酸鹽AS(H)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（00 mg/L,按AS計(jì)）：準(zhǔn)確稱取三氧化二砷0.013 2 g,加 100g/L氫氧化鉀溶液1mL和少量水溶解，轉(zhuǎn)人100mL容量瓶中，加人適量鹽酸調(diào)整其酸度近中性， 加水稀釋至刻度。4C保存，保存期一年?；蛸?gòu)買經(jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)溶液物質(zhì)。 25.4.2砷酸鹽As(V)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（100mg/L，按AS計(jì)）：準(zhǔn)確稱取砷酸二氫鉀0.024 0 g，水溶解，轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中并用水稀釋至刻度。4C保存，保存期一年。

21、或購(gòu)買經(jīng)國(guó)家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證 書的標(biāo)準(zhǔn)溶液物質(zhì)。編輯課件編輯課件標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：取7支10mL容量瓶，分別準(zhǔn)確加人1.00mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)使用液0.00mL、0.050 mL、0.10mL、0.20mL、0.30mL、0.50mL和l.0mL,加水稀釋至刻度，此標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的濃度分別為0.0ng/mL、 5.0ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、30ng/mL、50ng/mLQl00ng/mL。 吸取標(biāo)準(zhǔn)系列溶液100mL注人液相色譜-原子熒光光譜聯(lián)用儀進(jìn)行分析，得到色譜圖，以保留時(shí)間定性。以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中目標(biāo)化合物的濃度為橫坐標(biāo)，色譜峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。編輯

22、課件編輯課件第二法：液相色譜第二法：液相色譜- -電感耦合等電感耦合等離子體質(zhì)譜法離子體質(zhì)譜法 (1)原理：食品中無(wú)機(jī)砷經(jīng)稀硝酸提取后，以液相色譜進(jìn)行分離，分離后的目標(biāo)化合物經(jīng)過(guò)霧化由載氣送人 ICP炬焰中，經(jīng)過(guò)蒸發(fā)、解離、原子化、電離等過(guò)程，大部分轉(zhuǎn)化為帶正電荷的正離子，經(jīng)離子采集系統(tǒng)進(jìn)入質(zhì)譜儀，質(zhì)譜儀根據(jù)質(zhì)荷比進(jìn)行分離測(cè)定。以保留時(shí)間定性和質(zhì)荷比定性，外標(biāo)法定量。 (2) 精密度：在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的20%。檢出限：0.06mg/kg編輯課件編輯課件測(cè)定方法 (3)樣品前處理： 稱取約1.0g水產(chǎn)動(dòng)物濕樣（準(zhǔn)確至0.001g)，置于50mL塑料

23、離心管中，加人20mL0.15mol/L 硝酸溶液，放置過(guò)夜。于90C恒溫箱中熱浸提2.5h，每0.5h振搖1mm。提取完畢，取出冷卻至室溫， 8000 r/min離心15 min。取5 mL上清液置于離心管中，加人5 mL正己烷，振搖1 min后，8000 r/min離心15min，棄去上層正己烷。按此過(guò)程重復(fù)一次。吸取下層清液，經(jīng)0.45m有機(jī)濾膜過(guò)濾C18小柱凈化后進(jìn)樣。按同一操作方法作空白試驗(yàn)。 (4)測(cè)定方法： 電感耦合等離子體質(zhì)譜儀參考條件：RF入射功率1550W;載氣為高純氬氣；載氣流速0.85L/min;補(bǔ)償氣0.15L/min。泵速0.3 rps; 檢測(cè)質(zhì)量數(shù) m/z=75(

24、As)，m/z=35(Cl)。 吸取試樣溶液50 L注人液相色譜-電感耦合等離子質(zhì)譜聯(lián)用儀，得到色譜圖，以保留時(shí)間定性。 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到試樣溶液中As(I)與As(V)含量，As(I)與As(V)含量的加和為總無(wú)機(jī)砷含量， 平行測(cè)定次數(shù)不少于兩次。編輯課件編輯課件其他測(cè)定法：液相其他測(cè)定法：液相- -原子熒光法原子熒光法 (1)原理：動(dòng)物性水產(chǎn)品中無(wú)機(jī)砷經(jīng)稀硝酸超聲提取后，以液相色譜進(jìn)行分離，分離后的目標(biāo)化合物在酸性環(huán)境下與 KBH4反應(yīng)，生成氣態(tài)砷化合物，以原子熒光光譜儀進(jìn)行測(cè)定。按保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。 (2)方法說(shuō)明：該法具有操作便捷、干擾少、準(zhǔn)確度好等優(yōu)點(diǎn)，適用于批量水產(chǎn)品種無(wú)機(jī)

25、砷的測(cè)定。檢出限為0.01 mg/kg。 (3)樣品前處理：準(zhǔn)確稱取經(jīng)粉碎過(guò) 80目篩的樣品1.0 g于50mL離心管中，加0.15 mol/L 的硝酸20.0mL旋渦混勻后置于超聲波清洗器中提取，以8000r/min離心15min后取上清液5mL于10mL離心管中，加入5mL正己烷，振搖1min后，8000r/min離心15 min，棄去上層正己烷。按此過(guò)程重復(fù)一次，吸取下層清液，經(jīng)0.45m水相濾膜過(guò)濾及C18小柱凈化后進(jìn)樣，同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。 (4)測(cè)定方法：色譜柱：陰離子交換色譜柱（HAMILTONPRP-X100 10m 250mm4.1 mm）。梯度洗脫：流動(dòng)相 A：1mmol/

26、L 磷酸氫二銨溶液（pH6.0）；流動(dòng)相 B：20mmol/L 磷酸氫 二銨溶液（pH6.0）。流動(dòng)相、光譜等參數(shù)條件同國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.11-2014食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中總砷及無(wú)機(jī)砷的測(cè)定編輯課件編輯課件的測(cè)定法甲基汞甲基汞編輯課件編輯課件甲基汞測(cè)定法甲基汞測(cè)定法1、液相色譜、液相色譜-原子熒光光譜聯(lián)用方法原子熒光光譜聯(lián)用方法（GB 5009.17-2014）2、氣相色譜法（參考文獻(xiàn)：劉素琴、氣相色譜法（參考文獻(xiàn)：劉素琴,牟牟曉崟曉崟.氣相色譜法測(cè)定水產(chǎn)品中痕量甲氣相色譜法測(cè)定水產(chǎn)品中痕量甲基汞的方法研究基汞的方法研究J.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志志,2015,25(03):34

27、4-347）0201編輯課件編輯課件第一法：液相色譜第一法：液相色譜- -原子熒光光原子熒光光譜聯(lián)用方法譜聯(lián)用方法 (1)原理：食品中甲基汞經(jīng)超聲波輔助5 mol/L鹽酸溶液提取后，使用反相色譜柱分離，色譜流出液進(jìn)人在線紫外消解系統(tǒng)，在紫外光照射下與強(qiáng)氧化劑過(guò)硫酸鉀反應(yīng)，甲基汞轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)機(jī)汞。酸性環(huán)境下，無(wú)機(jī)汞與硼氫化鉀在線反應(yīng)生成汞蒸氣，由原子熒光光譜儀測(cè)定。由保留時(shí)間定性，外標(biāo)法峰面積定量。 (2)方法說(shuō)明：。檢出限為0.038微克每毫升。 (3)樣品前處理： 稱取樣品0.50 g2.0 g (精確至0.001 g),置于15 mL塑料離心管中，加人10 mL的鹽酸溶液 (5 mol/L)，

28、放置過(guò)夜。室溫下超聲水浴提取60 min,期間振搖數(shù)次。4 下以8 000 r/min轉(zhuǎn)速離心 15 min。準(zhǔn)確吸取2.0mL清液至5 mL容量瓶或刻度試管中，逐滴加人氫氧化鈉溶液(6mol/L),使樣液pH為27。加人0.1 mL的L-半胱氨酸溶液（10 g/L）,最后用水定容至刻度。0.45m有機(jī)系濾膜過(guò)濾，待測(cè)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。 編輯課件編輯課件測(cè)定方法 標(biāo)準(zhǔn)液的配制：氯化汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(200 g/mL,以Hg計(jì)）：準(zhǔn)確稱取0.0270 g氯化汞，用0.5 g/L重鉻酸鉀的硝酸溶液溶解，并稀釋、定容至100 mL。于4 t冰箱中避光保存,可保存兩年。甲基汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（200 g/mL,以Hg計(jì)）：準(zhǔn)確稱取0.0250 g氯化甲基汞，加少量甲醇溶解， 用甲醇溶液（1 + 1）稀釋和定容至100mL。于4 t冰箱中避光保存，可保存兩年?；旌蠘?biāo)準(zhǔn)使用液（1.00g/mL,以Hg計(jì)）：準(zhǔn)確移取0.50 mL甲基汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液和0.50 mL氯 化汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，置于100 mL容量瓶中，以流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻。此混合標(biāo)準(zhǔn)使用液中，兩種汞化合物的濃度均為1.00g/mL。現(xiàn)用現(xiàn)配。標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：取5支10 mL容量瓶，分別準(zhǔn)確加人混合標(biāo)準(zhǔn)使用