尿液分析儀分析項目測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程簡介_第1頁
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文檔簡介

1、尿常規(guī)項目標(biāo)準(zhǔn)操作干化學(xué)法(一)標(biāo)本的采集及保存尿常規(guī)檢驗通常以新鮮晨尿為宜,但門診患者可以隨機留尿。尿液標(biāo)本采集 應(yīng)使用潔凈帶蓋的一次性容器,避免經(jīng)血、白帶、精液、糞便混入。標(biāo)本留 取后要及時送檢。對于不能立即檢查的標(biāo)本,在冰箱內(nèi)一般可保存 6-8 小時。要根據(jù)檢驗項目 的需要,選擇不同的防腐及保存方法。(二)校準(zhǔn)1 校準(zhǔn)試紙條:與儀器配套的試紙條2 校準(zhǔn)方法:一共 2 條校準(zhǔn)試紙條,只作為日常校準(zhǔn)用,一般只用一條,另一 條為備(三)檢測項目1 葡萄糖1.1 原理采用葡萄糖氧化酶法原理。在有氧條件下,葡萄糖被葡萄糖氧化酶氧化成葡 萄糖醛酸和過氧化氫, 后者在過氧化物酶的催化下釋放出初生態(tài)氧,

2、 使色原鄰甲 聯(lián)苯胺(或碘化鉀)呈現(xiàn)不同的顏色變化, 其顏色深淺與尿液中葡萄糖含量有關(guān)。本法檢測范圍為微量(±)約5.6mm/L;弱陽性(+)約13.8 mmol/L,陽性(+) 約 27.5 mmol/L,強陽性(+)約 55.5 mmol/L ,最強陽性(+)約 111mmol/L. 1.2 注意事項1.2.1 維生素 C 能干擾低濃度的尿液葡萄糖測定,使結(jié)果呈假陰性??蓪⒛?液煮沸數(shù)分鐘以排出維生素 C 的干擾。酮體能降低葡萄糖檢測的敏感度或使檢 測呈假陰性。1.2.2 干化學(xué)葡萄糖氧化酶法對尿液葡萄糖監(jiān)測的靈敏度和特異性有所不 同,僅是一般的定量過篩試驗。 因此,對于糖尿病患

3、者最好采用葡萄糖定量試驗。 1.3 參考值正常人腎糖閾為 9-10 mmol/L , 一般情況下血糖濃度比較恒定,空腹是為 4.44-6.00 mmol/L,進餐后8.88-9.99 mmol/。精神小球濾過的葡萄糖幾乎全部由 腎小管重吸收,僅有極其微量的葡萄糖隨尿液排出,一般定性試驗為陰性。1.4 臨床意義1.4.1 生理性糖尿生理性糖尿包括飲食性糖尿、應(yīng)急性糖尿和妊娠性糖尿,呈一過性,當(dāng)去除 生理因素后即可恢復(fù)。1.4.2 病理性糖尿病理性糖尿分原發(fā)真性糖尿和繼發(fā)性高血糖性糖尿, 前者如糖尿病、 腎性糖 尿?。缓笳呷缂谞钕俟δ芸惯M、垂體功能亢進、嗜鉻細胞瘤、胰島 a 細胞瘤、 庫欣綜合癥、

4、胰腺疾病、嚴(yán)重肝功能衰竭。2 膽紅素2.1 原理采用重氮反應(yīng)法原理,在強酸介質(zhì)中,膽紅素與重氮化的雙氯苯胺偶聯(lián),形 成紫紅色的重氮色素, 其顏色深淺與尿中膽紅素濃度有關(guān)。 本法檢測范圍為弱陽 性(+)約 8.6umol/L;陽性(+ )約 17.1 ;強陽性(+)約 51.3。2.2 注意事項2.2.1 尿液標(biāo)本宜新鮮,避免陽光直射而使膽紅素轉(zhuǎn)變成膽綠素導(dǎo)致檢測結(jié)果 呈假陽性。 2.2.2 高濃度維生素 C 和亞硝酸鹽可抑制偶氮反應(yīng),導(dǎo)致膽紅素 檢測結(jié)果假陰性,吡啶、吲哚酸在低 pH 值條件下可導(dǎo)致假陽性反應(yīng)。水楊酸 鹽、阿司匹林也可使本試驗結(jié)果2.3 參考值陰性2.3 臨床意義 尿膽紅素陽性

5、見于阻塞性黃疸、肝細胞性黃疸、病毒性(或中毒性)肝炎、 肝硬化以及其他肝病。3 酮體3.1 原理在堿性條件下, 亞基鐵氰化鈉與尿液中乙酰乙酸作用, 產(chǎn)生紫色放映, 其顏色 深淺與酮體含量有關(guān)。本法檢測范圍為微量(±)約 0.9 mmol/;弱陽性(+)約1.7 mmol/L,陽性(+ )約 8.6mmol/L,強陽性(+ )約 17.2 mmol/L,最強陽性 (+)約 111mmol/L.3.2 注意事項3.2.1本法只檢測尿液中的乙酰乙酸,不與丙酮或或B-羥丁酸反應(yīng),故與傳統(tǒng)的化學(xué)法結(jié)果略有差異。檢測敏感度為 0.5-1.0 mmol/L。3.2.2 不同病因引起的酮癥,其酮體成

6、分有所不同。在糖尿病酮癥酸中毒早 期患者中,主要酮體形式是B-羥丁酸,乙酰乙酸很少或缺乏。因此,干化學(xué)分析可出現(xiàn)假陰性結(jié)果或?qū)偼w量的估計不足。 相反,在糖尿病酮癥酸 中毒癥狀緩解之后,乙酰乙酸含量反而比初始急性期增高。3.2.3乙酰乙酸受熱易分解成丙酮,故尿液標(biāo)本宜及時送檢。3.2.4 尿液含量有大量色素或大量左旋多巴代謝產(chǎn)物時,可導(dǎo)致假陽性結(jié)果。3.3 參考值陰性3.4 臨床意義 尿酮體陽性見于糖尿病酮癥酸中毒、饑餓、劇烈運動、營養(yǎng)不良等。4 相對密度4.1 原理高分子電解質(zhì)共聚體的解離常數(shù)(pKa)隨尿液離子濃度而變化,離子濃 度越高,其酸性基團(H+)解離越多,H+可與酸堿指示劑反應(yīng)

7、,通過溴 麝香酚藍的顏色改變,顯示尿液的相對密度值。尿液中離子濃度較低時, 呈藍綠色,離子濃度升高則轉(zhuǎn)向黃綠色。4.2 注意事項4.2.1 電解質(zhì)共聚體有多甲乙烯酸馬來酐和甲氧乙烯順丁烯二酸兩種, 后者 更為常用。本法檢測范圍從 1.005開始,每隔 0.005遞增,至 1.030 止,低于前者或超過后者,報告“W 1.005”或“1.030”。4.2.2 干化學(xué)分析測定尿液相對密度不受葡萄糖含量的影響, 但對尿中蛋白 質(zhì)較敏感。尿中蛋白質(zhì)含量每增加 1%,則尿液相對密度增加 0.003。4.2.34.2.44.2.5另外, X 線造影劑可使含防腐劑的尿液相對密度增加到 1.050。 本法受尿

8、液pH值得影響較大,pHA6.5時,應(yīng)在測定結(jié)果上增加 0.005 作為因尿液 pH 值影響的補償。干化學(xué)分析尿液相對密度檢測范圍為 1.005-1.030,新生兒尿液相對密 度在 1.002-1.004之間。由于本法檢測結(jié)果的數(shù)據(jù)間隔較大, 對尿液相對密度過高或過低的標(biāo) 本檢測不夠敏感,因此,僅限于篩選試驗。本法的參比方法為折射儀 法。4.3 參考值 正常人尿液相對密度主要受尿液中所含氯化鈉和尿素的影響。 通常飲食條 件下,尿液相對密度波動在 1.015-1.025之間。4.4 臨床意義病理狀態(tài)下,尿液相對密度隨尿液中所含的溶質(zhì)成分而改變。因此,尿 液相對密度檢測時了解腎臟濃縮功能的一項簡易

9、指標(biāo)。尿液相對密度增高見于急性腎炎、糖尿病、蛋白質(zhì)、高熱等。尿液相對密 度降低見于慢性腎炎、尿崩癥、原發(fā)性醛固酮增多癥及腎功能不全多尿期。慢 性尿崩癥時,由于尿量極大,尿液外觀如水,相對密度極地,幾乎等于1。尿液相對密度連續(xù)測定較一次測定更有價值, 慢性腎功能不全患者可呈現(xiàn) 持續(xù)性低相對密度尿。5 PH 值5.1 原理將甲基紅(PH4.6-6.2)和溴麝香酚藍(PH6.0-7.6)適量配合,組成復(fù)合型 指示劑,呈色范圍為PH4.5-9.0(橘黃色-藍色),其顏色變化與尿液pH值相關(guān)。 本法檢測范圍限于PH4.5-9,每隔0.5單位遞增。5.2 注意事項尿液 pH 值主要取決于尿中磷酸二氫鈉和磷

10、酸氫二鈉的相對含量,并 因飲食情況而異。每當(dāng)進食后,由于胃黏膜分泌大量鹽酸以助消化, 此時尿液 pH 值顯一過性增高。夜間人睡后,由于呼吸變慢呈輕微的 酸中毒,故尿中 pH 值發(fā)生變化。 標(biāo)本不宜久置,以免細菌分解尿液成分,使 pH 值發(fā)生改變。 可利用尿液 pH 值測定,對尿蛋白、尿相對密度等易受 pH 值影響的 干化學(xué)分析加以監(jiān)控。5.2.25.2.35.2.15.3 參考值 4.6-7.4進食肉類或蛋白質(zhì)多者呈弱酸性,進食植物性食物多者呈堿性。5.4 臨床意義 酸性尿見于尿路結(jié)核、代謝性酸中毒、糖尿病酮癥酸中毒和服用氯化銨、 氯化鈣、稀鹽酸機體內(nèi)蛋白質(zhì)分解增加、痛風(fēng)等。酸堿尿見于劇烈嘔吐

11、、堿中毒、腎功能不全、原發(fā)性醛固酮增多癥、腎小 管性酸中毒、尿路感染及服用堿性藥物等情況。另外,尿液 pH 值變化與尿結(jié)石的形成關(guān)系密切, 應(yīng)用尿液 pH 值測定監(jiān)測 腎結(jié)石患者的尿液酸堿度變化可以指導(dǎo)臨床用藥。 如尿酸和胱氨酸結(jié)石在酸性條 件下容易形成,而磷酸鈣結(jié)石在堿性條件下容易形成。6 蛋白質(zhì)6.1 原理根據(jù) PH 指示劑蛋白質(zhì)誤差原理而設(shè)計。尿液中蛋白質(zhì)陽離子基團(白蛋 白)與指示劑四溴酚藍(或四氯粉絲溴酚酞)陰離子基團結(jié)合,導(dǎo)致指示劑 進一步電離,從而產(chǎn)生顏色變化,其顏色變化與尿液蛋白質(zhì)含量有關(guān)。 本法檢測范圍為弱陽性( +)約 0.3g/L; 陽性( +)約 1.0g/L 強陽性(

12、 +) 約 3.0g/L;最強陽性(+ )約 10.0g/L6.2 注意事項6.2.1干化學(xué)分析檢測尿蛋白有 3類不同的方法,除指示劑蛋白質(zhì)誤差外,還 有 Urine-TP 和 Micral-Test 法。前者類似考馬斯亮藍法,能同時檢測白蛋白、球 蛋白及本 -周蛋白;后者雖采用層析擴散和免疫技術(shù),也只能檢測白蛋白。6.2.2本法檢測球蛋白的敏感性僅為白蛋白的 1/1001/50,而璜基水楊酸法對白 蛋白和球蛋白的敏感性基本一致。因此, NCCLS 推薦璜基水楊酸法最為干化學(xué) 分析的參比方法。 但必須注意, 璜基水楊酸法易受尿中存在的某些鹽類結(jié)晶的干 擾。6.2.3 干化學(xué)分析及其他化學(xué)檢測尿

13、蛋白由于試劑組成不同,其檢測敏感度也 有較大差異。四溴酚藍法為150-300mg/l,與加熱乙酸法相當(dāng),但低于璜基水楊酸 法(50100mg/l),而四氯酚四溴酚酞法為 60mg/l。干化學(xué)分析均不能檢出本- 周蛋白。6.2.4尿液 pH 值變化對檢測結(jié)果影響較大,特別是服用奎寧、奎尼丁和嘧啶 等藥物者的強堿性尿液會出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。 此外,阿斯匹林、青霉素、慶大霉素、 氯丙嗪、灰黃霉素、干擾素、利福平、磺胺類、潑尼松、非激素消炎劑、造影劑 等均可導(dǎo)致假陽性反應(yīng)。6.2.5尿液標(biāo)本如含有其他分泌物或較多細胞成分也可出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。6.3 參考值 正常人終尿蛋白質(zhì)含量很少,用干化學(xué)法分析檢測為陰性

14、。6.4 臨床意義正常人血漿內(nèi)分子量 69000卩的蛋白質(zhì)極少從腎小球濾過, 15000卩的蛋白 質(zhì)可自由的從腎小球濾過, 但95%-96%被腎小管重吸收, 故尿中蛋白質(zhì)含量很少。6.4.1 生理性蛋白尿生理性蛋白尿又稱功能性蛋白尿, 指泌尿系統(tǒng)并無器質(zhì)性變化, 尿液中暫時 出現(xiàn)蛋白尿。由于劇烈運動、長時間直立、高溫、和受寒冷等因素,引起腎血 管痙攣或充血,導(dǎo)致腎小球通透性增加而致。此種蛋白尿多為一過性。6.4.2 病理性蛋白尿 病理性蛋白尿是指器質(zhì)性病變導(dǎo)致尿液中持續(xù)出現(xiàn)蛋白質(zhì)。 可分為腎小球性蛋白尿、腎小管性蛋白尿、混合蛋白尿和溢出性蛋白尿。腎小球性蛋白尿:因炎癥等因素導(dǎo)致腎小球毛細血管通

15、透性增加,血漿蛋 白大量濾出, 超過腎小管沖吸收能力引起蛋白尿。 見于原發(fā)性與繼發(fā)性腎小球 疾病,如腎淀粉樣變、糖尿病腎病、急、慢性腎炎、腎病綜合征等。腎小管性蛋白尿:因炎癥或中毒引起腎近曲小管對低分子蛋白質(zhì)的重吸收 障礙,導(dǎo)致尿中出現(xiàn)蛋白質(zhì)。見于間質(zhì)性腎炎、腎盂腎炎、中毒性腎病及腎移 植后的排斥反應(yīng)等?;旌闲缘鞍啄颍耗I臟病變同時累及腎小球和腎小管,使蛋白質(zhì)濾出增加且 重吸收減少引起蛋白尿。見于慢性腎炎、慢性腎功能不全、狼瘡性腎炎、多發(fā) 性骨髓瘤、糖尿病腎病等。溢出性蛋白尿:腎臟正常,腎外疾病導(dǎo)致循環(huán)中低分子量的蛋白質(zhì)增多,使腎小球濾出增多, 超出腎小管重吸收能力引起的蛋白質(zhì)。 見于多發(fā)性骨髓

16、瘤、 原發(fā)性巨球蛋白血癥、急性血管內(nèi)溶血及單核細胞白血病。6 尿膽原7.1 原理 根據(jù)偶氮結(jié)合法原理,尿膽原在強酸條件下和重氮鹽偶聯(lián)形成胭脂紅色素, 其顏色深淺與尿膽原含量有關(guān)。7.2 注意事項7.2.1 本法的敏感度為 4mg/L.7.2.2 正常人每天尿膽原排出量波動較大,夜間和上午較少,午后 2 點-4 點 時達最高峰,并與尿液pH值成正比。7.2.3 尿液標(biāo)本宜新鮮, 避免陽光照射使尿膽原氧化成尿膽素呈假陽性反應(yīng)。7.2.4 磺胺類藥物對本法有干擾,尿中含有甲醛可是結(jié)果呈假陰性反應(yīng)。7.3 參考值 尿膽原主要來自膽紅素的分解。生理情況下腸道細菌分解形成的膽素原族化合物,絕大部分隨糞便排

17、出,約有 10%-20%進入腸肝循環(huán),其中僅有極少部 分進入體循環(huán)后,隨尿排出。故正常尿液中只含有少量尿膽原(3-16卩mol/L )。7.4 臨床意義 尿膽原濃度增高見于溶血性及肝細胞性黃疸。阻塞性黃疸患者尿膽原試驗呈陰性。8 亞硝酸鹽8.1 原理 反應(yīng)依賴于尿中革蘭氏陽性細菌把硝酸鹽還原成亞硝酸鹽, 亞硝酸鹽與對 氨基苯砷酸反應(yīng)生成重氮化合物, 重氮化合物再與萘基乙二胺二鹽酸結(jié)合 呈現(xiàn)桃紅色。8.2 注意事項8.2.1 本法僅可見出硝酸鹽還原酶陽性的細菌,敏感度為 0.6-1.0mg/L 亞硝 酸鹽,檢出率約 80%。但尿液中在膀胱內(nèi)儲留時間不足 4 小時或飲食中缺乏 硝酸鹽時,盡管尿液中

18、存在還原酶陽性菌,檢測結(jié)果仍然可為陰性。822含維生素C或相對密度高的尿液可呈假陰性。含色素尿檢測結(jié)果可呈 假陽性。8.2.3 本法陰性不能排除硝酸鹽還原酶陰性的其他細菌感染。但陽性結(jié)果則 肯定是尿路感染,應(yīng)進一步作細菌培養(yǎng)和藥敏試驗,以便確定有效的抗生素 治療。8.3 參考值 陰性8.4 臨床意義 尿液亞硝酸鹽陽性見于腸肝均可細菌應(yīng)起的尿路感染如膀胱炎、腎盂腎炎等。9 紅細胞9.1 原理 紅細胞內(nèi)含有亞鐵血紅素基團,具有過氧化物酶活性,可催化過氧化氫釋 放初生態(tài)氧,使色原鄰甲聯(lián)苯胺呈藍色反應(yīng), 其顏色深淺與血紅蛋白含量有關(guān)。本法檢測范圍為弱陽性(+) 5-10個紅細胞/卩l(xiāng) ;陽性(+) 5

19、0個紅細胞/ 卩1 ;強陽性(+) 250個紅細胞/卩I。9.2 注意事項9.2.1 本法既可測定完整紅細胞內(nèi)的血紅蛋白,又可測定破碎紅細胞釋放的 游離血紅蛋白。因此,檢測結(jié)果與鏡檢可不一致,應(yīng)綜合分析判斷。9.2.2 試劑組成,其檢測敏感度也不相同。四甲基聯(lián)苯胺-二異丙苯 -二氫過5 個紅氧化酶檢測敏感度為0.15-0.62mg/L蛋白質(zhì),相當(dāng)于5-15個完整紅細胞/卩I 。四甲基聯(lián)苯胺 -2, 5-二甲基-2, 5-二氫過氧化乙烷檢測敏感度為 細胞/卩I或10個紅細胞/卩I的血紅蛋白。9.2.3 尿液中含有易熱酶時可致假陽性結(jié)果, 因此須將尿液煮沸在進行檢測。 9.2.4尿液中含有大量維生

20、素C時,可出現(xiàn)假陰性反應(yīng)。蛋白尿、相對密度 高的尿液及亞硝酸鹽均可導(dǎo)致假陽性結(jié)果。9.2.5本法與紅細胞鏡檢不完全相關(guān),但當(dāng)檢測結(jié)果少于10個紅細胞/卩I時,可以省去顯微鏡檢查。9.3 參考值陰性9.4 臨床意義檢測結(jié)果陽性具有兩種含義,即血尿和血紅蛋白尿。 血尿:見于腎結(jié)石、腎小球腎炎、腎結(jié)核、腎盂腎炎、膀胱炎、腫瘤、創(chuàng) 傷、化學(xué)或藥物中毒、劇烈運動。血紅蛋白尿:見于輸血反應(yīng)、溶血性貧血、嚴(yán)重?zé)齻?、陣發(fā)性睡眠性血紅 蛋白尿。10 白細胞10.1 原理采用粒細胞酯酶反應(yīng)原理。 尿中粒細胞特異性質(zhì)沒能水解吲哚酚酯, 并與 重氮鹽偶聯(lián)形成紫色縮合物,其顏色深淺與粒細胞數(shù)量有關(guān)。10.2 注意事項1

21、0.2.1 中性粒細胞內(nèi)含有特異性酯酶,而淋巴細胞、單核細胞、無此酶。因 此,尿中以淋巴細胞為主時的腎移植排異反應(yīng)患者,可出現(xiàn)假陽性結(jié)果。10.2.2 不同試劑組成,其檢測敏感度和檢出范圍也不同。 如萘酚AS-D氧化 乙酸、重氮鹽法和吡咯氨基酸酯、重氮鹽法的檢測范圍為微量(±)約 15個 白細胞/卩I ;弱陽性(+) 70個白細胞/卩I ;陽性(+) 125個白細胞/卩I ; 強陽性(+) 500個白細胞/卩I。而吲哚酚羧基酚酯、重氮鹽法檢測范圍如 下:弱陽性(+) 25個白細胞/卩I ;陽性(+) 100個白細胞/卩I ;強陽性(+) 500個白細胞/卩I.萘酚AS-D氧化乙酸、2

22、-氯4苯甲酰胺-5甲基、苯基氯化 重氮苯法檢測范圍為:弱陽性(+) 25個白細胞/卩I ;陽性(+) 75個白細胞 /卩I ;強陽性(+) 500個白細胞/卩I。10.2.3 使用甲醛、呋喃可致假陽性反應(yīng),使用慶大霉素、先鋒霉素 V 可致 假陰性反應(yīng)。10.2.4 蛋白尿、糖尿、高相對密度尿均可導(dǎo)致假陰性反應(yīng)或使陽性結(jié)果減 弱。10.3 參考值 正常人尿液通常為陰性。測定結(jié)果為±時其臨床意義有時可疑,但措辭出現(xiàn) ±結(jié)果提示可能有問題。陽性結(jié)果偶見于一些被陰道分泌物污染的隨機尿標(biāo)本。10.4 臨床意義尿液白細胞陽性見于尿路感染如尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎以及腎結(jié)核、腎 腫瘤病發(fā)感染等。11 維生素 C11.1 原理維生素C(即抗壞血酸)具有1,2-烯二醇還原性基團,在酸性條件下能將2, 6- 二氯定靛酚還原成 2, 6- 二氯二對酚胺,顏色由粉紅色轉(zhuǎn)變成無色,其顏色變 化與維生素C含量有關(guān)。本法 檢測范 圍為弱 陽性 ( +) 0.56mmol/L(100mg/L );陽性 ( +)I. 40mmol/L(250

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