1、1.骨髓穿刺涂片檢查骨髓穿刺涂片檢查適應(yīng)癥及禁忌癥：骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的診斷意義許多情況下是有一定價(jià)值的。比外周血細(xì)胞檢查更為深入全面但并非適用于任何疾病的診斷，不可濫用。在骨髓檢查前，首先完成血常規(guī)等項(xiàng)目的有關(guān)檢查，在決定有無(wú)查骨髓的必要性，須在治療前進(jìn)行為宜，因?yàn)橛械募膊≡谥委熀蠊撬杈涂梢园l(fā)生變化，以致掩蓋了骨髓原來(lái)真實(shí)的病理情況。1骨髓穿刺的適應(yīng)癥：2禁忌癥：一般認(rèn)為血友病是骨髓穿刺檢查的維一的禁忌癥，文南非中有因胸髓穿刺術(shù)引起主動(dòng)脈，心包出血，致死的報(bào)導(dǎo)，髂骨嵴突穿刺則比較安全。3二、骨髓穿刺術(shù)采用穿刺吸取法，穿刺部位成人常在骼后，髂前上嵴，其次胞骨及脊突及局部，定位穿刺（可疑飛病灶部位）

2、3歲經(jīng)下嬰幼兒可穿刺脛兒可穿刺脛骨頭部?jī)?nèi)側(cè)，在較大的兒童與成人穿刺部位相同。不同骨穿部位的取材可有顯著差異骨差異。骨差異骨髓造血呈所謂向心學(xué)說(shuō)的分布。遇有骨穿取材不佳抽出血液（BLOOD TUP）發(fā)生干抽（DRY TUP）骨髓壞死或過(guò)度增生致密栓等情況應(yīng)改其他部位（多部位）或胸骨穿刺或骨髓活檢。4三、骨髓取材成功的指標(biāo)：1.抽吸骨髓時(shí),患者有特殊疼痛感:不宜0.3ML2.骨髓液中或涂片片尾含骨髓小粒.3.鏡下以骨髓造血的粒紅系幼稚細(xì)胞,巨核細(xì)胞為主,成熟粒細(xì)胞及淋巴少,并可見(jiàn)骨髓支架細(xì)胞存在.4.微量取材成功與否,應(yīng)與臨床與血液學(xué)檢查資料綜合分析,穿刺術(shù)是不是順利,取材成功與否,穿刺者是最為清

3、楚的.5四、骨髓液檢查項(xiàng)目：1.涂片細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查:骨髓穿刺液或活檢標(biāo)本涂片殘液涂片,經(jīng)瑞氏或姬姆薩染色形態(tài)及細(xì)胞化學(xué)染色檢查.2.濕片相差鏡檢查活體死前染色如臺(tái)盼壯大粕焦油藍(lán)或中性紅-真那綠染色.3.有核細(xì)胞計(jì)數(shù):正常值50-300*109/L.4.骨髓液比積測(cè)定:置加雙劃酸鹽混合坑凝劑的骨髓液于溫氏(WINTROBE)比積管中離心3000RPM/30分鐘.觀察脂肪血漿與細(xì)胞分層的體積正常值:最上脂肪層約3.2%,其次血漿層約45%再次為有核細(xì)胞層約4-6%,最下層紅細(xì)胞45%.5.將骨髓小粒制成印片或放置福爾林液中固定作病理切片檢查.6.無(wú)菌操作抗凝骨髓液作細(xì)菌或細(xì)胞培養(yǎng)及染色體短期培養(yǎng)或

4、作梯度離心細(xì)胞分離,作干細(xì)胞、單克隆抗體免疫表型等檢查。6五、骨髓活檢檢查此項(xiàng)檢查屬于病理學(xué)范圍不歸細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查，但近年來(lái)也廣泛用于臨床診斷。主張將骨穿涂片與骨穿活檢切片兩種檢查有機(jī)地相輔相成加以應(yīng)用，更加全面地了解骨髓液細(xì)胞成分和骨髓組織學(xué)病理改變。這樣使臨床血細(xì)胞學(xué)與血液病理學(xué)與人員互相滲透與配合，必將達(dá)到新的工作效應(yīng)。7六、骨髓有核細(xì)胞增生度但是從涂片上估計(jì)有核細(xì)胞增生度，可受到取材好壞，涂片的厚薄等影響，不及骨髓活檢為分母數(shù)，粒系為分子數(shù)，兩者之比即M/E。M/E正常范圍，1.5-5:1,高于正常范圍高界為M/E增高,顯示粒系增生顯著低于正常范圍代界為M/E減低.顯示紅系增生顯著.低

5、于正常范圍低界為M/E減低.顯示紅系增生顯著,而M/E在正常范圍之內(nèi),也不能排除骨髓的病變.此外由髓系白血病的混合型和全髓性白血病M6、M4、CMML、M/E不能表達(dá)病變細(xì)胞與紅系比值時(shí)可用M/E、MO/E、MK/E、M+M0/E、M+M0+MK/E、M+MK/E、M0+MK/E、的各類細(xì)胞/E比值表示法（1-2）8表 骨髓增生度標(biāo)準(zhǔn)增生度 標(biāo)準(zhǔn)/紅（無(wú)核）細(xì)胞：有核細(xì)胞（1）常見(jiàn)疾病增生極度活躍1-5白血病、紅白血病、溶血性貧血增生明顯活躍6-10白血病、紅白血病、MDS、溶貧、增生性貧血增生活躍11-20正?；蚋鞣N血液病等增生活躍21-40造血功能或取材輕度減低/稀釋增生低下41-100再

6、障、骨髓纖維化、骨髓轉(zhuǎn)移瘤、干抽、取材失敗等增生極度低下100以上再障、骨髓纖維化、取材失敗等9骨髓細(xì)胞形態(tài)檢查步驟：1.涂片肉眼觀察：制備好涂片在未染色及染色后都必須先用肉眼觀察； （1）確定標(biāo)本的取材、涂片是否“合格”，涂膜面厚薄，有無(wú)脂肪珠及“骨髓小?！薄＃?）某些血液病患者未染色骨髓涂片特點(diǎn)可作為診斷參數(shù)指標(biāo)；如某些再生障礙性貧血病人涂片膜面可見(jiàn)甚多或呈現(xiàn)一片脂肪珠。真性紅細(xì)胞增多癥則涂膜短，不易推成薄膜，色澤似紅磚。10 白細(xì)胞的涂膜呈現(xiàn)一片均一淡灰乳白粒狀排列。如若經(jīng)染色后，顯深黃色，提示有核細(xì)胞增生顯著。 1.低倍鏡觀察：觀察標(biāo)本全貌概況 (1)取材、涂片、染色的好壞：染色是識(shí)別

7、細(xì)胞形態(tài)的主要標(biāo)記的工序：染色的優(yōu)劣與染料、緩沖液的質(zhì)量及其比例，染色時(shí)間和手法有很大關(guān)系，骨髓涂片不不宜一次全部染色，應(yīng)先染3-5張，其余可做細(xì)胞化學(xué)染色用。 (2)有核細(xì)胞多少(判定增生程度)及其分布；粒與紅系的比例及各階段比例的初步印象。 (3)尋找異常細(xì)胞如轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞等。 (4)選擇油鏡檢查區(qū)域：要求能代表此涂片細(xì)胞的基本情況，有核細(xì)胞多，分布均勻，形態(tài)舒展、清晰易辨認(rèn)。114.油鏡檢查 觀察細(xì)胞形態(tài)及進(jìn)行有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。一般油鏡觀察區(qū)域在涂片血膜的體尾交界部位，分類計(jì)數(shù)時(shí)標(biāo)本上下壓邊移動(dòng)，驗(yàn)證低倍鏡檢查所得的初步印象。 (1)骨髓有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，換算百分率 (%)及各系（粒紅）所

8、占百分比和粒紅比例(M/E)。 (2)粒系所占%及各階段比例；觀察核移向(左移、右移)及形態(tài)的改變。 (3)紅系所占 % 及各階段比例；觀察形態(tài)有無(wú)異常(巨幼變、類巨幼變及雙核、多核、核分裂等殘余物)、多嗜性紅細(xì)胞多少、成熟紅細(xì)胞形態(tài)及排列等。(4)淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞有無(wú)數(shù)與質(zhì)（形態(tài)異常，不成熟階段）的病理改變。12(5)巨核系：數(shù)量個(gè)/片（面積），分類及產(chǎn)血小板巨核細(xì)胞所占比例。病理性巨核細(xì)胞（巨大異常巨核、亞小型、小型微型巨核）要計(jì)數(shù)1000個(gè)有核細(xì)胞過(guò)程中可見(jiàn)病理性小型、微型及亞小型巨核細(xì)胞多少。血小板數(shù)與質(zhì)（形態(tài)、大小、聚集性等）改變。(6)其他非造血支架細(xì)胞的觀察，這類細(xì)胞種類繁多，

9、數(shù)量少，都在涂片尾部或邊緣處。在分類計(jì)數(shù)中可能比實(shí)際為低。此類細(xì)胞在涂片中的反映，對(duì)于診斷與鑒別診斷有一定輔助意義。 (7)異常細(xì)胞：如 轉(zhuǎn)移瘤細(xì)胞、高雪氏細(xì)胞、N-P細(xì)胞、惡組細(xì)胞等。13二.血細(xì)胞形態(tài)檢查報(bào)告書寫內(nèi)容： （一）骨髓涂片檢查報(bào)告內(nèi)容： 1.先將有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)相加等于100，粒系，紅系所占和M/E填入分類欄目?jī)?nèi)； 2.說(shuō)明取材，涂片及染色情況； 3.按下列提綱程序書寫報(bào)告內(nèi)容：14（1）確定骨髓增生程度及主要成分，一般可用M/E表示，其他系細(xì)胞占據(jù)時(shí)可用文字說(shuō)明（2）說(shuō)明主要病變的特征；（3）粒系：增生情況占，各階段比例，核移向（左移、右移）形態(tài)發(fā)育與異常改變，還要注意嗜酸性

10、及嗜堿性粒細(xì)胞情況；（4）紅系：增生情況占，各階段比例，形態(tài)有無(wú)異常（如類巨幼變、核殘余物、雙核、多核等）成熟紅細(xì)胞形態(tài)。（5）淋巴及單核細(xì)胞：在正常情況下均不在骨髓內(nèi)發(fā)育生成。多為隨血微循環(huán)流入骨髓中，一般情況可加描述。只有其數(shù)量明顯增多或出現(xiàn)不成熟者及形成異常時(shí)應(yīng)加描述。156.巨核系數(shù)量、分類及產(chǎn)血小板情況，形態(tài)有無(wú)異常，特別出現(xiàn)病理性巨核細(xì)胞（巨大型、亞小型、小型微型）或血小板有關(guān)的疾病時(shí)，應(yīng)將巨核系及血小板作為重點(diǎn)觀察。7.漿細(xì)胞數(shù)量與形態(tài)，有無(wú)病理性或不成熟漿細(xì)胞。8.造血與非造血細(xì)胞島及非造血支架細(xì)胞增生情況。9.注意涂片中有無(wú)巨大異形及腫瘤細(xì)胞等。10.寄生蟲(chóng)。16（二）外周血涂片報(bào)告內(nèi)容1.WBC數(shù)及主要成分。2.分類、各類白細(xì)胞比例及形態(tài)是否正常。3.有無(wú)不成熟白細(xì)胞、有核紅細(xì)