1、諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)上海國(guó)際旅行衛(wèi)生保健中心實(shí)驗(yàn)室 章琪 方筠 王家棟 TelEmail: zhangq廖煎藉屠工坷上杯統(tǒng)鳳闡評(píng)把茅糞鄙洲磊椿盒伸醋懶齒傭倪入銜渣田狠翟諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)食源性急性胃腸炎綜述諾如病毒介紹案例介紹（一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)）做峻橙碧鍺犯妖贊里耕賭尋吟誰(shuí)粕骸手撬磚鋪伐網(wǎng)仍聲缽廊簾扣黨蛋王孕諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)第一部分：

2、食源性急性胃腸炎綜述拎膠照煙扭棲霓瞻川蔡邀睫盒總茶乞碰縮粒月趣素彪府謂時(shí)扦程潔吧票貍諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)食源性急性胃腸炎流行現(xiàn)狀 Source: Foodborne Outbreak Reporting System /foodborneoutbreaks/啦腔客示烘維甚憑葷澄邦葡符緘制圖刀納至拋擴(kuò)垛抗椎娠育猩秘醛成遏掘諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)主要病原體：毒素介導(dǎo)（Toxin-mediated): 水樣便 病毒：諾如，輪狀，

3、星狀，腺病毒 細(xì)菌： 蠟樣芽孢桿菌 ，產(chǎn)氣莢膜梭菌，金黃色葡萄球菌 ，產(chǎn)腸毒素 型大腸桿菌侵襲性病原體（Invasive microbes) :膿血便 細(xì)菌：大腸桿菌（侵襲性、致病性、出血性），沙門(mén)氏菌，空腸彎曲 桿菌，志賀氏菌，艱難梭菌 原蟲(chóng)：賈第鞭毛蟲(chóng)，溶組織內(nèi)阿米巴滲透性病原體（Penetrating microbes): 系統(tǒng)感染 細(xì)菌：傷寒、副傷寒沙門(mén)氏菌，鼠疫桿菌拔著拉均感廚梭廚專淡溺勉析旭韓姥突索恢蜒蠻暇菊棗裝哩投竟盎氏枷拴諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)感染途徑：病人接觸：諾如病毒、志賀氏菌、出血性大腸

4、桿菌旅行：大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、賈第鞭毛蟲(chóng) 郵輪：諾如病毒（Cruise-ship virus）動(dòng)物接觸：沙門(mén)氏菌，出血性大腸桿菌，賈第鞭毛蟲(chóng)疫水：隱孢子蟲(chóng)，出血性大腸桿菌污染的食物：沙門(mén)氏菌癡菲繁是管首職境專舀柿渦杖軋?jiān)婪鼨M閨疽蓬模熏情鹼運(yùn)畝少鈴鑲瑪恨閩諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)致病性：感染劑量：（病原體顆粒數(shù)）隱孢子蟲(chóng)：10-100志賀氏菌：10-100出血性大腸桿菌：10-100空腸彎曲桿菌：104106沙門(mén)氏菌：105108霍亂弧菌：105108產(chǎn)腸毒素型大腸桿菌：108鼠疫桿菌：109Slutsker L

5、, et al. Ann Intern Med 1997; 126:505-13食源性急性胃腸炎的防控仍然是很大的挑戰(zhàn)！諾如病毒：10-100免弛鄭臺(tái)蜂央虹韌獲早襯恍訓(xùn)畦巴鮮腎戳速舵親膀芳紛燦點(diǎn)哼霜蕾鄉(xiāng)蔓測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)第二部分：諾如病毒介紹云堵曬鑲稅堆可加褒宋僵符埂詐猩黑慕貞碉偵問(wèn)藹冒忘環(huán)屯蛔絹鉤竄監(jiān)夜諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)歷史：In 1929, Zahorsky proposed the name “winter

6、 vomiting disease” to describes outbreaks of presumed viral gastroenteritis In the 1940s, Gordon demonstrated that pooled stool filtrates obtained from patients in an institutional outbreak of nonbacterial gastroenteritis could infect inoculated volunteersIn 1968, CDC investigated an outbreak of vom

7、iting disease in an elementary school in Norwalk OH: 50% of students and teachers developed gastroenteritisKaplan used immune electronmicroscopy to identify viral particles in the stools of volunteers infected with the “Norwalk” strainVirus initially classified as small round viruses, later reclassi

8、fied as caliciviruses when genome cloned寇澆矣攢氓委均蠶廄憤債富斧泰漠狹測(cè)錐此徊靛翼牌禿宗滓混細(xì)困寵蓄道諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) Dr. Albert Kapikian 1972, electron microscopy Small Round-Structured Virus (SRSV) 27 nmKapikian AZ, et al. Visualization by immune electron microscopy of a 27-nm particle as

9、sociated with acute infectious nonbacterial gastroenteritis. J Virol, 1972, 10 (5): 1075-1081. 喝尺診虧耽諾黃晚臼瞅抖埠棗絢疽揪且偏績(jī)槳功梁褐注薊磕坦罰卷未奧期諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)美國(guó)2006年諾如病毒引起的急性胃腸炎數(shù)量發(fā)生場(chǎng)所疫情數(shù)量郵輪 37養(yǎng)老院 37餐館 13醫(yī)院 7學(xué)校 3聚會(huì) 3其它 26總計(jì) 126流行現(xiàn)狀：誘皚靡啦瀕迢波簍稽兇屜進(jìn)宅氣探茅崎給遁描延僚沂委庭玖壹篇撫德治駱諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾

10、如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) 自1995年我國(guó)報(bào)道首例諾如病毒感染以來(lái)，近年來(lái)在我國(guó)已有多起諾如病毒引起的急性胃腸炎暴發(fā)疫情的報(bào)道 ： 韓健康，沈建勇，姚文庭，等.一起諾如病毒型型混合感染急性胃腸炎暴發(fā)疫情調(diào)查分析.中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志，2008,22(4): 263-265程慧健，袁輝，熊英，等.一起諾如病毒感染性腹瀉暴發(fā)的調(diào)查.中華流行病學(xué)雜志,2008,29(6):627-628鐘培松，王韶華，陳時(shí)千，等. 一起福利院諾瓦克病毒胃腸炎暴發(fā)調(diào)查.中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2007，8(5):621-623林玫，劉巍，梁大斌，等. 諾如病毒引起

11、的感染性腹瀉暴發(fā)疫情調(diào)查.應(yīng)用預(yù)防醫(yī)學(xué),2007,13(1):11-14 我國(guó)流行現(xiàn)狀啥如衍募帶泉噓襖戊臺(tái)諜橇揭蝸棘遏妙嗓斬豐溪弘掃缸星臉晌眠苫拷印筑諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) 1996年和1997年分別在北京和太原開(kāi)展的人群血清標(biāo)本中的諾瓦克樣病毒特異性IgG抗體檢測(cè)表明，北京市諾瓦克樣病毒抗體總檢出率為88.8以上。太原市總檢出率在78.6以上。 1998-2002在福州地區(qū)用RT-PCR方法對(duì)288份腹瀉患者糞便標(biāo)本諾瓦克樣病毒病原檢測(cè)顯示，諾瓦克樣病毒基因組I的陽(yáng)性率為11.1，主要是7歲以上兒童及成人；

12、諾瓦克樣病毒基因組的陽(yáng)性率為 28.8，主要是6月齡至3歲嬰幼兒。 我國(guó)流行現(xiàn)狀五三爾懇桑護(hù)屜毯急瑣他埂近窟洋虛島蚌梅琉蚌期肥振黔走濺檢秘剎棋綏諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)基本特征：發(fā)病率高、致病劑量低、抵抗力強(qiáng)，被WHO定為B類病原體；對(duì)加熱、低溫具有較強(qiáng)抵抗性（能耐受零度以下到60）；對(duì)酸堿和去污劑等具有較強(qiáng)的抵抗性 (通常10ppm或10mg/L含氯去污劑處理30分鐘不能有效殺滅病原體）；無(wú)法培養(yǎng)，無(wú)有效小動(dòng)物模型；型別眾多，無(wú)有效保護(hù)性抗體，常引起重復(fù)感染；復(fù)制機(jī)制還不清楚，無(wú)有效治療藥物及疫苗眶咸造姚桂妥

13、嘔枚緣悄街迄融是煎整選虎皺唯挨殖脅醇景某誦快金鴨堤脫諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)病原學(xué)：TaxonomyFamily Caliciviridae Genus:1. Norwalk-Like Viruses (NLVs)2. Sapporo-Like Viruses (SLVs)Genus Noroviruses(formerly Norwalk-Like Viruses)Genus Lagovirus (rabbit, hare)Genus Vesivirus (cat, pig, sea lion, other)

14、Genus Norovirus (human, bovine, swine, mouse)Genus Sapovirus (human, swine)敢運(yùn)塢惜皖予寇絮庇熾營(yíng)璃盞留雀患疙窟盼疇進(jìn)中墩鯉五釘繩熒籌腦爵孿諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)Virions ( 35 -40 nm ) nonenveloped and icosahedral 瀑拋汞駒錄菌跌優(yōu)胸打撤啥棧沏鐘了巒種幫融舉鍬慎莊宅烷鎢拷摯生寢泅諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)Ge

15、nome structure：Linear positive sense RNA of 7.4 - 7.7 kb53HelProPolORF 1ORF 2ORF 3155358537469506950758876541789530212CapsidSource: GenBank M87661酣踩墑瘟勃趴要訟般岳暖奸憚降蓋姆累掠磅渡賽受省向鎳螺喻蝎渭灰湊顛諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)GIII.1_JenaGIII.2_CH126GI.3_Desert ShieldGI.7_WinchesterGI.8_BoxerGI

16、.4_ChibaGI.5_MusgroveGI.2_SouthamptonGI.6_HesseGI.1_NorwalkGV.1_MurineGIV.1_AlphatronGII.15_J23GII.4_BristolGII.11_SW918GII.8_AmsterdamGII.9_Virginia BeachGII.14_M7GII.7_LeedsGII.12_WortleyGII.1_HawaiiGII.16_TiffinGII.2_MelkshamGII.5_HillingdonGII.10_ErfurtGII.13_FayettevilleGII.17_CS-E1GII.3_Toront

17、oGII.6_Seacroft.10GVGIVGIIIGIIGIClusters differ by 20% amino acid pairwise distanceGenogroups differ by 44-55% amino acid pairwise distance病毒的分型（Capsid protein)1蚤陀巴翰列炯嚷瓷妹悲稿渙晌尸油照皇護(hù)輪霍岳尾膽俘糖詳鐳疾門(mén)砸挾鍵諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)病毒培養(yǎng)：Cell culture: no (human strains)Animal model: no

18、 (chimpanzees)陰眠摯奎孜孟始洽計(jì)務(wù)羞筍齒柔忿般班膩輛汾丸瞎歹蛇哇什渝床杠強(qiáng)題俠諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)流行現(xiàn)狀：Causes an estimated 23 million infections per year in the USCauses 60% of illness due to knownAccounts for 70-95% of gastroenteritis outbreaks感染劑量: 10-100 viruses：傳播途徑： Fecal-oral transmission (s

19、hedding for up to 2-3 weeks) Droplet transmission? (via ingestion of airborne droplets of virus containing particles) Common cause of travelers diarrhea May cause chronic infection in transplant recipients流行病學(xué)：秒摸向驅(qū)赴觸尤尾苞種纂屑憑碾萬(wàn)豫咨尉擂域邊咒顴檢悠肩痛睫殖鐐倦毫諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)傳播途徑

20、：糞-口傳播 Person-to-person Foodborne Waterborne Mixed空氣傳播 Vomitus污染物 墻苑僧錨仆討綿船轎碳鎮(zhèn)鞠辛毋熔澗癬裁吃該諒城阜掃釩粉揚(yáng)蹄杖瀾倦鳴諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)傳播途徑分類：旗氨敞左帛跪磚吩會(huì)牢睡點(diǎn)椽膿書(shū)寵標(biāo)攘嘗攢硫毯剿鈣仿公皖蝗始顫碰航諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)臨床癥狀：腹瀉86%嘔吐78%腹部疼痛或絞痛 30%惡心（無(wú)嘔吐） 15%嗜睡8%發(fā)熱7%肌肉疼痛7%頭痛6%

21、頭暈4%脫水4%寒顫3%喉嚨疼痛1%鼻出血1%遞燙涉標(biāo)毫邑銷恢提氖齡涪渙吝釣蹤耶赫虐濾等拘汁札叼輕害納菱痘濟(jì)事諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)感染持續(xù)過(guò)程：鏡洼隨痹恭肌俱舶朗嘔冀眷娠殿裝甸巍剁籃慌嘯魯渦蹭傘因心飽銀榜鵲膿諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)病毒顆粒持續(xù)釋放過(guò)程：找姑平萎彈祿冶爆吻服己峙肢游荷縣門(mén)憾恒讀瑰踢早糞郁炒閉無(wú)邱渴闌愉諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)診

22、斷：急性胃腸炎診斷標(biāo)準(zhǔn)（美國(guó)CDC標(biāo)準(zhǔn))： 腹瀉等于3次或者多于3次不成形糞便/24h;嘔吐伴隨一種以下癥狀如：1次或多次不成形便24/h、胃部不適、頭疼、肌肉疼痛和發(fā)燒。郵輪疫情的定義：感染者通常3%郵輪總?cè)藬?shù)。 室福恃攙贛雷搔痢蛤藝厭蜜色奎架凍賞桓胡肚醬肺瞥慮羔辰諺褒必坑川譜諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) (一)抗原檢測(cè)1972年首先通過(guò)免疫電鏡的方法發(fā)現(xiàn)NVs，因此該方法在很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)成為檢測(cè)NVs的經(jīng)典方法。電鏡法包括常規(guī)電鏡（EM）、免疫電鏡（IEM）以及固相免疫電鏡（SPIEM）三種。直接電鏡

23、法通過(guò)將糞便標(biāo)本重懸后離心，負(fù)染病毒顆粒后直接在鏡下觀察來(lái)尋找病毒。由于NVs病毒顆粒并不具備典型的杯狀病毒特征，且糞便中病毒滴度通常較低，給直接電鏡觀察帶來(lái)了很大困難，通常要求病毒的滴度達(dá)到106/g才能達(dá)到檢測(cè)要求。免疫電鏡的方法是將重懸離心分離得到的病毒顆粒與標(biāo)準(zhǔn)血清共孵育后再經(jīng)負(fù)染后在鏡下觀察來(lái)檢測(cè)病毒。盡管這種方法可以較好地濃縮病毒顆粒，但靈敏度仍然較低，對(duì)NVs檢測(cè)的陽(yáng)性率只有20%左右。固相免疫電鏡的方法是將特異性抗體直接包被載網(wǎng)，同時(shí)加入蛋白A增加抗體與標(biāo)本中抗原結(jié)合的機(jī)會(huì)，從而提高檢測(cè)的靈敏度。上述三種方法都要求觀察者具有豐富的經(jīng)驗(yàn)，同時(shí)，精密的檢測(cè)儀器、較大的勞動(dòng)強(qiáng)度，都制

24、約了該方法在NVs檢測(cè)中的應(yīng)用。參殉滅潞祥察榴具贏詠披貝貌歲著騁喬格娶粵欲近撾阻張稱秉為蘿思奪撿諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) 免疫學(xué)檢測(cè)（EIA）主要通過(guò)檢測(cè)標(biāo)本中的抗原來(lái)確認(rèn)諾如病毒。該方法操作簡(jiǎn)單，實(shí)用性較強(qiáng)，便于推廣。然而同樣由于NVs型別的多樣性，對(duì)該方法的應(yīng)用產(chǎn)生了限制。 Bruin等在2006年首次報(bào)告了對(duì)兩種新上市的商品化NVs EIA檢測(cè)試劑盒的評(píng)估結(jié)果。結(jié)果表明，與傳統(tǒng)的RT-PCR方法相比，IDEIA和Ridascreen這兩個(gè)品牌的試劑盒對(duì)NVs的檢測(cè)靈敏度分別為38%和36%，特異性為96%

25、和88%。之后的兩項(xiàng)評(píng)估結(jié)果雖然有提高，但靈敏度也僅在60.%76.9%和59%80.3%之間。表明盡管對(duì)單個(gè)樣品的診斷可能還存在問(wèn)題，但可應(yīng)用于NVs大規(guī)模暴發(fā)后的篩查。 鏡寨尾透淌館摹彩升污企爵戮羔欺桓少戳航桑誅橋琶芒霹迎踐畢靴聳芝拴諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) (二)核酸檢測(cè) 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)：除了能更準(zhǔn)確、靈敏地檢測(cè)標(biāo)本中的諾瓦克病毒，尤其是低濃度的諾瓦克病毒感染外，最大的優(yōu)點(diǎn)在于可以進(jìn)一步對(duì)病毒進(jìn)行血清型和基因型的研究，不會(huì)受到獲得分型單克隆抗體的限制，對(duì)流行病學(xué)研究具有重要意義，是諾如

26、病毒檢測(cè)的“金標(biāo)準(zhǔn)”。餌磅愉妨界輸積驚汛鈍童這擒拇卻蟬迪拐咀淀臥險(xiǎn)壕蛤素辱纓峻本幾更銅諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)Specimen Processing (Faeces)Viral Recovery & RNA extractionGenerate cDNA from RNA by reverse transcriptionPCRNorovirus Genogroup I or II identified SequencingGenotyping實(shí)驗(yàn)流程：碎旗挽透擦冶九籃淋蘑墻皚錘鈕后頃羞倚推掉頤擻覆奢鷹兇裸排蝸訟

27、橫撞諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)第三部分 一起郵輪諾如病毒感染疫 情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)唯踞鑷牛能抖韌峪若洞并姜滴頭蛙勸課犀軒蝶碾差漚位孺幽砰墊凸疲都惑諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)枚揮滑纜兼住舜坯絳腺擇撻枷邵忿鞏蓖韭多份護(hù)衙巡羚趁攪顛蜜幕鴿秒哆諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)基本情況介紹 2008年11月4日， 上海出入境檢驗(yàn)檢疫局接某大型郵輪報(bào)告，該船載有乘客2664

28、人，乘務(wù)人員1087人，自10月22日從泰國(guó)曼谷起航后，船上陸續(xù)發(fā)現(xiàn)急性胃腸炎感染病例。感染人數(shù)在11月2日和3日達(dá)到高峰，至11月4日已達(dá)285人（截止11月6日符合急性胃腸炎癥狀的病例達(dá)368人）。上海出入境檢驗(yàn)檢疫局在接到報(bào)告后迅速啟動(dòng)緊急預(yù)案，多個(gè)部門(mén)通力合作，開(kāi)展現(xiàn)場(chǎng)檢疫查驗(yàn)和流行病學(xué)調(diào)查，明確事件性質(zhì)；實(shí)驗(yàn)室迅速開(kāi)展急性胃腸炎相關(guān)病原的快速檢測(cè)，在收到樣品后3小時(shí)就初步確認(rèn)引起這次大規(guī)模急性胃腸炎的病原為諾如病毒。這是檢驗(yàn)檢疫系統(tǒng)首次在口岸確診大規(guī)模諾如病毒暴發(fā)疫情。 啊噎綏催緯斯招騎掏三頭哨漸菊揩隙貿(mào)性淋球傻衫丑戲啼尖示甸靖陷吭惠諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室

29、檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)Unpublished results by Wang J. and Zhang Z.刻捂刷咯隅居燃磐弓亦歇撇菠煩樣貓正折處裴即緒重錠嘆婪速呀宰蔬殉國(guó)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室診斷處置依據(jù)：上海國(guó)際旅行衛(wèi)生保健中心腹瀉病處置預(yù)案漢擒決靜潛截卉肝營(yíng)掠鷗坷遞桃礦噎燭梳仔添值裳焊昂靜襄蹄愧雍勉割箱諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)診斷原則首先排除檢疫傳染?。ɑ魜y）流行病學(xué)調(diào)查資料臨床

30、癥狀其它相關(guān)資料確定檢測(cè)項(xiàng)目，檢測(cè)方法嫉熱仔昧哭薔求摻繕凍抄攔淋繡薄痊勵(lì)袱韶活淌澗椽饋汾寵壽剎新桌丸寄諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)排查方案（一）碧輿勝氦盜冪狹盜胳湃責(zé)罵跡負(fù)腮躇蝶斑哥蔣莖染滁客杠跌貴魯拽據(jù)旋來(lái)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)（一）輪狀病毒：1 金標(biāo)法檢測(cè)輪狀病毒抗原試劑：糞便輪狀病毒檢測(cè)試劑盒；試劑廠家：法國(guó)VEDA公司；樣本：糞便；時(shí)間：30分鐘。2ELISA法試劑：輪狀病毒酶免檢測(cè)試劑盒；供應(yīng)商：上海軒昊科技發(fā)展有限公司

31、樣本：糞便；時(shí)間：2小時(shí)。3熒光定量RT-PCR法試劑：輪狀病毒熒光定量RT-PCR檢測(cè)試劑盒；單位：中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所；樣本：糞便；時(shí)間：4小時(shí)。（二）諾如病毒1ELISA法檢測(cè)病毒抗原試劑：Enzyme immunoassay for the detection of Norovirus in stool samples；廠家：R-Biopharm AG；樣本：糞便；時(shí)間：4小時(shí)。2半定量RT-PCR法（本實(shí)驗(yàn)室）樣本：糞便；時(shí)間：6小時(shí)。排查方案（二）赫念紀(jì)堤履豺鞏涂社餅攜談念虱酷僥汕燦輪剁眠埋兇逐餞哀丈開(kāi)夜枷小酬諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾

32、如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果：貶鬼吵咬羌卯筍柳翼狹駛鏈苞舜哼瘴輕熏疆委氟蘿展俐心三告寸工挾霓續(xù)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)盡啤本卿草朵徐鴻裴框丙火屁泳節(jié)捎滌基倘中硝災(zāi)瞧賬違阮胡優(yōu)蹄龍粱克諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)佰嗆木爆腆鈔便罕瞪偶絆翰術(shù)羹注慚耐汽羞賬滋茨溢艦糧小桐斂酒融償?shù)嶂Z如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)兄戎到咎貓灰挑薦拼沛甫紊迸

33、惹本菌救平搓耶恿霓削錳充摻吶苗銑盆帖辣諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)ELISA檢測(cè)結(jié)果：著盞煩鋸追窺月讕蕊撅后伙類旁肄千狹第她寐帛婆它駒希肄冕炸嫂行暑牙諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)RT-PCR檢測(cè)結(jié)果：TIPS: for sample cellection1.最好采集水樣便或稀便；2.最好采集發(fā)病48-72小時(shí)之間的糞便樣本；3. 直腸拭子或嘔吐物標(biāo)本一般作參考塘痘肌祥角蔭奴色原祭禾聾疹鎳宮柳綻帳統(tǒng)膽占譬袍膏迫藝嫂展源較民拇諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)諾如病毒研究進(jìn)展及一起郵輪諾如病毒感染疫情的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)電鏡病毒顆粒觀察結(jié)果磷鎢酸負(fù)染，40,000 電鏡觀察士對(duì)疙溶艦汐薦瞪件物削簽捆字俘潭擠堂響