1、不同方法測(cè)定單寧（tannin）含量的比較研究測(cè)定單寧含量的方法一、比色法 二、EDTA絡(luò)合滴定法 三、高錳酸鉀滴定法 三種方法的比較 方法一、 比色法一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?了解單寧的性質(zhì)及熟練掌握單寧含量的測(cè)定方法二、實(shí)驗(yàn)原理 樣品中的單寧在堿性溶液中將磷鎢鉬酸還原，生成深藍(lán)色化合物，其顏色的深淺與單寧的含量成正比，可與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較定量。三、材料、儀器與試劑 1、材料： 香蕉（未熟透）50g 2、儀器： 天平 組織搗碎機(jī) 燒杯 移液管 分光光度計(jì) 容量瓶 恒溫箱 （30） 3、試劑 ：2、樣品測(cè)定 果實(shí)去皮，迅速稱取50g，加入95%乙醇 50mL、偏磷酸50mL、水50mL，置于高速組織搗碎機(jī)中

2、打漿1min（或在研缽中研磨成漿狀）。稱取勻漿20于100容量瓶中，加75%乙醇40mL，在沸水浴中加熱20min，冷卻后用75%乙醇稀釋至刻度。充分混合，以慢速定量濾紙過(guò)濾，棄去初濾液。 吸取上述濾液2置于已盛有25mL蒸餾水、2.5mLF-D試劑的50mL容量瓶中，然后加入，劇烈振搖后，以水稀釋至刻度，充分搖勻（此時(shí)溶液的藍(lán)色逐漸產(chǎn)生）。同時(shí)做空白試驗(yàn)。 于30 恒溫箱中放置后，用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)處，以試劑空白調(diào)零，測(cè)定吸光值。 四、結(jié)果計(jì)算式中: x樣品中單寧的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%； c 比色用樣品溶液中單寧的含量（由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得 ），g； m 樣品質(zhì)量，g； K 稀釋倍數(shù)，如按上述方法取樣50

3、時(shí)，K=（20/200）（2/100）=1/500 五、注意事項(xiàng) 1、樣品處理時(shí)要盡快進(jìn)行，以免單寧氧化而造成誤差。 2、維生素C也能與F-D試劑作用產(chǎn)生藍(lán)色，因此當(dāng)樣品含有維生素C時(shí)需要進(jìn)行校正，1維生素C相當(dāng)于0.8單寧酸。方法二、EDTA絡(luò)合滴定法一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?了解單寧的性質(zhì)及熟練掌握單寧含量的測(cè)定方法二、實(shí)驗(yàn)原理 根據(jù)單寧可與重金屬離子形成絡(luò)合物沉淀的性質(zhì)，在樣品提取液中加入過(guò)量的標(biāo)準(zhǔn)Zn(Ac)2溶液，待反應(yīng)完全后，再用EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定剩余的，根據(jù)EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的消耗量，可計(jì)算出樣品中單寧的含量。 三、材料、儀器與試劑 1、材料： 香蕉（未熟透）5g 2、儀器：容量瓶 電子天

4、平 研缽 堿式滴定管 3、試劑：1.000 mol/L醋酸鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取Zn(Ac)2H2 O 21.95g,用水溶解后定容至100mL。0.0500 mol/L乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取乙二胺四乙酸二鈉9.306g,溶解于水，并用水稀釋至500mL.pH=10的NH3-NH4Cl緩沖溶液：稱取54gNH4Cl 加水溶解后加入濃氨水350mL,用水定容至1000mL。鉻黑T指示劑：稱取0.59鉻黑T，溶于10mL pH=10的NH3-NH4Cl緩沖溶液中，用95%乙醇定容至100mL。四、實(shí)驗(yàn)步驟 1.樣品處理 稱取切碎混勻的樣品510g，置于研缽中，加少許石英砂研磨

5、成漿狀（干樣品經(jīng)磨碎過(guò)篩后，準(zhǔn)確稱取12g），轉(zhuǎn)入150mL錐形瓶中，用50mL水分多次洗凈研缽，洗液一并轉(zhuǎn)入錐形瓶中，振動(dòng)、提取1015min.2.絡(luò)合沉淀 在100mL容量瓶中，準(zhǔn)確加入Zn（Ac）2標(biāo)準(zhǔn)溶液5mL、濃氨水3.5mL，搖勻（開(kāi)始有白色沉淀產(chǎn)生，搖動(dòng)使沉淀溶解）。慢慢將提取物轉(zhuǎn)入容量瓶中，不斷振搖，在35水浴中保溫結(jié)果計(jì)算式中: 樣品中單寧的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，（）標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，吸?。ǎ?biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mLEDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度， V2滴定時(shí)消耗標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積， mL0.1556由實(shí)驗(yàn)得出的比例常數(shù)，樣品質(zhì)量， 10分取倍數(shù)，及樣品絡(luò)合沉淀后定容至100mL，吸取其中的1/10進(jìn)行滴

6、定。 三角瓶（100mL） 量筒10mL 25mL堿式滴定管 容量瓶 100mL 恒溫水浴鍋50 3 、試劑 0.01 mol/L KMnO4 標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取約1.60g KMnO4溶于1000mL蒸餾水中，蓋上表面皿，加熱至沸并保持微沸狀態(tài)約1h。冷卻后，放暗處約一周后用垂熔玻璃漏斗或玻璃絲過(guò)濾。將濾液轉(zhuǎn)至棕色瓶?jī)?nèi)暗處保存。用NaC2O4標(biāo)定KMnO4 。 2.5 mol/L硫酸溶液：取138.8mL濃硫酸稀釋至1000mL。 活性炭 四、操作步驟 1、稱取5g樣品在研缽中研磨成勻漿，用漏斗轉(zhuǎn)移容量瓶定容至 100mL，混勻后用干燥濾過(guò)濾，保留濾液。2、吸取樣品濾液5.0mL，于100mL三

7、角瓶中，加10mL水和5mL 2.5 mol/L H2SO4，混勻，微熱（50）5min后用0.01 mol/L KMnO4 標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至淡粉色維持30s不褪色即為終點(diǎn)，記下消耗的體積V1，重復(fù)一次做兩個(gè)平行樣。3、吸取樣品濾液5.0mL，于100mL燒杯中，并加3g活性炭，加熱攪拌10min，過(guò)濾用少量的熱蒸餾水沖洗殘?jiān)?，收集的濾液中加2.5 mol/L硫酸5mL，同樣用0.01 mol/L KMnO4 標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至終點(diǎn)，記下消耗的體積V2,重復(fù)一次做兩個(gè)平行樣。 式中： CKMnO4 摩爾濃度，mol/L V1滴定樣品消耗KMnO4 的毫升數(shù)，mL V2活性碳吸附單寧后所消耗的KMnO4的毫升數(shù)，mL W樣品克數(shù)，g 0.04161mL 0.01 mol/L KMnO4 溶液相當(dāng)于單寧的毫克數(shù)，mg六、記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果項(xiàng)目樣品活性碳吸附后樣品消耗VKMnO4 （mL）平均消耗VKMnO4 （mL）單寧含量（mg/100g）七、注意事項(xiàng)1、過(guò)濾時(shí)由于溶液粘度大，過(guò)濾緩慢，只保留接下來(lái)的10mL濾液，以部分代整體。且過(guò)濾時(shí)要用干燥濾紙。2、開(kāi)始滴定時(shí)反應(yīng)速度慢，待溶液中產(chǎn)生了Mn2+后，由于