1、第一章 植物組織培育實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建主講 生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院薛春麗聯(lián)絡(luò)：3746885 :xcl_biology2126 教學(xué)目的：1了解組織培育實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)原那么；2掌握組織培育根本規(guī)劃以及相應(yīng)儀器設(shè)備；3了解組培苗消費(fèi)規(guī)模與實(shí)驗(yàn)室組建經(jīng)費(fèi)預(yù)算；3可以根據(jù)需求和實(shí)踐情況科學(xué)設(shè)計(jì)組織培育實(shí)驗(yàn)室。 重點(diǎn)：組織培育實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與經(jīng)費(fèi)預(yù)算難點(diǎn)：組織培育實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)一、組培實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)原那么：、防止污染、控制污染、保證無(wú)菌操作。、按照工藝流程科學(xué)設(shè)計(jì)，到達(dá)經(jīng)濟(jì)、適用和高效。、構(gòu)造規(guī)劃合理，任務(wù)方便，節(jié)能、平安。、規(guī)劃設(shè)計(jì)與任務(wù)目的、規(guī)模及當(dāng)?shù)貤l件等相順應(yīng)。第一節(jié)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)二、組培實(shí)驗(yàn)室根本組成洗滌室藥品室稱量室

2、培育基制備室滅菌室無(wú)菌培育基儲(chǔ)放室無(wú)菌操作室區(qū)培育室區(qū)細(xì)胞學(xué)察看室馴化移栽溫室可以根據(jù)實(shí)踐條件進(jìn)展合并化學(xué)實(shí)驗(yàn)室預(yù)備室1地理位置要求：地形開(kāi)闊，地勢(shì)高燥，交通運(yùn)輸、水電方便。環(huán)境清潔，空氣清新，周圍50米以內(nèi)要 沒(méi)有醬醋作坊、牧場(chǎng)、畜禽圈舍及飼料庫(kù)和“三廢排放的工廠。2接種室要求：為減少雜菌污染接種室房間不宜過(guò)大，盡量密閉，并設(shè)有緩沖間，再進(jìn)入接種操作間。3培育室要求：最好建立在房屋南面，保溫、通風(fēng)且光線充足的房室，培育室墻面應(yīng)盡量設(shè)有大窗戶，以便能最大限制采用自然光，節(jié)藥能源。三、組培實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì) 1、實(shí)驗(yàn)室選址要求 根據(jù)組培消費(fèi)流程合理設(shè)置，使其構(gòu)成一條流水作業(yè)的消費(fèi)線，以提高工效和保證組

3、培苗生長(zhǎng)的無(wú)菌環(huán)境，組培實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按照： 配制培育基蒸汽滅菌分別或接種無(wú)菌培育的流程進(jìn)展平面規(guī)劃，以提高工效和保證組培苗生長(zhǎng)的無(wú)菌環(huán)境。2、組培實(shí)驗(yàn)室的規(guī)劃 組培實(shí)驗(yàn)室規(guī)劃圖示倉(cāng)庫(kù)預(yù)備室滅菌室接種室培育室辦公室溫室大棚門口倉(cāng)庫(kù)預(yù)備室滅菌室接種室培育室辦公室溫室大棚入口紅河學(xué)院植物組織培育實(shí)驗(yàn)室平面圖一、預(yù)備室1、功能：完成培育基配制所運(yùn)用的各種藥品的貯備、稱量、用品洗滌、培育基配制與分裝等任務(wù)。2、主要設(shè)備器具： 藥品柜、冰箱、電子天平、蒸餾水器、酸度計(jì)及常用的培育基配制用玻璃儀器。3、設(shè)計(jì)要求：面積普通為25-50m2,要求寬闊、亮堂、通風(fēng)、枯燥、便于多人同時(shí)操作，配水源和排水設(shè)備。有條件時(shí)可

4、將洗滌室、藥品室和培育基配制室分開(kāi)。第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)室的功能及要求二、滅菌室1、功能：用于培育基、器皿、工具及其它物品的消毒滅菌。2、儀器及器具配置：高壓滅菌鍋、高壓滅菌器、干熱滅菌箱、細(xì)菌過(guò)濾器等3、設(shè)計(jì)要求：面積普通為10-25m2,要求通風(fēng)、防潮、配水源和排水設(shè)備，電源要求較平安，設(shè)漏電維護(hù)安裝。消費(fèi)規(guī)范較小時(shí)，滅菌室可與洗滌室、藥品室和培育基配制室合在預(yù)備室。三、無(wú)菌操作室接種室：1、功能：主要用于植物資料的消毒、接種、培育物的轉(zhuǎn)移、試管苗的繼代、原生質(zhì)體的制備以及一切需求進(jìn)展無(wú)菌操作的技術(shù)程序。2、主要設(shè)備：紫外光源、超凈任務(wù)臺(tái)、消毒器、酒精燈、接種器械接種鑷子、剪刀、解剖刀、接種針等。

5、3、設(shè)計(jì)要求： 接種室宜小不宜大，普通1050平米，要求地面、天花板及四壁盡能夠密閉光滑，易于清潔和消毒。配置推拉門，以減少開(kāi)關(guān)門時(shí)的空氣擾動(dòng)。接種室應(yīng)設(shè)有緩沖間，面積5m2為宜。進(jìn)入無(wú)菌操作室前在此更衣?lián)Q鞋，以減少進(jìn)出時(shí)帶入接種室雜菌。接種室和緩沖間要求在適當(dāng)位置安裝 紫外線滅菌燈，用以照射滅菌。 1、功能：培育室是將接種的資料進(jìn)展培育生長(zhǎng)的場(chǎng)所。其大小可根據(jù)消費(fèi)規(guī)模而定。其設(shè)計(jì)以充分利用空間和節(jié)省能源為原那么。周圍墻壁最好有絕熱防火的性能。2、主要設(shè)備：光照培育箱、生態(tài)培育箱、振蕩培育箱、恒溫培育箱、培育架、 紫外光源等。四、培育室：3、設(shè)計(jì)要求：1培育室的大小可根據(jù)消費(fèi)規(guī)模和培育架的大小

6、、數(shù)目及其他附屬設(shè)備而定。2可以控制光照和溫度。3堅(jiān)持清潔，遠(yuǎn)離污染源，防止微生物污染。4可以通風(fēng)、降濕、散熱。5培育室應(yīng)設(shè)有緩沖間或走廊。1、功能：該室用于對(duì)組培苗的煉苗與移栽。2、主要設(shè)備：苗床、噴霧系統(tǒng)、加濕機(jī)、二氧化碳機(jī)、配比施肥機(jī)等。3、設(shè)計(jì)要求：面積視消費(fèi)規(guī)模而定，要求環(huán)境清潔無(wú)菌，具備控溫、控濕、遮蔭、防蟲和采光良好等條件。五大棚或溫室第三節(jié)、組培根本儀器和設(shè)備一、玻璃器皿1、培育器皿：試管、三角瓶、培育皿、果醬瓶等。2、分注器：漏斗、移液管、量筒等。3、其它玻璃器皿：燒杯、容量瓶、試劑瓶等。培育瓶移液槍1、鑷子 2、解剖刀 3、剪刀 4、接種針 5、電熱滅菌器 6、電爐 7、推

7、車等 8、鍋具等接種器具滅菌器電爐推車二、金屬器械三、根本儀器與設(shè)備、滅菌設(shè)備：1包括：臥式滅菌鍋、立式滅菌鍋、手提式滅菌鍋、高壓鍋等。主要用于培育基、蒸餾水和接種器械的滅菌。2任務(wù)原理：利用高壓滅菌鍋產(chǎn)生的高壓濕熱水蒸汽溫度121-126、壓力0.11-0.15MPa，來(lái)到達(dá)殺滅細(xì)菌和真菌的目的。手提式高壓滅菌鍋的構(gòu)造、 接種設(shè)備：1包括：超凈任務(wù)臺(tái)、無(wú)菌接種箱等，主要用于培育資料的消毒及接種。2任務(wù)原理超凈任務(wù)臺(tái)：風(fēng)機(jī)將空氣經(jīng)過(guò)微孔泡沫塑料片層疊合組成的“超極濾清器后吹送出來(lái)，除去大于0.3微米的塵埃、真菌310微米和細(xì)菌孢子0.41.0微米等，構(gòu)成延續(xù)不斷的無(wú)塵無(wú)菌的超凈空氣層流，在超凈

8、臺(tái)面制造無(wú)菌區(qū)。單人單面超凈臺(tái)雙人單面超凈臺(tái)單人雙面超凈臺(tái)老式接種箱1包括：恒濕箱、光照培育箱、植物生長(zhǎng)箱、生態(tài)培育箱、振蕩培育箱、光照培育架等,主要用于接種后資料的培育。3.培育設(shè)備：培育架普通設(shè)4-5層，最低一層離地高約10cm，其他每層間隔30cm左右，培育架高1.7m左右或根據(jù)培育室層高而定。其寬度普通為60cm，長(zhǎng)度根據(jù)日光燈長(zhǎng)度而設(shè)計(jì)，每架培育架可放置培育瓶數(shù)為：17*7*2*5=1190瓶/架。電源開(kāi)關(guān)分組控制，可根據(jù)培育需求調(diào)理開(kāi)燈數(shù)量以控制光照強(qiáng)度，可改換不同光質(zhì)燈管，以滿足對(duì)不同光質(zhì)的要求。光照培育架的設(shè)計(jì)：包括分析天平，電子天平，藥物天平等，用于制備母液時(shí)培育基組成成分的

9、稱取。如一些需求量少的激素和微生素類物質(zhì)，天平的準(zhǔn)確度要到0.0001g，這就要求準(zhǔn)確度更高的分析天平。4、稱量設(shè)備：1冰箱：用于在常溫下易變性或失效的試劑和母液的貯藏，以及某些資料的預(yù)處置。5、其它輔助設(shè)備2空調(diào)：用于接種室和培育室溫度的控制。3消毒機(jī)：臭氧機(jī)、等離子發(fā)生器：4除濕機(jī)用于枯燥洗凈后的玻璃器皿，還可用80的溫度烘干組織培育植物資料以測(cè)定干物質(zhì)。器皿包裝1601702h枯燥箱運(yùn)用留意70以下開(kāi)箱取物，勿超180隨用隨開(kāi)包 5枯燥箱 6純水機(jī)與蒸餾水發(fā)生器：7酸度計(jì)：用于校正培育基和酶制劑的PH。8光學(xué)顯微鏡、解剖鏡等。用于莖尖的分別及不同時(shí)期培育物的察看及圖像資料的搜集。第四節(jié)

10、培育條件的調(diào)控一、溫度：二、光照：、光照強(qiáng)度：1000-5000L、光照時(shí)間：8-12h、光質(zhì)：1藍(lán)光促進(jìn)苗的生長(zhǎng)和分化2紅光促進(jìn)根的分化3暗培育使培育物停留在芽的分化三、濕度培育瓶?jī)?nèi)濕度100%室內(nèi)濕度30-40%四、氣體：氧氣、二氧化碳、乙烯不利五、浸透壓：培育資料浸透壓等滲或略低于培育基浸透壓六、PH值：5.6-6.5第五節(jié) 實(shí)驗(yàn)室組建經(jīng)費(fèi)預(yù)算一、組培苗消費(fèi)方案與消費(fèi)規(guī)模1、消費(fèi)方案的制定： 銷售量=實(shí)踐消費(fèi)量1-損耗率5-10%移栽成活率90-95%2、實(shí)踐消費(fèi)量Y決議于無(wú)菌母株苗數(shù)m、每周期增殖倍數(shù)X和年增殖周期數(shù)n，其公式為：Y=mXn二、消費(fèi)規(guī)模1、存瓶增殖總瓶數(shù)=月方案消費(fèi)苗數(shù)

11、/每個(gè)增殖瓶月可產(chǎn)苗數(shù)2、月方案消費(fèi)苗數(shù)=每個(gè)操作人員每天可接苗數(shù)月任務(wù)日 人員數(shù)三、年產(chǎn)100萬(wàn)苗組培實(shí)驗(yàn)室的規(guī)劃設(shè)計(jì)銷售量=實(shí)踐消費(fèi)量1-損耗率5-10%移栽成活率90-95%假設(shè)年產(chǎn)100萬(wàn)苗，那么實(shí)踐消費(fèi)苗數(shù)= 100萬(wàn)苗/年90% 90% 子 =123.457萬(wàn)苗假設(shè)每瓶苗數(shù)為20苗，那么實(shí)踐消費(fèi)瓶數(shù)=123.457萬(wàn)苗 20苗/瓶6.173萬(wàn)瓶假設(shè)年增殖周期數(shù)為n=3，那么每批須消費(fèi)瓶苗= 6.173萬(wàn)瓶3=2.058萬(wàn)瓶每架培育架為5臺(tái)，每臺(tái)長(zhǎng)放17 瓶，寬放7瓶，可放兩層 5臺(tái)/架17瓶7瓶2層=1190瓶/架那么每批需培育架=2.058萬(wàn)瓶 1190瓶/架=17.291架20

12、架年產(chǎn)100萬(wàn)苗組培工廠所需面積1、擺放20架培育架的培育車間面積約需：1.2m+0.6m間距0.6m+0.6m間距20架=43.2m2 50m220000瓶200瓶/天人25天=4人2、擺放4臺(tái)超凈任務(wù)臺(tái)所需接種車間面積：接種間(1m+0.9m間距)(0.7m+0.9m間距)臺(tái)+緩沖間2.0m 1.5m=15.16m2 20m2 3、配制與滅菌車間約需：30m2 4、其它辦公室等：20m2四、年產(chǎn)100萬(wàn)苗組室的經(jīng)費(fèi)預(yù)算項(xiàng)目面積設(shè)備用具名稱、數(shù)量單價(jià)（元）小計(jì)配制與滅菌車間30 m2立式高壓滅菌鍋2臺(tái)6500.0013000.00分析天平(0.1mg)1架4000.004000.00電子天平

13、（0.01g）1架500.00500.00冰箱1臺(tái)3000.003000.00藥品5000.005000.00培養(yǎng)容器5萬(wàn)個(gè)0.8542500.00玻璃器皿800.00800.00其他小型實(shí)驗(yàn)用具1000.001000.00接種車間20 m2超凈工作臺(tái)5臺(tái)5000.0025000.00接種工具30套(三鑷、兩刀、一剪)120.003600.00滅菌器10個(gè)400.004000.00培養(yǎng)車間50 m2培養(yǎng)架25架500.0012500.00空調(diào)1臺(tái)4000.004000.00其它20 m25000.005000.00房租費(fèi)6000.006000.00改建費(fèi)20000.0020000.00合計(jì) 1

14、49900.00150000萬(wàn)元1、掌握組培實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的根本原那么： A、防止污染、控制污染、保證無(wú)菌操作。B、按照工藝流程科學(xué)設(shè)計(jì)，到達(dá)經(jīng)濟(jì)、適用和高效。C、構(gòu)造規(guī)劃合理，任務(wù)方便，節(jié)能、平安。D、規(guī)劃設(shè)計(jì)與任務(wù)目的、規(guī)模及當(dāng)?shù)貤l件等相順應(yīng)。2、了解組培實(shí)驗(yàn)室的總體要求：3、了解組培實(shí)驗(yàn)室的規(guī)劃：根據(jù)消費(fèi)流程規(guī)劃，以提高工效和保證無(wú)菌。4、熟習(xí)組培實(shí)驗(yàn)室的根本組成：預(yù)備室、接種室、培育室等5、熟習(xí)組培實(shí)驗(yàn)室的根本設(shè)備：滅菌鍋、超凈臺(tái)、培育架等6、了解組培實(shí)驗(yàn)室的組建經(jīng)費(fèi)預(yù)算：本章小結(jié)：課后作業(yè)、根據(jù)所學(xué)知識(shí)，設(shè)計(jì)一個(gè)面局1000平方，投資30萬(wàn)元左右的組織培育實(shí)驗(yàn)室。要求按比例繪制實(shí)驗(yàn)室規(guī)劃

15、圖，把所需主要設(shè)備在規(guī)劃圖中繪出，并經(jīng)過(guò)淘寶查詢相關(guān)儀器設(shè)備用品價(jià)錢，給出詳細(xì)經(jīng)費(fèi)預(yù)算表。1000元搞定一個(gè)家庭式袖珍的組培室他信不信？一、儀器設(shè)備及器具1、家用高壓鍋 1個(gè) 最好大一點(diǎn)的，裝的東西多一點(diǎn)。用于培育基、無(wú)菌水等的消毒。這個(gè)東西家家都有，能夠不需求買吧？買的話是元左右2、接種箱 無(wú)菌箱1個(gè) ，需求本人自制，用一些木板和一塊玻璃和二尺布料，大約需求0元錢抽油煙機(jī)罩改裝也行。3、藥用天平1架 最好是500g稱量的，小一點(diǎn)也可以 ，大約100元，假設(shè)口袋里錢不夠，就去藥店他買一個(gè)稱中藥用的戥子，選稱量100g的，最多只需10元錢。主要用來(lái)稱瓊脂、糖等物品。4、不銹鋼鍋或鋁鍋煮湯、面條的

16、那種這個(gè)家家都有的，可以不去買。一定要買元搞定。5、攪拌和分裝培育基用的調(diào)羹一個(gè)，就是在學(xué)校吃飯用的那種長(zhǎng)柄的，用于煮制和分裝培育基，一定要買5元搞定。 6、培育用的瓶子假設(shè)干，可以去買現(xiàn)成的，200ml帶蓋的0.60元一個(gè)，我最喜歡運(yùn)用的就是醫(yī)院里丟棄的200ml的鹽水瓶,經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，不要錢。7、牛皮紙、橡皮圈或棉線假設(shè)干，用于包瓶頭和扎包頭紙用，牛皮紙可以去找用過(guò)的包裝紙，橡皮圈或棉線一元錢買一大把。8、酒精燈1盞、解剖刀1把，刀片假設(shè)干、鑷子2把、10ml、100ml量筒各一個(gè)，2ml移液管1只量筒和移液管可用針筒替代，藥棉假設(shè)干，加在一同要不了100元錢。以上儀器設(shè)備及器具合計(jì)：元二、根本藥品藥品只需購(gòu)買以下幾種就行了：1、MS培育基共19種，混合培育基90-150元/500g2、酒精(普通500ml)7.00元可以到醫(yī)院或藥材商店去買3、精細(xì)試紙PH 5.47.0一本 2.00元 運(yùn)用時(shí)撕成小塊，一本可以用很長(zhǎng)的時(shí)間4、漂白粉或漂白精500克5.00元可以到醫(yī)院或藥材商店去買5、瓊脂普通500克.00元6、白糖食用500克2.50元7、福爾馬