1、-. z.酸奶中酸度的測(cè)定 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、熟練氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制和標(biāo)定；、掌握直接滴定法測(cè)酸度的方法。 原理 酸度是指中和100 g樣品所需0.1000 mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積mL。以酚酞為指示液，用0.1000 mol/L標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定10 g試樣至終點(diǎn)所消耗的氫氧化鈉溶液體積，經(jīng)計(jì)算確定酸奶的酸度。 試劑和材料 1、酚酞指示液：稱取 0.5 g 酚酞溶于 75 mL 體積分?jǐn)?shù)為 95 %的乙醇中，并參加 20 mL 水，然后滴加氫氧化鈉溶液至微粉色，再參加水定容至 100 mL。 2、0.1 mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(250ml):準(zhǔn)確稱取1g氫氧化鈉固體加水溶解稍冷卻后轉(zhuǎn)入2

2、50 ml容量瓶中定容，充分搖勻。3、酸奶 儀器 分析天平，堿式滴定管2個(gè)，200mL的錐形瓶2個(gè)，量筒1個(gè)，移液管1個(gè)，吸爾球，玻璃棒 操作步驟 1、氫氧化鈉溶液的標(biāo)定：、準(zhǔn)確稱取0.400.50g基準(zhǔn)試劑鄰苯二甲酸氫鉀三份,置于錐形瓶中標(biāo)號(hào)，、加2030 mL蒸餾水溶解后，加1滴酚酞指示劑。、用配制好的氫氧化鈉溶液分別滴定至溶液呈微紅色，30 s 內(nèi)不褪色。記錄每次消耗的氫氧化鈉溶液的體積數(shù)，計(jì)算。2、酸度的測(cè)定：、稱取 10 g準(zhǔn)確到 0.001 g樣品，置于 150 mL 錐形瓶中。、加 20 mL蒸餾水，混勻。、再參加2.0 mL 酚酞指示液，混勻。、用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至微紅色，

3、并在 30 s 內(nèi)不褪色。記錄消耗的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積數(shù)，重復(fù)三次。 結(jié)果計(jì)算 C2=C2氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，單位為摩爾每升mol/Lm1基準(zhǔn)試劑鄰苯二甲酸氫鉀的質(zhì)量，單位為克gV1滴定時(shí)消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，單位為毫升204.22鄰苯二甲酸氫鉀的摩爾質(zhì)量，單位為摩爾每克g/mol 結(jié)果用算術(shù)平均值表示，結(jié)果保存三位有效數(shù)字。 試樣中的酸度數(shù)值以表示，按下式計(jì)算： 式中： *2試樣的酸度，單位為度； C2氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩爾濃度，單位為摩爾每升mol/L； V2滴定時(shí)消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，單位為毫升； m2試樣的質(zhì)量，單位為克g； 0.1酸度理論定義氫氧化鈉的摩爾濃度，單位為

4、摩爾每升mol/L。 結(jié)果用算術(shù)平均值表示，結(jié)果保存三位有效數(shù)字。 9 所用試劑均為分析純,所用水為蒸餾水或相當(dāng)純度的水。 混合酸硝酸：高氯酸=4:1。甲基紅指示劑0.1水溶液。乙酸水溶液乙酸：水=1:4。 氨水溶液氨：水=1:4。草酸銨水溶液4。硫酸溶液1mol/L：取硫酸60 mL緩緩注入適量水中，冷卻到室溫，加水稀釋到1000 mL，搖勻。高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液0.02 mol/L分析天平等。 6.1.3 檢測(cè)方法和步驟 1 試樣溶液的制備：準(zhǔn)確稱量3.0005.000 g于250 mL燒杯中，少量水潤(rùn)濕后參加25 mL混合算消化液，置于電爐上加熱消化。如未消化好而酸液過(guò)少時(shí)，取下放冷后再補(bǔ)加

5、幾毫升混合酸消化液，繼續(xù)加熱消化，直至無(wú)色透明為止。加20 mL蒸餾水加熱經(jīng)除去多余的硝酸。待燒杯中的液體接近2-3 mL時(shí)，取下冷卻。用蒸餾水洗并轉(zhuǎn)移于100 mL容量瓶中，加蒸餾水定容到刻度線。取與消化樣品一樣量的混合消化液，按上述操作做試劑空白試驗(yàn)測(cè)定。 2 測(cè)定：用移液管準(zhǔn)確移取5 mL上述消化液，置于是15 mL離心管中，加1滴0.1的甲基紅指示劑、1mL4草酸銨水溶液、0.5 mL乙酸水溶液，用氨水溶液調(diào)節(jié)至微黃色，再用乙酸調(diào)節(jié)至微紅色，靜置0.5小時(shí)以上，使沉淀全部析出，小心傾去上清夜，然后加4mL1mol/L硫酸溶液于離心管中，轉(zhuǎn)移到250mL三角瓶中，用50毫升水清洗離心管，

6、溶液合并于三角瓶中，搖勻，置于電磁攪拌器上加熱到700-800，是沉淀溶解，用0.02 mol/L的高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至微紅色30秒不退色為終點(diǎn)。記錄高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗量。 6.1.4數(shù)據(jù)記錄及計(jì)算： 式中：*試樣中鈣含量，； V樣品消耗高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，mL； Vo空白消耗高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，mL； V1用于測(cè)定樣品液體積，mL； V2樣品液定容總體積，mL； m試樣質(zhì)量，g。 計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后兩位。 實(shí)驗(yàn)七、酸奶中氨基酸總量測(cè)定(G B / T 5009 . 5 -2010) 7.1.1檢測(cè)原理 氨基酸具有酸性的-COOH基和堿性的-NH2基。它們相互作用而使氨基酸成為中內(nèi)

7、鹽， 10 當(dāng)參加甲醛溶液時(shí)，-NH2與甲醛相結(jié)合，從而使其堿性消失，這樣就可以使用強(qiáng)堿溶液來(lái)滴定-COOH基，并使用間接的方法測(cè)定氨基酸總量。 7.1.2檢測(cè)儀器試劑 1 0.0100mo;/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 250ml錐形瓶2個(gè) 100mL量筒一個(gè) 5mL、 20mL移液管各一支 分析天平 堿式滴定裝置一套 2 試劑1.40%中性甲醛溶液:以百里酚酞作指示劑，使用氫氧化鈉將40%甲醛中和至淡藍(lán)色 0.1%百里酚酞乙醇溶液 0.1%中性紅50%乙醇溶液 7.1.3檢測(cè)方法和步驟 準(zhǔn)確吸取含氨基酸約20mg到30mg的樣品溶液2份，分別置于250mL錐形瓶中，各加50mL蒸餾水，其中一份參加

8、3滴中性紅指示劑，用0.1000mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至由紅變?yōu)殓晟珵榻K點(diǎn)；另一份參加3滴百里酚酞指示劑及中性甲醛20mL，搖勻，靜置1min，用0.100氫氧化鈉標(biāo)注溶液滴定至淡藍(lán)色為終點(diǎn)。分別記錄兩次所消耗的堿液體積。 7.1.4數(shù)據(jù)記錄及計(jì)算 氨基酸態(tài)氮%=(V2-V1)*c*0.014/m 其中：c氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 V1用中性紅做指示劑滴定時(shí)消耗氫氧化鈉的標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積 V2用百里酚酞作指示劑滴定時(shí)消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積 m測(cè)定用樣品溶液相當(dāng)與樣品的質(zhì)量 0.014-氮的豪摩爾質(zhì)量 實(shí)驗(yàn)八、乳糖的測(cè)定(直接滴定法(GB 5009.7-85) 8.1.1檢測(cè)原理 樣品

9、經(jīng)除去蛋白質(zhì)后，在加熱條件下，直接滴定已標(biāo)定過(guò)的費(fèi)林氏液，費(fèi)林氏液被復(fù)原析出氧化亞銅后，過(guò)量的復(fù)原糖立即將次甲基藍(lán)復(fù)原，是藍(lán)色褪色。根據(jù)樣品消耗體積，計(jì)算復(fù)原糖量。 8.1.2檢測(cè)試劑 費(fèi)林氏甲液 費(fèi)林氏乙液 乙酸鋅溶液 亞鐵氰化鉀溶液 鹽酸 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：1mg/ml 8.1.3檢測(cè)方法和步驟 1、樣品處理：吸取10g牛奶放入100ml容量瓶中，參加50ml水，搖勻并邊搖邊參加5ml乙酸鋅溶液、5ml亞鐵氰化鉀溶液，加水至刻度，然后混勻，靜置30min過(guò)濾，棄去過(guò)濾液，濾液備用。 2、標(biāo)定費(fèi)林氏溶液：吸取5ml費(fèi)林氏乙液和5ml費(fèi)林氏甲液，放入150ml錐形瓶中， 11 加水10ml并加玻

10、璃珠2粒，然后在2min內(nèi)加熱至沸騰，從移液管滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液至溶液藍(lán)色變?yōu)榈S色，記錄消耗的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液總體積，平行操作3份，取其平均值。計(jì)算每10ml費(fèi)林氏液相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量mg 3、樣品溶液測(cè)定：吸取5ml費(fèi)林氏乙液和5ml費(fèi)林氏甲液于150ml錐形瓶中，加水10ml并加玻璃珠2粒，然后在2min內(nèi)加熱至沸騰，從移液管滴加處理后的牛奶，至溶液懶得變?yōu)榈S色，記錄消耗牛奶的總體積，平行操作3份，取其平均值。 8.1.4數(shù)據(jù)記錄及計(jì)算 pv1v W= 100 Mv21000 W:樣品中復(fù)原糖的含量以葡萄糖計(jì)，g/100g P:葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，1mg/ml V1:滴定10費(fèi)林氏溶液

11、甲、乙液各5消耗葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml V2:測(cè)定時(shí)平均消耗牛奶的體積，ml V:牛奶定容體積，ml M:樣品質(zhì)量，g 注意玻璃珠要回收，須戴手套取下加熱過(guò)的錐形瓶。 參考文獻(xiàn) 1 GB5413-85 凱氏定氮法測(cè)定乳制品中蛋白質(zhì)含量S.：中國(guó) 標(biāo)準(zhǔn)，1985. 2 *玉葵. 凱氏定氮法測(cè)定牛乳中蛋白質(zhì)含量的方法J.中國(guó)乳品 工業(yè)，19952：35-36. 3 *天吉. 乳與乳制品分析監(jiān)測(cè)與執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)實(shí)務(wù)全書M. 呼和浩 特：*人民， 2003， 262-268. 4高鴻, 分析化學(xué)前沿一化京:利學(xué)，1991 5陳炳穩(wěn)，何廣平，凌莫育應(yīng)用化學(xué)，199 14(6): 75 6陳炳穩(wěn)，何廣平，*

12、小珠化學(xué)通報(bào)，1998(10): 43 7唐英章主編. 現(xiàn)代食品平安檢測(cè)技術(shù).學(xué)，2004 8 江小梅等.食品分析原理與檢驗(yàn).：人民大學(xué)，1990 9汪東風(fēng).食品質(zhì)量與平安實(shí)驗(yàn)技術(shù).十一五國(guó)家規(guī)劃教材.：中國(guó)輕工業(yè)，2008 9 所用試劑均為分析純,所用水為蒸餾水或相當(dāng)純度的水?；旌纤嵯跛幔焊呗人?4:1。甲基紅指示劑0.1水溶液。乙酸水溶液乙酸：水=1:4。氨水溶液氨：水=1:4。草酸銨水溶液4。硫酸溶液1mol/L：取硫酸60 mL緩緩注入適量水中，冷卻到室溫，加水稀釋到1000 mL，搖勻。高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液0.02 mol/L分析天平等。6.1.3 檢測(cè)方法和步驟1 試樣溶液的制備：準(zhǔn)確

13、稱量3.0005.000 g于250 mL燒杯中，少量水潤(rùn)濕后加入25 mL混合算消化液，置于電爐上加熱消化。如未消化好而酸液過(guò)少時(shí)，取下放冷后再補(bǔ)加幾毫升混合酸消化液，繼續(xù)加熱消化，直至無(wú)色透明為止。加20 mL蒸餾水加熱經(jīng)除去多余的硝酸。待燒杯中的液體接近2-3 mL時(shí)，取下冷卻。用蒸餾水洗并轉(zhuǎn)移于100 mL容量瓶中，加蒸餾水定容到刻度線。取與消化樣品一樣量的混合消化液，按上述操作做試劑空白試驗(yàn)測(cè)定。2 測(cè)定：用移液管準(zhǔn)確移取5 mL上述消化液，置于是15 mL離心管中，加1滴0.1的甲基紅指示劑、1mL4草酸銨水溶液、0.5 mL乙酸水溶液，用氨水溶液調(diào)節(jié)至微黃色，再用乙酸調(diào)節(jié)至微紅色

14、，靜置0.5小時(shí)以上，使沉淀全部析出，小心傾去上清夜，然后加4mL1mol/L硫酸溶液于離心管中，轉(zhuǎn)移到250mL三角瓶中，用50毫升水清洗離心管，溶液合并于三角瓶中，搖勻，置于電磁攪拌器上加熱到700-800，是沉淀溶解，用0.02 mol/L的高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至微紅色30秒不退色為終點(diǎn)。記錄高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗量。數(shù)據(jù)記錄及計(jì)算：式中：*試樣中鈣含量，；V樣品消耗高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，mL；Vo空白消耗高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，mL；V1用于測(cè)定樣品液體積，mL；V2樣品液定容總體積，mL；m試樣質(zhì)量，g。計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后兩位。實(shí)驗(yàn)七、酸奶中氨基酸總量測(cè)定(G B / T 5009

15、. 5 -2010) 檢測(cè)原理氨基酸具有酸性的-COOH基和堿性的-NH2基。它們相互作用而使氨基酸成為中內(nèi)鹽，10 當(dāng)參加甲醛溶液時(shí)，-NH2與甲醛相結(jié)合，從而使其堿性消失，這樣就可以使用強(qiáng)堿溶液來(lái)滴定-COOH基，并使用間接的方法測(cè)定氨基酸總量。檢測(cè)儀器試劑1 0.0100mo;/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液 250ml錐形瓶2個(gè) 100mL量筒一個(gè) 5mL、20mL移液管各一支分析天平堿式滴定裝置一套2 試劑1.40%中性甲醛溶液:以百里酚酞作指示劑，使用氫氧化鈉將40%甲醛中和至淡藍(lán)色 0.1%百里酚酞乙醇溶液 0.1%中性紅50%乙醇溶液檢測(cè)方法和步驟準(zhǔn)確吸取含氨基酸約20mg到30mg的樣品

16、溶液2份，分別置于250mL錐形瓶中，各加50mL蒸餾水，其中一份參加3滴中性紅指示劑，用0.1000mol/L氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至由紅變?yōu)殓晟珵榻K點(diǎn)；另一份參加3滴百里酚酞指示劑及中性甲醛20mL，搖勻，靜置1min，用0.100氫氧化鈉標(biāo)注溶液滴定至淡藍(lán)色為終點(diǎn)。分別記錄兩次所消耗的堿液體積。數(shù)據(jù)記錄及計(jì)算氨基酸態(tài)氮%=(V2-V1)*c*0.014/m 其中：c氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 V1用中性紅做指示劑滴定時(shí)消耗氫氧化鈉的標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積 V2用百里酚酞作指示劑滴定時(shí)消耗氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積 m測(cè)定用樣品溶液相當(dāng)與樣品的質(zhì)量 0.014-氮的豪摩爾質(zhì)量實(shí)驗(yàn)八、乳糖的測(cè)定(直接滴定法

17、(GB 5009.7-85) 檢測(cè)原理樣品經(jīng)除去蛋白質(zhì)后，在加熱條件下，直接滴定已標(biāo)定過(guò)的費(fèi)林氏液，費(fèi)林氏液被復(fù)原析出氧化亞銅后，過(guò)量的復(fù)原糖立即將次甲基藍(lán)復(fù)原，是藍(lán)色褪色。根據(jù)樣品消耗體積，計(jì)算復(fù)原糖量。檢測(cè)試劑費(fèi)林氏甲液費(fèi)林氏乙液乙酸鋅溶液亞鐵氰化鉀溶液鹽酸葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：1mg/ml 檢測(cè)方法和步驟1、樣品處理：吸取10g牛奶放入100ml容量瓶中，參加50ml水，搖勻并邊搖邊參加5ml乙酸鋅溶液、5ml亞鐵氰化鉀溶液，加水至刻度，然后混勻，靜置30min過(guò)濾，棄去過(guò)濾液，濾液備用。2、標(biāo)定費(fèi)林氏溶液：吸取5ml費(fèi)林氏乙液和5ml費(fèi)林氏甲液，放入150ml錐形瓶中，11 加水10ml并加玻璃珠2粒，然后在2min內(nèi)加熱至沸騰，從移液管滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液至溶液藍(lán)色變?yōu)榈S色，記錄消耗的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液總體積，平行操作3份，取其平均值。計(jì)算每10ml費(fèi)林氏液相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量mg3、樣品溶液測(cè)定：吸