1、第六章 檢疫性植物有害生物掌握危險性植物有害生物的檢疫處理 了解危險性植物病原生物檢疫 了解危險性大的植物害蟲檢疫 了解危險性雜草檢疫 第一節(jié) 植物有害生物的檢疫處理檢疫處理(QuarantineTreatment)是指采用物理或化學的方法殺滅植物、植物產品及其他檢疫物中有害生物的法定程序。 檢疫處理一般由檢疫機關通知貨主或其代理人實施，檢疫機關對處理過程實施監(jiān)督，以確保處理的有效性一、 化學處理法 化學處理法指利用化學藥劑對有害生物進行除害處理的方法。 化學處理的方法有熏蒸、噴霧、涂抹、浸泡等等。植物檢疫中，最常用的是熏蒸處理，其次是噴霧法與浸泡法。（一）熏蒸處理 指利用熏蒸劑產生的有毒氣體

2、在密閉設施或容器中殺死有害生物。1.適用范圍適于運輸工具、貯藏所、加工廠等的消毒。適于處理糧食種子、植物無性繁殖材料、水果、蔬菜、其它動植物產品、生長期植株、工業(yè)品、土壤等。2.熏蒸方式常壓熏蒸：常用于帳幕、倉庫、車廂、船艙、筒倉等可密閉的容器內 真空熏蒸：真空熏蒸是在減壓條件下應用熏蒸劑的過程。它包括將物品放于熏蒸室內，抽掉大部分空氣，并用一小部分含有毒氣的空氣取代等過程。真空熏蒸有利于熏蒸劑蒸氣分子迅速的擴散，滲透到熏蒸物體內，因而，可大大減少熏蒸殺蟲滅菌的時間 參觀真空熏蒸循環(huán)設備影響熏蒸效果的主要因素 溫度 濕度 密閉程度 貨物的類別和堆放形式 藥劑的物理性能 昆蟲的蟲態(tài)和營養(yǎng)生理狀況

3、 3.熏蒸劑常用熏蒸劑有溴甲烷：在常溫下是無色無味的氣體 ，化學性質比較穩(wěn)定，不易被酸堿物質所分解 ，在常壓或真空減壓下廣泛應用于各種植物、植物材料和植物產品、倉庫、面粉廠、船只、車輛等運輸工具以及包裝材料、木材、建筑物、衣服、文史檔案資料等熏蒸 主要損害中樞神經對皮膚、粘膜、腎、肝、肺均有損傷。磷化鋁：磷化鋁原藥為淺黃色或灰綠色松散固體，吸潮后緩慢地釋放出磷化氫。應用于谷物、油料、飼料、種子、藥材、堅果、干果、茶葉、面粉、香料、糖果、可可豆、咖啡豆、麻袋等熏蒸。能和所有金屬反應 ，當溫度超過60時會立即在空氣中自燃。 硫酰氟：氯化苦 環(huán)氧乙烷 4.優(yōu)點與局限性優(yōu)點：快速、高效，費用低，殘毒問

4、題相對較輕。局限性：須在可密閉場所或容器內進行，毒性較高。（二）噴霧主要用于運輸工具、貯運場所的消毒：消毒藥和農藥依法對國際航班消毒主要用于種子、苗木或其它繁殖材料（接穗、球根、塊莖等）：農藥（三）浸泡二、物理處理法（一）高溫處理 高溫處理即熱處理，包括干熱處理、熱水處理、蒸汽熱處理、微波加熱處理與高頻加熱處理。 其原理為：利用植物材料與有害生物耐熱性的差異，選擇適宜的高溫和處理時間以殺死有害生物而不損害植物材料。1.干熱處理 主要用于處理蔬菜種子，對多種種傳病毒、細菌和真菌有除害效果，但處理不當可能降低種子萌發(fā)率。也用于處理原糧、飼料、面粉、包裝袋、干花、草制品、泥炭蘚和土壤等。巴西豆象：5

5、5 處理1h，或60 處理0.5h。松墨天牛：60 處理12h。局限性：不能用于生活的植物材料。2.蒸汽熱處理 采用蒸汽熱處理爐。用以處理水果和蔬菜，也用于種子、苗木消毒。主要用于處里實蠅。水果熱蒸汽處理設施包括三部分：處理前的分級、清潔、整理車間；蒸汽熱處理室；處理后的降溫、去濕、包裝車間。蒸汽熱處理的主要設備：熱飽和蒸汽發(fā)生裝置、蒸汽分配管、氣體循環(huán)風扇、溫度監(jiān)測系統(tǒng)。3. 熱水處理 用于處理植物種子和無性繁殖材料，殺死病原真菌、細菌、線蟲和某些昆蟲。熱水浸泡處理巴西豆象：50，處理1h或52處理0.5h。4.微波加熱處理 適于攜帶物檢疫與郵寄物檢疫中處理量較小的非種用材料。優(yōu)點：升溫快，

6、介質內部溫度往往高于外部，處理快速、安全，效果可靠，費用低。5.高頻感應加熱廣泛用于處理糧食、種子、干果、竹木制品、中草藥、貴重食品等多種農副產品。受熱均勻。不宜用于含水量高于害蟲含水量的物品，如鮮果、蔬菜等。（二）低溫處理1.速凍 在17或更低的溫度下急速冰凍被處理的農產品。常用于加工用水果和蔬菜，殺滅害蟲。 處理過程：處理時先迅速降溫到17以下，并保持一定時間，處理期間溫度不得高于6。2. 冷處理 指應用持續(xù)的不低于冰點的低溫控制害蟲。多用于處理攜帶實蠅的熱帶水果。處理的時間常取決于冷藏的溫度與害蟲的種類。如：實蠅類在0 或0 以下處理1013d即可死亡；梅象在0 下需處理14d。 冷處理

7、通常是在冷藏庫內（包括陸地冷藏庫和船艙冷藏庫）進行。處理的要求包括嚴格控制處理的溫度和時間。 低溫處理前或處理后配合使用溴甲烷熏蒸可縮短處理時間，并保證除害效果。（三）輻射：原理射線直接作用于大分子物質例如DNA，通過電離和激發(fā)使其受到損傷射線與細胞中其他原子或分子特別是水分子的作用，產生自由基使生物活性受到損傷 （四）氣調處理：原理：給微生物以不適應的生長環(huán)境。充氮氣、CO2、惰性氣體等小 結檢疫處理的與措施有多種，除害處理最為常見。除害處理方法主要分化學處理與物理處理法。化學處理以熏蒸法最常用。目前主要的熏蒸劑包括溴甲烷和磷化鋁。熏蒸方法有常壓熏蒸、真空熏蒸物理處理一般對環(huán)境安全、無污染，

8、主要利用溫度進行除害。分為高溫處理與低溫處理。 每種方法都有其優(yōu)點與局限性，因此，適用的范圍有所不同，檢疫處理中需要科學選用。第二節(jié) 危險性植物病原生物檢疫 植物檢疫機構對外植物檢疫工作由國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局下屬的出入境檢驗檢疫機構承擔全國農業(yè)植物檢疫工作農業(yè)部下屬植物檢疫（植保植檢）機構責管理和實施全國的森林植物檢疫工作由國家林業(yè)局下屬的森林植物檢疫機構負責實施檢疫性有害生物檢疫性病原生物：真菌、原核生物、病毒及類病毒、線蟲等檢疫性害蟲：昆蟲、螨蟲、軟體動物等檢疫性雜草：假高粱、毒麥、兔絲子、列當等中華人民共和國進境植物檢疫性有害生物名錄共計435種（昆蟲146種，軟體動物6種，真菌12

9、5種，原核生物58種，線蟲20種，病毒及類病毒39種，雜草41種）危險性植物病原生物1、植物病原真菌2、植物病原細菌3、植物病毒4、植物病原線蟲一、植物病原真菌檢疫（一）植物檢疫性真菌常見檢疫檢驗技術直接檢驗染色檢驗洗滌檢驗保濕萌芽檢驗分子生物學實時定量PCR血清學方法1.直接檢驗適用范圍：具明顯癥狀的植物材料主要工具：放大鏡或解剖鏡，主要是利用肉眼現場快速初檢2.染色檢驗法原理：染病的組織，或病原菌本身，經特殊的化學藥品處理后，可帶有特殊的顏色例如：馬鈴薯癌腫病薯塊上癌瘤不明顯時，可做徒手切片，加1滴1的“藏花紅”染色液，健康組織細胞壁呈亮紅色，感病組織細胞壁呈暗紅色。3.洗滌檢驗法原理：種

10、子表面常附著真菌孢子，將一定量的樣品放入容器內，加一定量的無菌水，充分振蕩，可使病菌孢子洗滌下來，而后離心后，可沉淀，鏡檢沉淀物可確定其種類和數量。4.保濕萌芽檢驗原理：種子攜帶的真菌，無論外表黏附的還是潛伏種子內的，在種子萌發(fā)階段即可開始侵染，甚至有些在種子還未萌發(fā)時就可長出病菌。分子生物學實時定量PCR血清學方法見動物檢疫技術（二）常見真菌病小麥矮腥黑穗病小麥印度腥黑穗病大豆疫病煙草霜霉病馬鈴薯癌腫病小麥矮腥黑穗病分布：是麥類黑穗病中危害最大、防治最難的一種病害，它于1847年及1860年先后發(fā)現于捷克和美國，在全世界范圍內傳播和蔓延，目前已在歐洲、北美、南美、澳洲、亞洲、非洲等40多個國

11、家發(fā)生。寄主：禾本科5個族，18個屬，65個種。主要栽培植物有小麥、大麥、黑麥，冰草屬為天然發(fā)病的主要禾草寄主。危害性：1962年美國減產68.7，1972年西部7州，平均減產17，損失1. 2億Kg。菌癭可存活10年以上。田間檢疫要點系統(tǒng)侵染性，表現為：病株特矮（1/31/2），病粒特硬，菌孢子因含有毒物質三甲胺，有魚腥臭味。實驗室檢疫要點直接檢查：放大鏡（菌癭）洗滌檢查：50g100ml無菌水，振蕩5min，1015ml離心3min，定容，制片觀察。冬孢子自發(fā)熒光實驗：TCK孢子于熒光顯微鏡下有自發(fā)熒光現象。冬孢子萌發(fā)試驗：5 、17 下，光照。矮腥孢子5 下21d開始萌發(fā)， 17 不萌發(fā)

12、。PCR技術：防治措施進口小麥和原糧必須進行檢疫，病麥需除害處理帶菌小麥原糧必須集中在幾個規(guī)定有條件的口岸加工滅菌處理。采用高溫滅菌法，13030min或120 1h。病區(qū)用40五氯硝基苯，種子重量0.5的藥量拌種，并在播種溝內施藥處理。或單用1的藥量拌種重病地應輪作倒茬或改種春小麥。冬小麥晚播可減輕發(fā)病。種植抗病品種。二、植物病原細菌檢疫（一）植物病原細菌檢疫檢驗技術直接檢測：直觀檢驗和生長檢驗間接檢測 活菌檢測 免疫吸附分離法 噬菌體檢驗 血清學檢測 分子生物學方法1、活菌檢測分離培養(yǎng)法：營養(yǎng)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基或鑒別培養(yǎng)基分離純化得到的細菌濃縮接種及離體葉檢測：提取液濃縮接種感病植物，觀測

13、發(fā)病情況。2.免疫吸附分離法原理：結合血清學與平板分離技術，利用與抗原高度親和性的抗體，來捕獲目標細菌，樣本中其他細菌均被沖洗掉，再將目標細菌轉移或釋放到培養(yǎng)基上生長。方法：平皿免疫吸附評價測定法和免疫吸附稀釋培養(yǎng)法 平皿免疫吸附評價測定法簡略流程如下：常用溶入丙酮的硝酸纖維素或指甲油作包被3.噬菌體檢驗原理：噬菌體侵染細菌，裂解寄主細胞，在液體培養(yǎng)時，會使渾濁的細菌懸浮液變清，在固體平板上培養(yǎng)，則出現許多邊緣整齊、透明光亮的噬菌斑。噬菌體具有專化性，利用此特點，可鑒別細菌的種類。4、血清學檢驗血清學檢驗分子生物學方法見動物檢疫技術（二）常見細菌病梨火疫病玉米細菌性枯萎病柑橘黃龍病椰子致死黃花

14、病梨火疫病 梨火疫病是第一個被確定的植物細菌病害，由梨火疫病菌引起的，主要分布于北美洲于西北歐，中歐、地中海、東南歐及大洋州和亞洲也有分布。大約40多個國家。梨火疫病的地理分布寄主： 梨火疫病菌寄主范圍很廣，能為害梨、蘋果、山楂、李等40多個屬220多種植物，大部分屬薔薇科。危害性： 仁果類果樹的一種毀滅性病害。一棵多年生的梨和蘋果樹發(fā)病后可在幾星期內死亡田間檢疫要點花:侵染后變深褐色，枯萎。葉片:從葉緣沿葉脈擴展，先呈水浸狀，后黑褐色。果實：病部褐色凹陷，擴展到全果，潮濕時病部生粘稠的細菌溢，初乳白色，后紅褐色。病枝:葉片凋萎，幼果僵化，但病葉病果不脫落，遠望似火燒狀，故稱火疫病。實驗室檢疫

15、要點分離培養(yǎng)可采用選擇性培養(yǎng)基和鑒別性培養(yǎng)基進行致病性實驗梨火疫病菌致病性試驗可用梨片或梨嫩枝測定，亦可用煙草過敏反映檢查。將細菌懸液，注入煙草葉片或接種于1cm厚梨片，28下培養(yǎng)，一般1012小時后，煙草注射區(qū)出現白色壞死斑。13天后，梨片或枝條上出現白色菌膿，則可確診血清學檢驗：免疫熒光、ELISA、凝集實驗分子生物學方法：核酸探針和PCR技術檢疫和防治 1.嚴格檢疫，禁止從疫區(qū)引入薔薇科仁果類果樹樹苗。 2.剪除病梢病枝。 3.藥劑防治：120mg/kg鏈霉素噴霧，或花期用波爾多液噴霧防治，效果很好。 4.種植抗病品種： 玉米細菌性枯萎病分布：1889年紐約首先報道，現已20多個國家。分

16、布于美國、加拿大、墨西哥、越南、泰國、馬來西亞、前蘇聯、波蘭、瑞士、意大利、前南斯拉夫、羅馬尼亞、希臘、哥斯達黎加、波多黎各、圭亞那、秘魯、巴西寄主植物 主要是甜玉米，也侵染馬齒玉米、粉質玉米、硬粒玉米和爆裂玉米。癥狀：整個生育期都可危害，以開花期癥狀最明顯。早期癥狀表現為植株矮化，萎蔫，雄穗退色早枯，葉片邊緣產生波紋狀不規(guī)則病斑，葉片產生許多小病斑，結合成大塊，火燒狀干枯死亡。 髓部有空腔，導管被黃色黏液阻塞，萎蔫植株的下部切口有黃色細菌溢膿。Necrotic lesions on mature leaves; second phase of Stewarts wilt disease. 檢

17、驗方法：種植檢驗：種子長出的植株有明顯的癥狀。分離培養(yǎng)基：采用伊凡諾夫選擇培養(yǎng)基，其成分如下：甘油30ml 檸檬酸鐵銨10g 磷酸氫二鉀2 . 5g, 氯化鈉15g,硫酸鎂0.1g, 瓊脂17g 氯化鈣0.1g, 蒸餾水1000ml,PH7.0噬菌體檢驗法：用?；允删w，如ZP6、ZP82等檢驗。血清學檢驗：三、植物病毒檢疫檢疫性植物病毒的檢驗方法血清學檢測技術電子顯微鏡技術 分子生物學檢測技術常見植物病毒番茄環(huán)斑病毒煙草環(huán)斑病毒馬鈴薯帚頂病毒南方菜豆花葉病毒可可枝腫病毒香石竹環(huán)斑病毒番茄環(huán)斑病毒分布： 1936年，美國東部新澤西發(fā)生ToRSV至今已有30多個國家和地區(qū)發(fā)現有該病毒，主要集中

18、在北美溫帶地區(qū)，即美國和加拿大。寄主范圍廣，可侵染35科105屬157種以上單子葉和雙子葉植物。自然界多發(fā)生在觀賞、木本和半草本植物。常見的自然寄主有葡萄、桃、李、櫻桃、蘋果、榆樹等及果園雜草。 黃瓜：局部褪綠斑，而后產生系統(tǒng)褪綠和斑駁菜豆：局部褪綠斑或壞死斑，系統(tǒng)癥狀為皺縮和頂葉壞死煙草：局部壞死或環(huán)斑，幼葉系統(tǒng)褪綠環(huán)紋和斑紋，后隱癥番茄：局部壞死斑，幼葉產生系統(tǒng)斑駁和壞死豇豆：局部褪綠斑或壞死斑，引起系統(tǒng)侵染，植株頂端壞死檢疫方法形態(tài)學檢測：浸漬法制樣，電鏡觀察病毒粒體形態(tài)，測量粒體大小。 血清學檢測：瓊脂雙擴散、免疫電鏡、酶聯免疫吸附技術等。PCR檢測:第三節(jié) 危險性大的植物害蟲檢疫1、

19、同翅目2、鱗翅目3、雙翅目4、鞘翅目（一）害蟲檢驗方法（一） 直接觀察（二）過篩檢驗（三）解剖檢驗（四）加熱分離檢驗（五）比重檢驗（六）染色檢驗（七）軟X光透視檢驗 （八）誘捕檢驗（九）其它方法1、 直接觀察 通過肉眼或手持擴大鏡，對植物及其產品、包裝材料、運載工具進行檢查。適用范圍：適于檢驗個體較大，特征較明顯的害蟲，或危害狀明顯的植物及其產品。 癭蚊蟲癭2、過篩檢驗 利用多層篩將害蟲與其載體篩選分離。1.適用范圍 主要用于檢驗糧谷、種子、油料、小粒干果和生藥材中混進的害蟲。2.用具與步驟一般用多層篩。將樣品倒入篩中，回旋法篩之，而后分別將各層篩上物及篩下物倒入白瓷盤中攤成薄層，肉眼觀察檢查

20、較大的害蟲，篩下物收集在培養(yǎng)皿中，解剖鏡下檢查較小的蟲體。3、解剖檢驗 借助刀具剖開待檢物品，檢查是否有害蟲存在。1.適用范圍 有明顯被害狀、食痕或有可疑癥狀的種子、果實及其它植物產品，如食心蟲、實蠅類危害的果實；天牛、吉丁蟲為害的枝干等。2.用具與步驟 采用解剖刀、水果刀或剪刀。在檢驗中若發(fā)現有害蟲的產卵孔、蛀孔、蟲糞、分泌物等危害跡象時，需利用本方法進一步找到蟲體。 4、加熱分離檢驗 原理：利用害蟲在受熱時蘇醒或變得活潑的特點。螨類檢驗中，利用活螨避光，怕熱的習性，加熱分離之。1.適用范圍 多在冷涼季節(jié)或氣溫較低時2.用具與步驟 將樣品（糧谷、豆粒等）放入磁盤或培養(yǎng)皿中，放在燈光或其它熱源

21、上面加熱，一些蛾類、小型昆蟲或遲鈍不動的昆蟲受熱后即爬動而被分離出來。應用舉例 螨類的分離1.烤螨法 將供試品放在特制的分離器或附有孔徑大小適宜的篩網的普通玻璃漏斗里，在漏斗的廣口上約6cm處用一個60100W的燈泡照射12h?；铗裳芈┒穬鹊牡撞考氼i內壁下爬，漏斗下口處用小燒杯裝半杯甘油水收集。2.熱水漂浮法 將原糖樣品置于錐形瓶中，溫水（3035）溶解，溶液量以剛好不溢出為宜，1530min后，用載玻片沾取水面漂浮物，鏡檢觀察是否有螨類爬出。5、比重檢驗 根據有害籽粒和正常籽粒比重不同，用鹽溶液漂檢分離的方法。 1.適用范圍 通常用于檢查糧谷、谷類中的害蟲 。6、染色檢驗 指利用某些植物或

22、器官被害蟲為害后，經特殊的化學品處理后，可染上特有的顏色，以幫助檢出害蟲或判斷害蟲成活與否的方法。 根據染色劑的不同，可分為高錳酸鉀染色法、品紅染色法、碘或碘化鉀染色法和油脂浸潤法。各種方法各有其一定的應用范圍。 高錳酸鉀染色法（1）試劑 1%高錳酸鉀溶液、硫酸和過氧化氫混合液（1%硫酸100ml加3%過氧化氫液1ml）與清水。（2）步驟將15g糧粒樣品放入30溫水中浸min；然后轉移到1%高錳酸鉀液內染色min；清水漂洗；濾紙吸干多余液體并鏡檢。將出現直徑0.5mm黑斑點的子粒挑出剖檢。染色后轉入硫酸和過氧化氫混合液內處理30s，則米象的產卵處染色成褐色斑點。（3）適用范圍 檢驗糧粒中的谷象

23、、米象等。品紅染色法（1）主要試劑 酸性品紅溶液（蒸餾水95ml，冰醋酸5ml，酸性品紅0.05g，充分混合） （2）步驟 取樣品15g，30溫水預浸1min后移入品紅液中染色25min，之后取出并用清水洗凈，倒在白色吸水紙上，鏡檢，凡有0.5mm左右櫻桃紅小點，即為被害粒。 （3）適用范圍 同高錳酸鉀法，但也適用于植物葉片中斑潛蠅卵的檢驗。碘染色法（1）試劑 1碘化鉀液或2碘酒溶液、0.5氫氧化鉀(鈉)溶液。（2）步驟取代表樣品50g，放入紗網或包于紗布袋中，浸入配好的碘液中染色l1.5min；氫氧化鉀溶液固定30s；清水漂洗1520s，之后鏡檢。凡豆粒表面有l(wèi)2mm直徑的黑色圓斑者，即為蟲

24、蛀粒，再進行剖檢。（3）適用范圍 適于被豆象類蛀害的豆粒檢驗。 7、軟X光透視檢驗 軟X光透視和攝影檢驗種子，首先由瑞典皇家林學院Simak、Kamra等人創(chuàng)造并提出。原理：利用軟x光波長較長（大于0.01nm），能級較低，穿透力較弱，被檢驗的物體吸收率高，成像對比度強、層次清晰的特點，對種子進行透視、攝影，以判斷種子、苗木及其他植物組織內鉆蛀性害蟲的發(fā)生情況。1.儀器與操作方法一般用Hy-35型農用軟光機。操作方法：取樣品100粒，單層平鋪在儀器內樣品臺上，開通電源，調節(jié)光強度和清晰度，通過觀察窗，即可在熒屏上觀察。凡健康種子，全粒均勻透明；凡有陰影斑點（塊），即為蟲蛀粒、空殼或內部有蟲體。

25、熒光屏直接觀察對檜、杉、粟等小粒種子不適用，必須通過攝影、沖洗出底片才能正確檢測。8、誘器檢驗 利用特異性誘劑，置于特制的誘捕器中誘測害蟲（主要是成蟲）的方法。主要用于產地、港口、車站、機場、貨棧、倉庫等處的現場檢驗與疫情監(jiān)測。 誘器由誘劑、誘芯和誘捕器三部分組成。蘋果實蠅紅色誘捕器同翅目一類1種：松突圓蚧二類1種：葡萄根瘤蚜三類共22種：蘋果綿蚜、冷杉球蚜、百合西圓尾蚜、梨根瘤蚜、玉米根蚜、鼠李馬鈴薯蚜、冬蔥瘤額蚜、桃大黑蚜、馬鈴薯囊管蚜、省沽油囊管蚜、絲絨粉虱、煙粉虱、尼日蘭粉蚧 、肯尼亞粉蚧、松針盾蚧、黑條盾蚧、桃白圓盾蚧、櫻桃圓盾蚧、胡桃圓盾蚧、霍氏長盾蚧、日本松干蚧和蘋果木虱。鱗翅目一類1種：蘋果蠹蛾二類3種：美國白蛾 小蔗螟 咖啡潛葉蛾三類共40種：蔥鄰菜蛾、秋星