1、第二節(jié) 精液品質(zhì)檢查一、精液的外觀(guān)性狀檢查采精量 采精后將精液盛裝在有刻度的試管或集精杯中，即可測(cè)知精液量的多少。豬、馬精液應(yīng)用46層消毒紗布過(guò)濾或離心處理，除去膠狀物質(zhì)。顏色 精液一般為乳白色或灰白色。氣味 正常精液的氣味帶有腥味。云霧狀 精液放在容器中液面呈上下翻滾，像云霧一樣。二、精子活力檢查活力 指精液中作走直線(xiàn)運(yùn)動(dòng)的精子占整個(gè)精子數(shù)的百分比。檢查方法 平板壓片法和懸滴法兩種。評(píng)定 采用“十級(jí)一分制”的方法來(lái)評(píng)定精子活力。載玻片預(yù)溫精液稀釋取樣檢查鏡檢活力估測(cè)活力記錄將恒溫加熱板放在載物臺(tái)上，打開(kāi)電源并調(diào)整控制溫度至37，然后放在載玻片 將生理鹽水與精液等溫后，按1:10稀釋 取10u

2、l放在預(yù)溫后載玻片中間，蓋上蓋玻片 在400倍顯微鏡下觀(guān)察 判斷視野中直線(xiàn)前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子所占的百分率 按十級(jí)一分制評(píng)分和記錄 例：牛精子活力檢查的程序奧林巴斯顯微系統(tǒng)三、精子密度檢查精子密度是指單位體積(1ml)精液內(nèi)所含有精子的數(shù)目。（一）估測(cè)法 通常結(jié)合精子活力檢查來(lái)進(jìn)行，根據(jù)顯微鏡下精子的密集程度，把精子密度大致分為“密、中、稀”三個(gè)等級(jí)。（二）血細(xì)胞計(jì)數(shù)法 用血細(xì)胞計(jì)數(shù)法定期對(duì)公畜的精液進(jìn)行檢查，可較準(zhǔn)確地測(cè)定精子密度。（三）光電比色法 普遍應(yīng)用于牛、羊精液的密度測(cè)定。此法快速、準(zhǔn)確、操作簡(jiǎn)便。（四）精子密度儀 操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速。（一）估測(cè)法：在低倍顯微鏡下根據(jù)精子之間的距離來(lái)定，分

3、為密、中和稀三等。（二）血細(xì)胞計(jì)數(shù)法在顯微鏡下找到計(jì)算板的方格稀釋精液鏡檢計(jì)算：1ml原精液精子數(shù) =55101000稀釋倍數(shù)數(shù)碼顯微鏡4#下1個(gè)大方格即25個(gè)中方格數(shù)碼顯微鏡40#下一個(gè)大方格注入計(jì)數(shù)室前各種家畜精液建議稀釋比例畜 種牛羊豬馬雞稀釋倍數(shù)10020040404003%氯化鈉ul原精液 ul5005100052005200520005注意：讓稀釋后的精液通過(guò)毛細(xì)作用自行吸入！用吸管稀釋后精液注入計(jì)數(shù)室共有兩個(gè)對(duì)稱(chēng)的計(jì)數(shù)室進(jìn)行精子計(jì)數(shù)的中方格數(shù)可以是四角一中心共5個(gè)中方格也可以是從左角到右下角五個(gè)中方格以圖示次序計(jì)數(shù)，精子的頭部為準(zhǔn)，依數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左右不數(shù)右的原則進(jìn)行計(jì)數(shù)格線(xiàn)上的

4、精子。白色精子不計(jì)數(shù)數(shù)碼顯微鏡40#下一個(gè)大方格內(nèi)的精子利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)法測(cè)定牛精子密度放計(jì)數(shù)板于載物臺(tái)上取樣稀釋精液精液注入計(jì)數(shù)室鏡檢精子計(jì)數(shù)密度計(jì)算計(jì)算板和蓋玻片一定要清潔，并分別在100倍和400倍的鏡下找到計(jì)算板的方格取500ul 3%氯化鈉于小試管中,加入5ul原精液,混合均勻取25ul小心地從計(jì)算板與蓋玻片的接縫中加入,使其自行吸入計(jì)數(shù)室中用400倍觀(guān)察 計(jì)數(shù)有代表性的五個(gè)中方格的總精子數(shù),計(jì)數(shù)原則以頭部壓線(xiàn)為準(zhǔn),“數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右 ”精子密度= 5個(gè)中方格總精子數(shù)5101000 稀釋倍數(shù)(100)數(shù)碼顯微鏡 （三）光電比色法 是根據(jù)精子的透光性而測(cè)定精子數(shù)的方法。透光性越高，

5、則精子數(shù)越少，透光性越差，則精子數(shù)越多。現(xiàn)在甚至可與計(jì)算機(jī)聯(lián)接，立即知道被測(cè)精液的活率和密度。 （四）精子密度儀各種家畜精液的精子密度畜種牛 羊豬馬雞密度 億/ml8-1220-302-31.5-330-50各種家畜精子密度比較四、精液的其他檢查（一）精子畸形率檢查 正常情況下畸形率牛、豬不超過(guò)18%，馬不超過(guò)12%、羊不超過(guò)14%。超過(guò)20%視為精液品質(zhì)不良。 方法：一滴精液 拉片干燥 紅、籃墨水染色 3min 水洗 干燥、鏡檢(400倍)頭部：巨大，細(xì)小，缺失，雙頭，輪廓不明顯，皺縮頸部：臌大，纖細(xì)，彎曲，不全，原生質(zhì)滴尾部：屈折，帶原生質(zhì)滴，雙尾，折斷，纖細(xì)畸形精子雙頭和雙尾精子畸形精子

6、畸形精子視野中的畸形精子（二）精子生存時(shí)間和生存指數(shù) 1.精子生存時(shí)間：指精子在體外一定條件下的總生存時(shí)間。具體計(jì)算方法：所有間隔時(shí)間累加后減去最后兩次間隔時(shí)間的一半即為精子的存活時(shí)間。2.精子生存指數(shù)：相鄰兩次檢查的間隔時(shí)間與平均活力的積之和。 是精子存活時(shí)間與精子活率下降變化的一項(xiàng)綜合指標(biāo)。精子生存時(shí)間越長(zhǎng)，則生存指數(shù)越大，說(shuō)明精子生活力越強(qiáng)，品質(zhì)越好。 檢查時(shí)間間隔時(shí)間(h)活率2次檢查平均活率h平均活率日/月 時(shí)間6/4 600.8 1480.60.75.6 2280.50.554.47/4 680.30.43.2 1480.20.252.0 2280.10.151.28/4 68擺動(dòng)

7、0.050.4 = 48= 16.8生存時(shí)間：48-8/2=44h生存指數(shù)： h平均活率=16.8精子生存時(shí)間=所有間隔時(shí)間累加后減去最后兩次間隔時(shí)間的一半精子生存指數(shù)=相鄰兩次檢查的間隔時(shí)間與平均活力的積之和（三）精子頂體異常率精子頂體正常與否是和精子存活、受精能力有密切的關(guān)系。頂體異常有頂體膨脹、缺損、部分脫落、全部脫落等。在正常情況下，牛的頂體異常率不超過(guò)5.9%，豬不超過(guò)2.3%，如頂體異常率顯著增加，牛超過(guò)14%，豬超過(guò)4.3%,會(huì)直接影響受精率。新鮮精液經(jīng)過(guò)保存或低溫打擊，精子的頂體異常率顯著增加，牛為14.1%，豬為4.3%，精液經(jīng)過(guò)冷凍后變化更大，牛40%，豬45%。（四）美藍(lán)褪色試驗(yàn) 美藍(lán)是氧化還原劑，氧化呈藍(lán)色，還原呈無(wú)色，精子在美藍(lán)溶液中，呼吸時(shí)氧化脫氫，美藍(lán)獲得H+后便使藍(lán)色還原為無(wú)色。因此，根據(jù)美藍(lán)褪色時(shí)間可測(cè)知精液中存活精子數(shù)量多少，判定精子的活率和密度高低。 （五）精液果糖分解測(cè)定 精液果糖分解能力與精子活力密切相關(guān)，因此測(cè)定一億精子每小時(shí)消耗果糖的mg數(shù)來(lái)表示 精子的果糖分解能力，甚至