1、自動頂空氣相色譜法準(zhǔn)確測定啤酒揮發(fā)性組分關(guān)鍵技術(shù)的討論王莉娜 崔巍偉燕京啤酒技術(shù)中心.前言 目前各大啤酒廠家對啤酒中微量的香味組分含量越來越注重，隨著科技的開展，不斷有新技術(shù)被引入到啤酒的分析中。測定啤酒中的香味組分, 國內(nèi)曾先后有以下一些方法:.吹掃捕集-毛細(xì)管氣相色譜法;填充柱氣相色譜法;頂空-毛細(xì)管氣相色譜法;固相微萃取-毛細(xì)管氣相色譜法;固相萃取-毛細(xì)管氣相色譜法.頂空-毛細(xì)管氣相色譜法的優(yōu)點儀器自動化程度高無需樣品前處置操作簡便靈敏度高.實驗中發(fā)現(xiàn)的問題 隨著時間的推移及頂空進(jìn)樣和色譜條件的緩慢變化，分析數(shù)據(jù)逐漸會出現(xiàn)漂移 ，需經(jīng)常做校正。.實驗部分1儀器HP-6890氣相色譜儀，帶

2、分流/不分流進(jìn)樣口，配FID檢測器；HP-7694E頂空進(jìn)樣器，任務(wù)站采用HPG2070AA化學(xué)任務(wù)站。色譜柱： DB-WAXETR(30m0.53mm i.d. 1.0m) .2.實驗條件頂空自動進(jìn)樣條件：溫度參數(shù)：樣品瓶平衡溫度，50；定量環(huán)，100；傳輸管線，100；壓力參數(shù)：樣品瓶充壓壓力，20.2psi；時間參數(shù)：樣品瓶平衡時間，25min；樣品瓶充壓時間，0.13min；定量環(huán)填充時間，0.13min；定量環(huán)平衡時間，0.2 min；進(jìn)樣時間0.5min；.色譜條件：溫度：進(jìn)樣口，150；檢測器，200；柱箱初溫為35，以10/min的速度程升至180，在180堅持5min；載氣為

3、高純氮氣，柱流量5.0ml/min恒流；氫氣30ml/min；空氣400ml/min；進(jìn)樣方式為分流進(jìn)樣，分流比為1：1。.討論1儀器靈敏度及分別條件確實定2HS與GC載氣流量的匹配3分流與不分流的比較4內(nèi)標(biāo)與外標(biāo)的選擇.儀器靈敏度確實定 氣相色譜儀的性能是整個方法的根底，用工具包內(nèi)的 C1416標(biāo)液 ，按闡明書引薦的方法來測定儀器靈敏度，假設(shè)三個峰的峰面積均符合儀器規(guī)格，那么闡明FID靈敏度正常 .分別條件確實定 色譜柱是影響組分分別的重要要素，要視被分析對象性質(zhì)選擇適宜的色譜柱。由于待分析的啤酒組分屬于極性化合物，所以要相應(yīng)選擇適宜型號的極性柱用以進(jìn)展分析效果較好。同時，對各組分峰的分別條

4、件，應(yīng)根據(jù)儀器特點仔細(xì)進(jìn)展優(yōu)化，盡能夠?qū)崿F(xiàn)彼此的完全分別。.HS與GC載氣流量的匹配 固定色譜條件下，HS 具有不同 流量時，會對峰的分別產(chǎn)生重要影響。.V柱:V放組分峰面積半峰寬A乙醛A正丁醇W乙醛W正丁醇1：341.6102.40.05800.04351：435.679.80.05120.04191：530.268.50.04750.0409GC柱流量和放空流量不同比值時的靈敏度與半峰寬比較.分流與不分流的比較 采用分流進(jìn)樣方式，雖然靈敏度有一定損失，但仍可以滿足實驗要求，而且反復(fù)性很好，所以在實驗時采用了分流進(jìn)樣方式。方式優(yōu)點缺點分流靈敏度較低峰分離度好不分流靈敏度高乙醇附近峰擴(kuò)展嚴(yán)重.

5、內(nèi)標(biāo)與外標(biāo)的比較方式優(yōu)點缺點外標(biāo)對取樣精度要求不高，操作簡單HS載氣控制不穩(wěn)定，數(shù)據(jù)緩慢漂移內(nèi)標(biāo)數(shù)據(jù)穩(wěn)定對取樣與添加內(nèi)標(biāo)要求較高；酒液中少量的正丁醇對結(jié)果會有影響.內(nèi)標(biāo)與外標(biāo)的比較 內(nèi)標(biāo)物質(zhì)采用的是正丁醇，由于啤酒中本身含有少量的正丁醇 ，這對分析結(jié)果會產(chǎn)生一些影響。但根據(jù)酵母代謝機(jī)制及長期外標(biāo)法跟蹤的結(jié)果闡明，啤酒中含有的正丁醇的量最大不會超越2mg/L，而參與的內(nèi)標(biāo)的量為40mg/L，由此引起的誤差小于5%，在可接受的范圍內(nèi)。從長期內(nèi)標(biāo)法跟蹤結(jié)果來看，內(nèi)標(biāo)法可以消除由于實驗條件的微小改動而帶來的對結(jié)果的影響，數(shù)據(jù)更穩(wěn)定。.啤酒樣品典型色譜圖1.乙 醛 2.二甲基硫 3.乙酸乙酯 4.乙酸異

6、丁酯 5.正丙醇 6.異丁醇 7.乙酸異戊酯 8.正丁醇內(nèi)標(biāo) 9.異戊醇 10.己酸乙酯 11.辛酸乙酯.表1.樣品反復(fù)性測定結(jié)果(mg/L)樣品反復(fù)性測定結(jié)果組分稱號測定結(jié)果規(guī)范偏向變異系數(shù)(%)123456平均乙醛6.466.997.146.846.516.816.790.273.9二甲基硫0.0280.0280.0280.0290.0270.0260.0280.0014乙酸乙酯23.2723.5623.8824.0523.223.6723.610.331.4乙酸異丁酯0.0780.0790.080.0780.0760.0780.0780.0011.7正丙醇12.2612.1112.231

7、1.9511.9511.9112.070.151.3異丁醇11.8811.891211.8911.6811.7511.850.111乙酸異戊酯2.872.932.992.992.862.922.930.0561.9異戊醇67.7867.9968.7267.8766.5467.0467.660.771.1己酸乙酯0.190.190.20.20.190.190.190.013.4辛酸乙酯0.130.140.130.130.120.120.130.014.9.樣品反復(fù)性測定結(jié)果 由表1可以看出，對啤酒中10種揮發(fā)性香味組進(jìn)展反復(fù)性測定，其變異系數(shù)均小于5%，結(jié)果反復(fù)性很好，已到達(dá)了國外文獻(xiàn)報道的較好程度。另外我們從表中還可看出，醇類物質(zhì)的變異系數(shù)普遍低于其它組分，這一方面是由于啤酒中醇類物質(zhì)本身的含量較高，另一方面選用正丁醇作內(nèi)標(biāo)，致使測定過程中任何條件變化的影響也要