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1、植物組織培養(yǎng)實驗瞄實驗一:培養(yǎng)基的配制與滅菌121001233周玥一、實驗?zāi)康恼莆瘴⑸飳嶒炇页S貌A髅蟮那逑醇鞍椒?。掌握培養(yǎng)基的配置方法。掌握高壓蒸汽滅菌的操作方法。二實驗原理由于微生物種類及代謝類型的多樣性,用于培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基的種類也很多。它 們的配方及配制方法雖各有差異,但一般培養(yǎng)基的配制程序卻大致相同。例如器皿 的準(zhǔn)備,培養(yǎng)基的配制與分裝,棉塞的制作,培養(yǎng)基的滅菌,以及培養(yǎng)基的無菌檢 查等基本環(huán)節(jié)大致相同。三、實驗材料藥品:母液1(大量元素)-濃縮20倍;母液2 (微量元素)-濃縮200倍母液3(鐵鹽)-濃縮200倍;母液4(維生素)-濃縮200倍激素:6-BA( 0.5mg
2、/L) NAA(0.1mg/L)瓊脂(0.65%)蔗糖(3%)無菌水儀器及玻璃器皿:天平、高壓蒸汽滅菌鍋、移液管、試管、燒杯、量筒、培養(yǎng)皿。儀器設(shè)備:電子天平、燒杯、試管、玻璃棒、藥勺、培養(yǎng)皿、濾紙其他物品:藥匙、稱量紙、pH試紙、記號筆、棉花等。四、實驗步驟1、玻璃器皿清洗:玻璃器皿在使用前必須洗刷干凈。將 試管、培養(yǎng)皿、量筒等浸入含有洗滌劑的水中.用毛刷刷 洗,然后用自來水及蒸餾水沖凈。移液管先用含有洗滌劑 的水浸泡,再用自來水及蒸餾水沖洗。晾干后備用。2、量取母液:量取 MS1-4ml ; MS2-2ml ;MS3-2ml ; MS4-2ml加激素:6-BA-0.5ml ; NAA-0.1ml瓊脂:2.6g蔗糖:12g3、加水定容至400ml4、攪勻后調(diào)PH值至5.85、用微波爐加熱溶解5-6分鐘,冒泡即可拿出;或用電 磁爐加熱較為快捷6、分裝,包扎,貼標(biāo)簽7、培養(yǎng)基滅菌:高壓蒸汽滅菌法(濕熱滅菌)8、無菌檢查:將已
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