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文檔簡介
1、關(guān)于玻璃化褐化現(xiàn)象的防治第一張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月目錄何為褐化現(xiàn)象產(chǎn)生褐化的原因褐化的防治何為玻璃化產(chǎn)生玻璃化的原因玻璃化的防治第二張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月何為褐變褐變是指外植體在培養(yǎng)過程中體內(nèi)的多酚氧化酶被激活,使細(xì)胞里的酚類物質(zhì)氧化成棕褐色的醌類物質(zhì),這種致死性的褐化物不但向外擴(kuò)散致使培養(yǎng)基逐漸變成褐色,而且還會抑制其他酶的活性,嚴(yán)重影響外植體的脫分化和器官分化,最后變褐而死亡的現(xiàn)象。寶島蕉褐化輕微株系寶島蕉褐化嚴(yán)重株系第三張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月產(chǎn)生褐化的原因1.與基因型有關(guān) 一般來說植物材料中單寧類和多種羥酚類化合物的含量高,易引
2、起外植體材料的嚴(yán)重褐化。多數(shù)木本植物比草本植物易引起褐化,多年生草本植物比一年生草本植物易引起褐化。2.與取樣外植體的年齡有關(guān)通常幼齡部位產(chǎn)生褐化較輕,隨著組織的老齡化含醌類物質(zhì)增多而褐化加重。5.與外植體取材時(shí)間有關(guān)一般在春夏季,尤其是春季采取生長旺盛的外植體產(chǎn)生褐化較輕,已木栓化或木質(zhì)化的枝條和處于休眠狀態(tài)的芽作為外植體時(shí)褐化嚴(yán)重。即分生部位接種后形成醌類物質(zhì)少,而分化的部位則形成醌類物質(zhì)較多。第四張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月產(chǎn)生褐化的原因4.與培養(yǎng)基有關(guān)過高的無機(jī)鹽濃度會引起棕櫚科植物外植體酚的氧化,低鹽培養(yǎng)基,尤其是Mn2+和 Cu2+離子濃度較低時(shí),外植體的褐化程度較輕
3、。植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)使用不當(dāng)時(shí),材料也容易褐變培養(yǎng)基的PH值較低時(shí)常有利于減輕外植體的褐化。一般在液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基上褐化程度比在固體培養(yǎng)基上輕。3.培養(yǎng)條件不適宜如溫度過高、光照過強(qiáng)、培養(yǎng)時(shí)間過長等,均可使多酚氧化酶的活性提高,從而加速外植體的褐變。在咖啡組織培養(yǎng)中曾觀察到這一現(xiàn)象。第五張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月褐化的防治1.選擇適宜的外植體及最佳培養(yǎng)基玉米幼胚組織培養(yǎng)褐化發(fā)生因素的研究成年植株比實(shí)生幼苗褐變的程度嚴(yán)重,夏季材料比冬季及早春和秋季的材料褐變的程度強(qiáng)。而冬季的芽進(jìn)入深休眠狀態(tài),不太容易生長,所以最好選用早春和秋天的材料作為外植體。取材時(shí)還應(yīng)注意外植體的基因型
4、及部位,選擇褐變程度較小的品種和部位作外植體。 第六張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月外植體取樣時(shí)間白玉蘭組織培養(yǎng)過程中的褐化控制第七張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月外植體取樣部位部位不同品種牡丹幾個(gè)參數(shù)的比較及其與組培中褐化的關(guān)系第八張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月2.加抗氧化劑在培養(yǎng)基中加入抗氧化劑,或用抗氧化劑進(jìn)行材料的預(yù)處理或預(yù)培養(yǎng),可預(yù)防醌類物質(zhì)的形成??寡趸瘎┌箟难帷⒕垡蚁┻量┩橥?PVP)和牛血清白蛋白等。在靜止的液體培養(yǎng)基中加入抗氧化劑比在固體培養(yǎng)基中加入抗氧化劑,效果要明顯得多。在倒掛金鐘莖尖培養(yǎng)中加入0.01PVP便對褐變有抑制作用。白玉蘭
5、組織培養(yǎng)過程中的褐化控制第九張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月白玉蘭組織培養(yǎng)過程中的褐化控制第十張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月核桃組培中抑制褐化現(xiàn)象初探藏紅花愈傷組織誘導(dǎo)和褐化抑制植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)使用不當(dāng)時(shí),材料也容易褐變,細(xì)胞分裂素BA有刺激多酚氧化酶活性提高的作用,這一現(xiàn)象在甘蔗的組織培養(yǎng)中十分明顯3.植物生長調(diào)節(jié)劑第十一張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月4.連續(xù)轉(zhuǎn)移對于易褐變的材料進(jìn)行連續(xù)轉(zhuǎn)移可以減輕醌類物質(zhì)對培養(yǎng)物的毒害作用。在無刺黑莓的莖尖培養(yǎng)中,接種后12d就轉(zhuǎn)入新鮮培養(yǎng)基;在山月桂樹的莖尖培養(yǎng)中,接種1224h便轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基,然后繼續(xù)每天轉(zhuǎn)移1次,連
6、續(xù)7天,褐化便得到了完全控制。5.加活性炭10.5的活性炭對吸附酚類氧化物的效果很明顯。在許多熱帶樹木的組織培養(yǎng)中均曾觀察到活性炭防止外植體褐變的明顯效果。第十二張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月4.培養(yǎng)條件如溫度過高、光照過強(qiáng)、培養(yǎng)時(shí)間過長等,均可使多酚氧化酶的活性提高,從而加速外植體的褐變。白玉蘭組織培養(yǎng)過程中的褐化控制第十三張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月何為玻璃化在進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí),經(jīng)常會發(fā)現(xiàn)試管苗生長異常,表現(xiàn)為試管苗葉、嫩梢呈水晶透明或半透時(shí),水浸狀;整株矮小腫脹、失綠;葉片皺縮成縱向卷曲、脆弱易碎;葉表缺少角質(zhì)層蠟質(zhì),沒有功能性氣孔,不具有柵欄組織,僅有海綿組
7、織。這種試管苗生長異?,F(xiàn)象就是P.Debergh(1981)首先命名的“玻璃化”(Vitrification)。是植物組織培養(yǎng)過程中所特有的一種生理失調(diào)或生理病變。 第十四張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月第十五張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月玻璃化產(chǎn)生的原因及防治 材料差異,在不同的種類、品種間,組培苗的玻璃化程度有所差異。 激素水平過高,若細(xì)胞分裂素濃度過高或細(xì)胞分裂素與生長素相對含量高,易引起玻璃化現(xiàn)象。第十六張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月蝴蝶蘭類原球莖玻璃化產(chǎn)生的原因及恢復(fù)效果研究1香石竹組培中的玻璃化現(xiàn)象及防止 適當(dāng)降低培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素和赤霉素的濃度。
8、第十七張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 培養(yǎng)基水勢,培養(yǎng)基中離子種類,比例不適?;ㄩ苯M織培養(yǎng)中玻璃化現(xiàn)象的發(fā)生與防治 適當(dāng)提高培養(yǎng)基中蔗糖含量或加入滲透劑,降低培養(yǎng)基中的滲透勢,減少培養(yǎng)基中植物材料可獲得的水分,造成水分脅迫。第十八張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 環(huán)境溫度、光照強(qiáng)度和通氣性。溫度過低或過高,光照時(shí)間強(qiáng)度不足及培養(yǎng)容器中空氣濕度過高,透氣性較差所造成的通氣不良,易造成組培苗含水量高,從而發(fā)生玻璃化現(xiàn)象?;ㄩ苯M織培養(yǎng)中玻璃化現(xiàn)象的發(fā)生與防治 降低培養(yǎng)容器內(nèi)部環(huán)境的相對濕度。 改善培養(yǎng)容器的通風(fēng)換氣條件,如用棉塞或通氣好的封口膜封口。第十九張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月不通風(fēng)型通風(fēng)型第二十張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 瓊脂濃度降低、有雜質(zhì)等。
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