1、主要內(nèi)容滅菌概念滅菌方法簡(jiǎn)介EO 滅菌基礎(chǔ)EN ISO11135-1標(biāo)準(zhǔn)介紹EO滅菌常見(jiàn)問(wèn)題EO滅菌相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)滅菌概念滅菌消滅/殺滅微生物危害人類健康干擾測(cè) 試工作醫(yī)療器械 藥品 食品與微生物實(shí) 驗(yàn)相關(guān)的器 具、工具、 設(shè)備、物料 等無(wú)菌希望無(wú)菌狀態(tài)無(wú)菌保證水品（SAL）細(xì)菌、真菌、 病毒、原生生 物等滅菌概念滅菌實(shí)質(zhì)上就是通過(guò)一定方法，將對(duì)象物的微生物污染殺滅至 要求水平的過(guò)程。滅菌概念無(wú)菌 Sterile無(wú)菌狀態(tài) Sterility無(wú)菌保證水平 Sterility assurance level （SAL）滅菌 Sterilization注：上述定義見(jiàn)“EN ISO11135-1：2007”

2、滅菌概念無(wú)菌 Sterile無(wú)存活微生物。無(wú)菌狀態(tài)Sterility無(wú)存活微生物的狀態(tài)（注：實(shí)踐中無(wú)法證實(shí)沒(méi)有微生物存在的這種絕對(duì)說(shuō)法）無(wú)菌保證水平 Sterility assurance level （SAL）滅菌后，在單位產(chǎn)品上檢出存活微生物的概 率（注：SAL為定量值，通常為10-6或10-3.）滅菌概念滅菌 Sterilization已確認(rèn)的使產(chǎn)品無(wú)存活微生物的過(guò)程。（注：滅菌過(guò)程中，微生物的死亡規(guī)律用指數(shù)函數(shù)表示，因此，任何單件產(chǎn)品上微生物的 存在可用概率表示；概率可減少到最低，但不可能為零。）消毒disinfection消毒是指將傳播媒介上病原微生物清除或殺滅，使其達(dá)到無(wú)公害的要求

3、，并 非殺死所有的微生物，包括芽孢。滅菌是指將傳播媒介上所有微生物全部清除或殺滅，特別是抵抗力最強(qiáng)的細(xì) 菌芽孢。指數(shù)函數(shù)：一般地，形如y=ax(a0且a1) (xR)的函數(shù)叫做指數(shù)函數(shù)。滅菌函數(shù)Nt 滅菌后微生物數(shù)量； N0初始微生物數(shù)量k 常數(shù)系數(shù) t作用時(shí)間01234567891011121314151617181920212223Nt1000 368 135 50187210000000000000000-8.00-6.00-4.00-2.000.002.004.00020040060080010001200存活微生物lg值微生物存活數(shù)量lgNt 3.00 2.57 2.13 1.70

4、1.26 0.83 0.39 -0.0 -0.4 -0.9 -1.3 -1.7 -2.2 -2.6 -3.0 -3.5 -3.9 -4.3 -4.8 -5.2 -5.6 -6.1 -6.5 -6.9時(shí)間滅菌過(guò)程微生物存活曲線&對(duì)數(shù)曲線NtlgNt滅菌概念0.001.002.003.0002001003004006007008009001000012345存活微生物lg值微生物存活數(shù)量時(shí)間D值/D10值在設(shè)定條件下，滅活90%測(cè)試微生物所需的時(shí)間或輻射劑量。滅菌過(guò)程微生物存活曲線&對(duì)數(shù)曲線11004.00NtlgNtD value/ D10value微生物數(shù)量降低95000%微生物數(shù)量降低1lg

5、滅菌方法及選擇滅菌消滅/殺滅微生物有機(jī)生命體特點(diǎn)細(xì)菌、真菌、 病毒、原生生 物等細(xì)胞結(jié)構(gòu)（細(xì)胞膜、細(xì)胞 質(zhì)、細(xì)胞核）水、蛋白質(zhì)、核酸、脂類破壞熱 射線化學(xué)試劑滅菌方法及選擇化學(xué)滅菌輻照滅菌干熱滅菌濕熱滅菌EO: Ethylene Oxide-ray輻射高溫干燥箱蒸汽滅菌滅菌方法及選擇滅菌原理EO可以與蛋白質(zhì)上的羧基（-COOH）、氨基（-NH2）、硫氫基（-SH）和羥基（-OH）發(fā)生烷基化作用，造成蛋白質(zhì)失去反應(yīng) 基因，阻礙蛋白質(zhì)的正?；瘜W(xué)反應(yīng)和新陳代謝，從而導(dǎo)致微生物 死亡射線能使物質(zhì)氧化或產(chǎn)生自由基(OHH)再作用于生物分子，或者直接作用于生物分子，打斷氫鍵、使雙鍵氧化、破壞環(huán)狀結(jié)構(gòu) 或使

6、某些分子聚合等方式，破壞和改變生物大分子的結(jié)構(gòu)，從而 抑制或殺死微生物。熱力滅菌的原理是：加熱可破壞蛋白質(zhì)和核酸中的氫鍵，故導(dǎo)致 核酸破壞，蛋白質(zhì)變性或凝固，酶失去活性，微生物因而死亡。滅菌方法及選擇常見(jiàn)滅菌方法的比較滅菌方法及選擇產(chǎn)品相關(guān)因素環(huán)境相關(guān)經(jīng)濟(jì)因素材料 結(jié)構(gòu) 包裝醫(yī)院 工廠 實(shí)驗(yàn)室成本EO 滅菌基礎(chǔ)SAL=10-6 產(chǎn)品材料、結(jié)構(gòu)經(jīng)濟(jì)、環(huán)境EO 滅菌機(jī)料法環(huán)測(cè)人知識(shí) 經(jīng)驗(yàn) 技能滅 菌 器滅 菌 劑滅菌 工藝滅菌 影響 因素過(guò)程 監(jiān)測(cè) 及產(chǎn) 品放 行滅菌器EN 1422:1997+A1:2009 Sterilizers for medical purposes - Ethylene

7、oxide sterilizers- Requirements and test methodsYY 0503-2005（NEQ EN 1422:1997） 環(huán)氧乙烷滅菌器通常的我們區(qū)分兩種滅菌器A類滅菌器和B類滅菌器滅菌器A類B類可編程滅菌工藝預(yù)置適用于工業(yè)生產(chǎn)適用于高值、復(fù)雜產(chǎn)品小批量滅菌或醫(yī)院使用具有多種功能柜體（預(yù)熱、滅菌、解析）所有過(guò)程在同一柜體完成柜體體積較大尺寸限定（體積通常小于1立方）滅菌周期長(zhǎng)滅菌周期短滅菌劑為高濃度ETO氣體（通常大于80%）滅菌劑為低濃度ETO氣體（通常低于20%）正常氣壓或負(fù)壓滅菌滅菌壓力較高（最高可達(dá)500kPa）滅菌劑HHH CCHO品名別名其他分子

8、式環(huán)氧乙烷氧化乙烯ETO或EOC2H4OEpoxyethaneEthylene oxide制作：乙烯在催化劑作用下，通過(guò)直接氧化過(guò)程制得，純度達(dá)99.9%滅菌劑EO氣體物理性質(zhì)化學(xué)性質(zhì)生物化學(xué)性質(zhì)人體毒性滅菌劑生物化學(xué)性質(zhì)活潑EO可以與蛋白質(zhì)上的羧基（-COOH）、氨基（-NH2）、硫氫基（-SH）和羥基（- OH）發(fā)生烷基化作用，造成蛋白質(zhì)失去反應(yīng)基因，阻礙蛋白質(zhì)的正?；瘜W(xué)反應(yīng)和新 陳代謝，從而導(dǎo)致微生物死亡。HHH CCHO蛋白質(zhì)COOH NH2 SH OH蛋白質(zhì)COOH-CH2CH2OHNH-CH2CH2OH S-CH2CH2OH O-CH2CH2OH烷基化作用（或稱：羥化）：針對(duì)各種物

9、質(zhì)/部位，反應(yīng)完全不可逆。作為殺菌劑，EO可與細(xì)菌蛋白質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)體細(xì)胞及病毒、甚至與細(xì)胞核物質(zhì)（核糖核酸）發(fā)生反應(yīng)，且可與細(xì)胞的任 何部位發(fā)生反應(yīng)；所有化學(xué)消毒/滅菌劑中滅菌效果最好的。參數(shù)1049mmHg10.7-204302.7 Vol.%100 Vol.%100%可溶無(wú)色具有芳香的醚味項(xiàng)目蒸汽壓（21） 沸點(diǎn)閃點(diǎn)燃燒點(diǎn)（1bar）空氣中爆炸限（1bar） 水溶性顏色 氣味氣味閾值500ppm滅菌劑物理性質(zhì)760109413001500156029671.090500100015002000250030003500-2010.720293050蒸汽壓/mmHg25溫度/ETO蒸汽壓標(biāo)準(zhǔn)大氣壓

10、=760mmHg蒸汽壓意義：越高的蒸汽壓意味著越高的穿透性物質(zhì)（薄膜）厚度穿透時(shí)間聚乙烯PE/聚氯乙烯PVC0.1mm5min尼龍0.04mm22min氯丁膠布0.3mm26min丁橡膠布0.39mm41min注：環(huán)氧乙烷不能穿透鋁箔、金屬、玻璃、陶瓷等物質(zhì)環(huán)氧乙烷氣體的穿透性示例滅菌劑滅菌劑化學(xué)性質(zhì)活潑與水反應(yīng)生成乙二醇（廢氣處理）與氯化氫（鹽酸）反應(yīng)生成氯乙醇（ECH）（滅菌后殘留物質(zhì)檢測(cè)）與氧化鐵有特別強(qiáng)的反應(yīng)（儲(chǔ)運(yùn)注意）滅菌劑人體毒性急性中毒患者有劇烈的搏動(dòng)性頭痛、頭暈、惡心和嘔吐、流淚、嗆咳、胸悶、呼吸困難；重者全身肌肉顫動(dòng)、言語(yǔ)障礙、共濟(jì)失調(diào)、出汗、神志不清， 以致昏迷；還可見(jiàn)心肌

11、損害和肝功能異常。慢性影響長(zhǎng)期少量接觸，可見(jiàn)有神經(jīng)衰弱綜合征和植物神經(jīng)功能紊亂國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)（IARC）分類為1類物質(zhì)：對(duì)人類有確認(rèn) 的致癌性環(huán)境可接收安全濃度GB 11721-89:2mg/m（大約1.5ppm）美國(guó)全國(guó)勞動(dòng)衛(wèi)生與職業(yè)病研究所（NIOSH）：容許接觸水平1ppm醫(yī)療器械歐洲：詳見(jiàn)EN ISO10993-7中國(guó)：10g/g滅菌劑典型的工藝過(guò)程EO滅菌工藝EO滅菌工藝預(yù)處理在滅菌循環(huán)開(kāi)始前，在一房間或柜室內(nèi)，先對(duì)產(chǎn)品 進(jìn)行處理，以達(dá)到預(yù)定溫度和相對(duì)濕度。滅菌循環(huán)在一密閉的柜室內(nèi)，包括進(jìn)行去除空氣、處理（若 采用）、加入滅菌劑、EO作用、去除EO和換氣通風(fēng)將EO和（或）其他反應(yīng)產(chǎn)

12、物從醫(yī)療器械解吸附至預(yù) 定水平的過(guò)程。EO滅菌過(guò)程影響因素EO滅菌過(guò)程影響因素D值的意義D值表征微生物抗性D值越大，微生物抗性越高，越難殺滅因此，我們通常希望D值越小越好D值與EO濃度、相對(duì)濕度和溫度間存在密切關(guān)系D值越小，滅菌時(shí)間也就會(huì)越短EO滅菌過(guò)程影響因素43210567820040010001200D 值/min600800EO氣體濃度（mg/L）D值與EO濃度間關(guān)系曲線測(cè)定條件：溫度：541相對(duì)濕度：60%10%注：參見(jiàn)ISO 11138EO滅菌過(guò)程影響因素321045620406080D 值/min相對(duì)濕度/%相對(duì)濕度：微生物孢子通常具備干的細(xì)胞壁，只有在一定濕度的情況下，環(huán)氧乙

13、烷氣體才能穿透；D 值與相對(duì)濕度間關(guān)系曲線測(cè)定條件：EO濃度：600mg/L30mg/L溫度：541注：參見(jiàn)ISO 11138EO滅菌過(guò)程影響因素108642012141630446470D值/min54溫度/D值和溫度間關(guān)系曲線圖測(cè)定條件：EO濃度：600mg/L30mg/L相對(duì)濕度：60%10%注：參見(jiàn)ISO 11138EO滅菌過(guò)程影響因素總結(jié)一定氣體濃度范圍內(nèi)，濃度越高，滅菌效果越好；超過(guò)1000mg/L，滅菌效果的提升不明顯；相對(duì)濕度在40%-80%時(shí)，滅菌效果沒(méi)有顯著差別；低于 40%，滅菌效果降低明顯；高于90%，沒(méi)有明顯的提高， 而且易于產(chǎn)生水滴，反而影響滅菌效果；溫度在30-6

14、5間，每升高10，滅菌效果提升一倍；高于65時(shí)，沒(méi)有顯著的滅菌效果提升。EO滅菌過(guò)程影響因素時(shí)間ETO濃度高，作用時(shí)間短；ETO濃度低，作用時(shí)間長(zhǎng)。存活概率滅菌時(shí)間越長(zhǎng)，產(chǎn)品中微生物的存活概率越小（滅菌效果好）滅菌時(shí)間與存活的微生物數(shù)量的對(duì)數(shù)值呈線性關(guān)系（致死率確定的最重要理 論支持）EO滅菌過(guò)程影響因素其他影響因素產(chǎn)品本身產(chǎn)品材料、結(jié)構(gòu)（產(chǎn)品結(jié)構(gòu)影響氣體的進(jìn)出、某些材料不適合環(huán)氧乙烷滅 菌）、材料本身需要吸收較多的濕/熱)包裝材料產(chǎn)品初始污染菌的數(shù)量及種類(殘存概率法及直接計(jì)數(shù)法對(duì)初始污染菌水平有要 求、某些產(chǎn)品對(duì)內(nèi)毒素有要求、某些微生物對(duì)環(huán)氧乙烷有抗性)過(guò)程操作真空度（影響氣體的擴(kuò)散與滲透

15、、影響作用于產(chǎn)品的氣體濃度；影響包裝安全 及產(chǎn)品安全；影響置換效果、影響殘留）裝載情況（影響熱/濕穿透及分布；影響氣體循環(huán)）EO滅菌過(guò)程監(jiān)測(cè)及產(chǎn)品放行過(guò)程監(jiān)測(cè)EN ISO11135-1:2007，Section 10產(chǎn)品放行參數(shù)放行產(chǎn)品滅菌放行EO滅菌過(guò)程監(jiān)測(cè)及產(chǎn)品放行參數(shù)放行產(chǎn)品無(wú)菌放行EN ISO11135-1Section 11.1 a）EN ISO11135-1Section 11.1是在不使用BI的情況下將產(chǎn)品作為無(wú)菌 產(chǎn)品從滅菌環(huán)節(jié)放行的方法，它所依賴 的是物理處理參數(shù)符合全部規(guī)范的證明。 因此，應(yīng)該收集其他處理參數(shù)的數(shù)據(jù)（如直接分析柜室相對(duì)濕度和EO濃度），從而確保滅菌過(guò)程與規(guī)范

16、相符在產(chǎn)品放行時(shí)，需要審核物理滅菌過(guò)程 變量和生物指示物培養(yǎng)結(jié)果，評(píng)估滅菌 過(guò)程的符合性。常規(guī)情況下，醫(yī)療保健機(jī)構(gòu)不使用參數(shù)放行；國(guó)內(nèi)大多數(shù)滅菌站由于設(shè)備能力原因， 基本無(wú)法滿足參數(shù)放行要求。國(guó)內(nèi)對(duì)無(wú)菌產(chǎn)品放行的要求在此基礎(chǔ)上通常也要求進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè)EN ISO11135-1標(biāo)準(zhǔn)介紹EN ISO11135-1標(biāo)準(zhǔn)介紹Sterilization of health care products - Ethylene oxide - Part 1: Requirements for development, validation and routine control of a sterilizati

17、on process for medical devices醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌-環(huán)氧乙烷-第1部分： 醫(yī)療器械滅菌過(guò)程開(kāi)發(fā)、確認(rèn)和常規(guī)控制 要求EN ISO11135-1標(biāo)準(zhǔn)介紹EO滅菌過(guò)程標(biāo)準(zhǔn)章節(jié)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容（基礎(chǔ)部分）1范圍2參考標(biāo)準(zhǔn)3術(shù)語(yǔ)和定義滅菌開(kāi)發(fā)4質(zhì)量管理體系5滅菌劑特征6過(guò)程和設(shè)備特征7產(chǎn)品定義8過(guò)程定義滅菌確認(rèn)9確認(rèn)（IQ、OQ、PQ）12過(guò)程有效維護(hù)（設(shè)備維護(hù)、重新確認(rèn)、更改評(píng)估）附錄A滅菌過(guò)程致死率的確認(rèn)方法：生物指示物/生物負(fù)載方法附錄B滅菌過(guò)程致死率保守性確定方法-過(guò)度殺滅法滅菌常規(guī)控制10常規(guī)監(jiān)視與控制11產(chǎn)品滅菌放行12個(gè)章節(jié)，3個(gè)附錄EN ISO11135-1標(biāo)準(zhǔn)介紹基

18、礎(chǔ)部分：術(shù)語(yǔ)與定義術(shù)語(yǔ)與定義生物負(fù)載（Bioburden）生物指示物（BI，Biological Indicator）部分周期（Fractional cycle）半周期（Half cycle）滅菌周期（Sterilization cycle）孢子對(duì)數(shù)下降值（SLR，Spore Log Reduction）過(guò)度殺滅（Overkill）參數(shù)放行（Parametric Release）過(guò)程挑戰(zhàn)裝置/過(guò)程監(jiān)測(cè)器材（PCD，Process challenge device）生物負(fù)載（Bioburden）產(chǎn)品和/或無(wú)菌屏障系統(tǒng)表面或內(nèi)部的活 性微生物數(shù)量生物指示物（BI，Biological Indica

19、tor）對(duì)特定滅菌過(guò)程具有確定抗力的染菌測(cè)試 系統(tǒng)術(shù)語(yǔ)與定義部分周期（Fractional cycle）與滅菌過(guò)程規(guī)定的作用時(shí)間相比，作用時(shí)間減少的過(guò)程半周期（Half cycle）與滅菌過(guò)程相比，作用時(shí)間減少50%的滅菌周期滅菌周期（Sterilization cycle）在一密閉的柜室內(nèi)，包括進(jìn)行去除空氣、處理（若采 用）、加入EO、EO作用、去除EO和換氣（若采用）、及加入空氣/惰性氣體的一系列處理步驟。術(shù)語(yǔ)與定義孢子對(duì)數(shù)下降值（SLR，Spore Log Reduction）描述生物指示物在暴露于規(guī)定條件下后孢子數(shù)下降值的系數(shù)，該系數(shù)為10的對(duì)數(shù)。SLR=logN0-logNuN0-生

20、物指示物的初始孢子數(shù)；Nu-生物指示物的最終孢子數(shù)；過(guò)度殺滅（Overkill）具有與產(chǎn)品生物負(fù)載相等或較大抗力的生物指示物孢子對(duì)數(shù)下降值（SLR）至少為12的滅菌過(guò)程。術(shù)語(yǔ)與定義參數(shù)放行（Parametric Release）根據(jù)過(guò)程參數(shù)在規(guī)定公差內(nèi)的記錄，決定 產(chǎn)品無(wú)菌。（注：本過(guò)程放行不涉及使用 生物指示物）過(guò)程挑戰(zhàn)裝置/過(guò)程監(jiān)測(cè)器材（PCD，Process challenge device）對(duì)滅菌過(guò)程具有確定抗力，并用于評(píng)估過(guò) 程性能的器材。術(shù)語(yǔ)與定義EN ISO11135-1標(biāo)準(zhǔn)介紹滅菌開(kāi)發(fā)質(zhì)量管理體系滅菌劑特征過(guò)程和設(shè)備特征產(chǎn)品定義過(guò)程定義滅菌開(kāi)發(fā)質(zhì)量管理體系滅菌單位需要根據(jù)ISO

21、 13485要求建立相 適應(yīng)的質(zhì)量管理體系滅菌開(kāi)發(fā)產(chǎn)品定義引入新的或更改的產(chǎn)品、包裝或裝載方式之前，應(yīng)進(jìn)行產(chǎn)品定義。應(yīng)證明規(guī)定的滅菌過(guò)程在產(chǎn)品最難滅菌的位置仍然有 效。重復(fù)滅菌的影響；暴露于滅菌過(guò)程后產(chǎn)品的生物學(xué)安全性；EO殘留生物負(fù)載的評(píng)價(jià)及控制。滅菌開(kāi)發(fā)過(guò)程定義8.5 使用附錄A或B描述的方法之一或已確認(rèn)的證明能夠達(dá) 到所要求的無(wú)菌保證水平的替代方法確定滅菌周期的滅活 率。附錄A：生物負(fù)載法致死率的確認(rèn)附錄B：過(guò)殺法證實(shí)致死率降低12個(gè)對(duì)數(shù)值以上EN ISO11135-1標(biāo)準(zhǔn)介紹滅菌確認(rèn)滅菌確認(rèn)定義對(duì)獲得的結(jié)果進(jìn)行記錄和整理的書面程序，證明滅菌過(guò)程可持續(xù)生產(chǎn)符合預(yù)定規(guī)格的產(chǎn) 品。目的得出無(wú)

22、菌保證水平10-6的驗(yàn)證；驗(yàn)證確認(rèn)中的儀器、設(shè)備適合性；驗(yàn)證滅菌循環(huán)科學(xué)性、適合性；文件化。滅菌確認(rèn)安裝確認(rèn)（IQ）設(shè)備合格性確認(rèn)操作確認(rèn)（OQ）滅菌確認(rèn)物理性能確認(rèn)（PPQ）性能合格性確認(rèn)（PQ）微生物性能確認(rèn)（MPQ）滅菌確認(rèn)IQ目的確認(rèn)滅菌設(shè)備及其輔助系統(tǒng)的安裝符合設(shè)備 規(guī)格及設(shè)計(jì)規(guī)范；環(huán)氧乙烷的貯存條件；滅菌柜周邊的環(huán)境；滅菌柜裝載區(qū)的溫度與濕度狀況；操作區(qū)的衛(wèi)生狀況；負(fù)壓泵的供應(yīng)水；蒸汽產(chǎn)生系統(tǒng)的供應(yīng)水滅菌確認(rèn)OQ目的在指定的滅菌條件下對(duì)滅菌器進(jìn)行實(shí)際空 罐運(yùn)行，檢查其性能參數(shù)的符合性。滅菌確認(rèn)OQ步驟及方法檢測(cè)儀器的校準(zhǔn)；確認(rèn)用溫度傳感器的設(shè)置；實(shí)際運(yùn)行3次；數(shù)據(jù)處理、分析。檢查項(xiàng)

23、目罐內(nèi)溫度分布（平均值3內(nèi)）；抽真空到達(dá)的真空度及速度；加壓后氣密性檢查；EO氣體導(dǎo)入壓力上升及到達(dá)速度；排氣時(shí)的減壓速度與減壓度；復(fù)壓時(shí)壓力上升及速度。滅菌罐溫度檢查示意圖滅菌確認(rèn)PQ目的使用產(chǎn)品（實(shí)際產(chǎn)品或替代產(chǎn)品）證明設(shè)備（滅菌器、輔助系統(tǒng)及滅菌工藝）能持續(xù) 按照預(yù)定的準(zhǔn)則運(yùn)行，滅菌過(guò)程能夠生產(chǎn)無(wú)菌產(chǎn)品。PQ實(shí)施的對(duì)象為產(chǎn)品滅菌設(shè)備。樣品要求PQ所用產(chǎn)品應(yīng)能代表常規(guī)滅菌的產(chǎn)品，并應(yīng)根據(jù)最具挑戰(zhàn)性的常規(guī)產(chǎn)品進(jìn)行設(shè)定；如果使用產(chǎn)品外的其他材料，則材料應(yīng)與該產(chǎn)品至少具有相同的滅菌過(guò)程挑戰(zhàn)性；所用的產(chǎn)品應(yīng)與日常滅菌的產(chǎn)品包裝相同；如果裝載在確認(rèn)過(guò)程中被重復(fù)使用，裝載代表物應(yīng)經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)慕馕龊屠鋮s步

24、驟。確認(rèn)項(xiàng)目微生物性能合格性確認(rèn)（MPQ）物理性能合格性確認(rèn)（PPQ）產(chǎn)品合格性確認(rèn)什么情況下進(jìn)行？引入新的或更改的產(chǎn)品、包裝、裝載方式、設(shè)備或過(guò)程參數(shù)時(shí)；滅菌確認(rèn)PQ/MPQMPQ應(yīng)證實(shí)規(guī)定的無(wú)菌要求已得到滿足。工藝過(guò)程裝載設(shè)備無(wú)菌產(chǎn)品滅菌確認(rèn)PQ/MPQ方法生物負(fù)載法：致死率的確認(rèn)直接計(jì)數(shù)法/列舉法（附錄A.3.1）部分陰性法（附錄A.3.2&A.3.3）過(guò)殺法：證實(shí)致死率降低12個(gè)對(duì)數(shù)值以上半周期法（附錄B.1.2 a）周期計(jì)算法（附錄B.1.2 b）方法基礎(chǔ)運(yùn)行次數(shù)半周期法理論的初始污染菌為1061次有存活（部分周期or短周期）3次半周期，不能有存活周期計(jì)算法已知的初始污染菌&致死率基

25、于使用何種方法（見(jiàn)部分陰性法）直接計(jì)數(shù)法已知的初始污染菌1次沒(méi)有滅菌劑1次達(dá)到4個(gè)對(duì)數(shù)值的降低3次介于上述兩點(diǎn)部分陰性法已知的初始污染菌基于使用何種方法A3.2 HSKP（Hocomb-Spearman Karber）； A3.3 SMCP （Stumbo Murphy Cochran）滅菌確認(rèn)PQ/MPQ滅菌確認(rèn)PQ/MPQ/半周期法滅菌確認(rèn)PQ/MPQ/半周期法續(xù)上頁(yè)圖摘自：ISO14161，Annex A滅菌確認(rèn)PQ/MPQ/半周期法生物負(fù)載的確 認(rèn)生物指示物（BI）的選擇與確認(rèn)PCD的設(shè)置生物指示物 BI應(yīng)符合EN ISO11138-1/2的要求菌株：枯草芽孢桿菌菌數(shù)：大于1.0*10

26、6抗力：一定條件下，D值應(yīng)介于2.65.8min之 間（60030mg/L EO濃度，6010 %RH， 541）滅菌確認(rèn)PQ/MPQ/半周期法BI的類型菌片、菌管、自含式菌管滅菌確認(rèn)PQ/MPQ/半周期法過(guò)程挑戰(zhàn)裝置/過(guò)程監(jiān)測(cè)器材（PCD）對(duì)滅菌過(guò)程具有確定抗力，并用于評(píng)估過(guò)程性 能的器材。是放入了挑戰(zhàn)性微生物的器材或試驗(yàn)包，這個(gè) 器材或試驗(yàn)包比一般產(chǎn)品更難滅菌。滅菌確認(rèn)PQ/MPQ/半周期法更難滅菌的確定方法： 理論分析法：對(duì)結(jié)構(gòu)/材料進(jìn)行理論分析，得出顯而易見(jiàn)的結(jié)論； 實(shí)驗(yàn)法：可以在實(shí)驗(yàn)條件下，采取一個(gè)等同或弱化的滅菌條件，確認(rèn)微生物存活的差異。PCD設(shè)置方法示例：將挑戰(zhàn)性微生物放在注射

27、器的環(huán)、擋圈、扣眼或 肋條間；將挑戰(zhàn)性微生物放在官腔中間，然后用粘結(jié)溶劑 或接頭重新連接，恢復(fù)產(chǎn)品的完整性；將挑戰(zhàn)性微生物放在一個(gè)界面內(nèi)；將挑戰(zhàn)性微生物放在封套或包裝物內(nèi)。注：挑戰(zhàn)性微生物可直接或間接在產(chǎn)品上染菌。滅菌確認(rèn)PQ/MPQ/半周期法PCD的分類IPCD（Internal）：位于產(chǎn)品或待滅菌物品內(nèi)的PCD；EPCD（External）：位于箱子或盒子內(nèi)、被滅菌物品外表面上的箱 子/盒子之間、盒子外表面或支持被滅菌物品的框架上的PCD。（常 規(guī)過(guò)程中使用的EPCD的方式應(yīng)與過(guò)程確認(rèn)中使用的一致。）注：詳見(jiàn)ISO/TS 11135-2:20088.6 c.滅菌確認(rèn)PQ/MPQ/半周期法采

28、用原則： 常規(guī)滅菌中，箱子/產(chǎn)品內(nèi)部的菌片去放實(shí)際非常不方便。 ISO11135給出了兩種PCD，若滅菌確認(rèn)中證明等效，則常規(guī)過(guò)程中可以采用方便取放的方式：IPCD 與EPCD 等效性證明可利用在短周期中進(jìn)行同時(shí)作用來(lái)評(píng)估IPCD 和EPCD的比較性抗性；在于IPCD對(duì)比，證明EPCD的抗性相等或較 大；如果EPCD的相對(duì)抗性小于IPCD的相對(duì) 抗性（不大于20%），可將PCD視為等效。滅菌確認(rèn)PQ/MPQ/半周期法物理性能確認(rèn) Physical performance qualification應(yīng)證實(shí)在整個(gè)過(guò)程中，所有規(guī)定的接受準(zhǔn)則的重 現(xiàn)性滅菌確認(rèn)PQ/PPQ重現(xiàn)性如何得到證明？序號(hào)過(guò)程步

29、驟項(xiàng)目方法1預(yù)處理在預(yù)處理結(jié)束時(shí)，滅菌裝載的溫度及濕度都在 預(yù)定的范圍內(nèi)在裝載內(nèi)測(cè)量2裝載在預(yù)處理結(jié)束時(shí)及時(shí)開(kāi)始滅菌前的時(shí)間間隔應(yīng) 在預(yù)定的范圍內(nèi)比對(duì)確認(rèn)記錄的時(shí)間數(shù)據(jù)3滅菌環(huán)氧乙烷被氣態(tài)的加入滅菌柜中測(cè)量氣體加入溫度4滅菌由于環(huán)氧乙烷氣體加入導(dǎo)致壓力升高在預(yù)定的 范圍內(nèi)在氣體加入階段測(cè)量壓力數(shù)據(jù)5滅菌滅菌柜內(nèi)的環(huán)氧乙烷氣體濃度在預(yù)定的范圍內(nèi)稱重藥罐加藥前后的重量差 測(cè)量進(jìn)行柜體中的氣體體積 直接測(cè)量柜內(nèi)氣體濃度6滅菌在滅菌暴露階段，裝載產(chǎn)品的溫度在預(yù)定的范 圍內(nèi)測(cè)量裝載產(chǎn)品的溫度7換氣在換氣階段，裝載產(chǎn)品的溫度在預(yù)定的范圍內(nèi)測(cè)量裝載產(chǎn)品的溫度滅菌確認(rèn)PQ/PPQPPQ過(guò)程應(yīng)運(yùn)行幾次？為證實(shí)過(guò)

30、程的重現(xiàn)性，至少有3次運(yùn)行；如果在MPQ過(guò)程中運(yùn)行了3次半周期，則至少 再運(yùn)行1次包含完整暴露時(shí)間的運(yùn)行；滅菌確認(rèn)PQ/PPQ在評(píng)估PPQ試驗(yàn)運(yùn)行時(shí)，應(yīng)注意哪些方面？溫濕度探頭的數(shù)目是否符合要求？探頭（溫濕度）是否位于裝載包裝內(nèi)，并且置 于最惡劣的位置（最難滅菌位置）？產(chǎn)品裝載的溫度是否在規(guī)定的范圍內(nèi)？滅菌確認(rèn)PQ/PPQ產(chǎn)品初始污染菌測(cè)試選擇合適的BI/PCD運(yùn)行1次短周期運(yùn)行3次半周期運(yùn)行2次全周期建立滅菌重現(xiàn)性產(chǎn)品內(nèi)溫濕度分布產(chǎn)品性能測(cè)試包裝性能測(cè)試EO/ECH殘留測(cè)試性能確認(rèn)（半周期法）微生物性能確認(rèn)（MPQ）物理性能確認(rèn)（PPQ）無(wú)菌保證水平鑒定滅菌確認(rèn)PQ/半周期法總結(jié)IQ 應(yīng)證實(shí)

31、滅菌設(shè)備及附屬的物件已經(jīng)按 照其規(guī)范要求正確的供應(yīng)及安裝；OQ 應(yīng)證實(shí)安裝的設(shè)備在規(guī)定允許的偏差 范圍內(nèi)按照指定的程序運(yùn)行；PQ 應(yīng)證實(shí)設(shè)備連貫的按照預(yù)先設(shè)定的標(biāo) 準(zhǔn)運(yùn)行，整個(gè)過(guò)程可以生產(chǎn)出無(wú)菌的產(chǎn)品。滅菌確認(rèn)EO滅菌過(guò)程的設(shè)計(jì)確定產(chǎn)品初始污染菌水平；基于污染菌抗性-D值，確認(rèn)適用的生物 指示劑；定義最惡劣的產(chǎn)品/狀況；選擇使用下述微生物學(xué)測(cè)試：建立殺滅曲線（killing curve-直接計(jì)數(shù)/列舉法）使用部分陰性（fraction negative）法；半周期（half-cycle）法滅菌確認(rèn)滅菌確認(rèn)再確認(rèn)多長(zhǎng)時(shí)間做一次再確認(rèn)？產(chǎn)品沒(méi)有發(fā)生任何變化，需不需要做再確 認(rèn)？再確認(rèn)需要做那些項(xiàng)目

32、？滅菌確認(rèn)再確認(rèn)多長(zhǎng)時(shí)間做一次再確認(rèn)？至少一年一次應(yīng)當(dāng)至少每年一次對(duì)驗(yàn)證、后續(xù)重新驗(yàn)證 數(shù)據(jù)和常規(guī)加工數(shù)據(jù)進(jìn)行審核，應(yīng)當(dāng)確定 和記錄重新確認(rèn)的范圍。審核程序應(yīng)當(dāng)形 成文件。滅菌確認(rèn)再確認(rèn)產(chǎn)品沒(méi)有發(fā)生任何變化，需不需要做再確 認(rèn)？需要滅菌確認(rèn)再確認(rèn)再確認(rèn)需要做那些項(xiàng)目？基于一定的前提，可以選擇：全面確認(rèn)；不需要物理或微生物再驗(yàn)證；小規(guī)模微生物性能驗(yàn)證滅菌確認(rèn)再確認(rèn)再確認(rèn)前提應(yīng)至少對(duì)以下內(nèi)容進(jìn)行回顧/試驗(yàn)：產(chǎn)品設(shè)計(jì)、制造和包裝材料、PCD、供應(yīng)商、制造區(qū)域和設(shè)施、裝 載配置或制造過(guò)程是否發(fā)生可能影響產(chǎn)品無(wú)菌的重大變化；產(chǎn)品生物負(fù)載變化趨勢(shì)；溫度分布和滅菌柜操作研究證明自上次鑒定以來(lái)是否發(fā)生重大變化

33、；溫度分布和再循環(huán)檢查表明預(yù)處理柜或通風(fēng)區(qū)自上次鑒定以來(lái)是否發(fā)生重大變化；自上次確認(rèn)醫(yī)療的滅菌過(guò)程歷史證明具有可重復(fù)性；更改控制和預(yù)防性維護(hù)項(xiàng)目表明滅菌設(shè)備沒(méi)有發(fā)生可能影響過(guò)程的 重大變更；滅菌過(guò)程沒(méi)有發(fā)生可能影響產(chǎn)品無(wú)菌的變更；i)如果滅菌過(guò)程規(guī)范發(fā)生了變更，則滅菌過(guò)程的重新鑒定應(yīng)當(dāng)包括確 定產(chǎn)品滿足ISO10993-7規(guī)定的EO殘留量范圍要求；再確認(rèn)前提再確認(rèn)應(yīng)包裝對(duì)柜室性能和年內(nèi)工程變化的審查，從而確 保原IQ和OQ結(jié)果仍然有效，審查應(yīng)包括：預(yù)處理區(qū)的溫濕度曲線（若采用）；實(shí)際空柜室濕度曲線；通風(fēng)區(qū)溫度（若采用）；另外，當(dāng)設(shè)備性能出現(xiàn)不利趨勢(shì)或無(wú)菌性失效時(shí)，即時(shí)符 合過(guò)程規(guī)范也應(yīng)進(jìn)行檢查

34、，以確定再驗(yàn)證是否得以保證。滅菌專家應(yīng)根據(jù)審查結(jié)果，確定所需要的物理和微生物再 驗(yàn)證范圍。滅菌確認(rèn)再確認(rèn)注意點(diǎn)：如果重新鑒定中發(fā)現(xiàn)有重大變更，則可能 需要重新實(shí)施IQ、OQ和PQ的一些項(xiàng)目。如果采用參數(shù)放行，以下額外要求適用：重新驗(yàn)證應(yīng)至少每年一次；重新驗(yàn)證應(yīng)包括通過(guò)微生物學(xué)研究確認(rèn) 規(guī)定的SAL。滅菌確認(rèn)再確認(rèn)在發(fā)生以下情況是需要進(jìn)行全面確 認(rèn)：滅菌器大規(guī)模維修；構(gòu)造、地點(diǎn)或環(huán)境變化；不明原因無(wú)菌性失效；EO供應(yīng)或交付、稀釋液或柜室裝載模式 發(fā)生變化。滅菌確認(rèn)再確認(rèn)不需要進(jìn)行物理或微生物再鑒定在產(chǎn)品、包裝、設(shè)備/服務(wù)和過(guò)程未發(fā)生 變化時(shí)，柜室性能和工程審查合格，并且 在期間階段中日常滅菌過(guò)程

35、運(yùn)行可靠的情 況下，可以通過(guò)專業(yè)判斷來(lái)決定在下一次審查之前不需要進(jìn)行物理或微生物再鑒定。滅菌確認(rèn)再確認(rèn)小規(guī)模微生物性能鑒定在某些情況下可能需要，例如核實(shí)BI相對(duì)于 產(chǎn)品生物負(fù)載的持續(xù)適用性，或在經(jīng)過(guò)規(guī)定 的時(shí)間間隔后，提供證據(jù)證明自從前一次（再）確認(rèn)研究后未在無(wú)意間發(fā)生變化。一般情況下（至少）應(yīng)包括一次短周期或半 周期運(yùn)行，包括被滅菌物品的溫度和濕度測(cè) 量。滅菌確認(rèn)再確認(rèn)EN ISO11135-1標(biāo)準(zhǔn)介紹常規(guī)控制&滅菌放行常規(guī)監(jiān)視與控制常規(guī)監(jiān)視和控制應(yīng)記錄并保存每一滅菌周期數(shù)據(jù)，以證明已 達(dá)到滅菌過(guò)程的要求。預(yù)處理階段氣體作用階段通風(fēng)階段如果采用參數(shù)放行，則應(yīng)額外記錄和保留以下數(shù)據(jù)：在滅菌周期

36、階段，至少?gòu)膬蓚€(gè)位置測(cè)定的柜內(nèi)溫度；在處理階段，直接測(cè)定的柜內(nèi)濕度；在規(guī)定時(shí)間間隔直接分析柜內(nèi)氣體測(cè)定的EO濃度值和公差，充分驗(yàn) 證作用時(shí)間內(nèi)的所需條件。滅菌放行EN ISO11135-1允許的兩種放行方式參數(shù)放行產(chǎn)品滅菌放行滅菌放行參數(shù)放行參數(shù)放行是在不使用BI的情況下將產(chǎn)品作 為無(wú)菌產(chǎn)品從滅菌環(huán)節(jié)放行的方法，它所 依賴的是物理處理參數(shù)符合全部規(guī)范的證 明。因此，應(yīng)該收集其他處理參數(shù)的數(shù)據(jù)（如直接分析柜室相對(duì)濕度和EO濃度），從而確保滅菌過(guò)程與規(guī)范符合。滅菌放行產(chǎn)品滅菌放行在產(chǎn)品放行時(shí)，需要審核物理滅菌過(guò)程變量和 生物指示物培養(yǎng)結(jié)果（若采用），評(píng)估滅菌過(guò) 程的符合性。滅菌過(guò)程參數(shù)菌片培養(yǎng)結(jié)果滅菌放行滅菌過(guò)程參數(shù)菌片培養(yǎng)結(jié)果無(wú)菌檢測(cè)周期：7d為什么要做？行標(biāo)、企標(biāo)逐批檢驗(yàn)要 求；藥監(jiān)監(jiān)察習(xí)慣周期：14d公司目前所采用