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1、堿法提取川芎多糖的研究【摘要】目的研究堿法提取川芎多糖的最正確工藝條件。要領(lǐng)接納單因素實(shí)行和正交方案研究溫度、時(shí)間、氫氧化鈉溶液濃度、料液比對(duì)川芎多糖提取的影響。效果提取的最正確工藝條件為:提取溫度為95,提取時(shí)間為150in,氫氧化鈉溶液濃度為0.8l/L,料液比1200g/l。結(jié)論堿法提取川芎多糖提取率較低?!娟P(guān)鍵詞】堿法川芎多糖提取Abstrat:bjetiveTstudytheptiupressfextratingplysaharideinLigustiuhuanxingHrt.ethdsUsingsinglefatrexperientandrthgnaldesign,theeffet
2、fteperature,extratintie,nentratinfNAHandratifslidtliqurntheextratinfLigustiuhuanxingHrtplysaharideerestudied.Resultsptiutehnlgialnditinareasflls:extratinteperature95,treatenttie150in,ratifslidtliqurat1200andnentratinfNAHat0.8l/L.nlusinTheprdutfplyssaharidesbyalkalineisler.Keyrds:Alkaline;Ligustiuhua
3、nxingHrt;Plysaharide;Extratin川芎LigustiuhuanxingHrt的根莖為其藥用部位,具有抗菌、抗放射線輻射、按捺白血病細(xì)胞等作用。川芎含有多種有用身分,但對(duì)多糖的研究甚少1。多糖是天然界中糖類化合物常見的存在情勢(shì),重要泉源于植物、動(dòng)物或微生物。多糖用途種種百般,如落血糖及落膽固醇、治療便秘、免疫促進(jìn)等作用2。因此,有用提取川芎中的多糖,對(duì)進(jìn)一步研究其布局、作用、成效具有緊張意義。堿可以或許排除植物細(xì)胞壁中的-1,4-糖苷鍵,同時(shí)堿法提取裝備要求低,要領(lǐng)輕便,質(zhì)料自制且利于消費(fèi)。本文重要研究接納堿來提取川芎中多糖的工藝要領(lǐng),為川芎多糖的研究提供參考。1質(zhì)料與儀
4、器1.1樣品川芎購于成都中藥材市場,枯燥,破壞,過40目篩,待用。1.2試劑氫氧化鈉,蒽酮,無水乙醇,硫酸,95%乙醇,冰醋酸,石油醚,氯仿,正丁醇,丙酮,葡萄糖,活性炭,各試劑均為國產(chǎn)闡發(fā)純。1.3儀器HH-S數(shù)顯恒溫水浴鍋江蘇省金壇市醫(yī)療儀器廠;SHB-3循環(huán)水多用真空泵鄭州杜甫儀器廠;電熱恒溫鼓風(fēng)枯燥箱和電熱恒溫造就箱上海齊欣科學(xué)儀器;電子天平北京賽多利斯天平;PHS-25型酸度計(jì)成都科技開拓公司;entrifuge5810冷凍離心機(jī)美國Bekan公司消費(fèi);78-1磁力加熱攪拌器金壇市富華;722光柵分光光度計(jì)上海細(xì)密科學(xué)儀器;F80型高速全能試樣破壞機(jī)天津市泰斯特儀器。2要領(lǐng)2.1多糖
5、含量測(cè)定要領(lǐng)蒽酮-硫酸法3。2.4確定最正確作用溫度別離正確稱取川芎1g,參加50l0.8l/L氫氧化鈉溶液,在40,60,80,90,95加熱反響120in。反響完畢后平衡至室溫,離心,取上清液,與蒽酮-硫酸試劑反響,在620n測(cè)吸光度。2.5確定最正確作用料液比別離正確稱取川芎1g,參加50,100,150,200,250l的0.8l/L氫氧化鈉溶液,90加熱120in。反響完畢后平衡至室溫,離心,取上清液,與蒽酮-硫酸試劑反響,在620n測(cè)吸光度。2.6正交實(shí)行本實(shí)行以川芎粉末為研究工具,研究用堿法提取川芎多糖的工藝要領(lǐng),設(shè)定實(shí)行的影響因素為4個(gè),每個(gè)因素取3個(gè)程度。見表1。根據(jù)表1的方
6、案在差異濃度氫氧化鈉溶液、差異料液比、差異溫度下,反響差異時(shí)間后安排至室溫,離心,取上清液,與蒽酮-硫酸試劑反響,在620n測(cè)吸光度。表1正交實(shí)行因素方案略2.7川芎多糖提取率的測(cè)定重復(fù)3次。正確稱取質(zhì)料1g,參加200l0.8l/L氫氧化鈉溶液,在95反響150in。反響完畢后,室溫平衡,用冰醋酸調(diào)治溶液pH值至7,4,4000rin-1離心10in;上清液蒸發(fā)濃縮至50l,再參加5l石油醚,安排30in后蒸餾為恒重為止;按1:5比例和1:1比例別離向溶液中加氯仿和正丁醇,攪拌30in。4,4000rin-1離心15in,取上清液,重復(fù)操縱直到離心后無乳白色沉淀;在溶液中參加1.5%活性炭,
7、靜置30in后過濾,重復(fù)操縱3次;將除色素后溶液參加4倍體積的無水乙醇,在冰箱中留宿;根據(jù)無水乙醇,丙酮,無水乙醚的挨次重復(fù)洗滌多糖,70烘干,得固體多糖,稱其重量,盤算多糖得率%=粗多糖重量/川芎總重量100%。3效果3.1氫氧化鈉溶液濃度對(duì)多糖含量的影響從圖1可知,吸光度隨氫氧化鈉溶液濃度增長而增長,當(dāng)氫氧化鈉溶液濃度到達(dá)0.8l/L時(shí)吸光度到達(dá)最高值,以后那么出現(xiàn)落落趨勢(shì)。因此確定0.8l/L的氫氧化鈉溶液為最正確反響濃度。3.2反響溫度對(duì)多糖含量的影響溫度的凹凸,決定了分子活動(dòng)的猛烈程度,也是反響的決定因素之一。從圖2可得出:吸光度隨反響溫度增長而增長,當(dāng)達(dá)90時(shí)增長開始越發(fā)敏捷并隨后
8、不變,因此最正確反響溫度為90。圖1氫氧化鈉濃度對(duì)川芎多糖溶出的影響略圖2反響溫度對(duì)川芎多糖溶出的影響略3.3反響時(shí)間對(duì)多糖含量的影響由圖3可得到,吸光度先隨著時(shí)間的增長而增長,到達(dá)120in時(shí)吸光度到達(dá)最大值后保持恒定到150in,當(dāng)反響200in后創(chuàng)造上清液顏色加深,在用蒽酮-硫酸法測(cè)溶液中的多糖時(shí)產(chǎn)生炭化征象,無法檢測(cè),因此反響最正確時(shí)間為120in。3.4料液比對(duì)多糖含量的影響從圖4可看出,隨著液固比的增大吸光度也不竭地增長,說明隨著液固比的升高,反響也越發(fā)的徹底,當(dāng)固液比到達(dá)1200g/l時(shí),此時(shí)的吸光值到達(dá)最大,隨后便出現(xiàn)了落落趨勢(shì),即可得到最正確固液比為1200g/l。圖3反響時(shí)
9、間對(duì)川芎多糖溶出的影響略圖4料液比對(duì)川芎多糖溶出的影響略3.5正交實(shí)行效果為了研究單因素之間的彼此影響,以單因素實(shí)行效果為根據(jù),根據(jù)正交組合的原那么,每個(gè)因素選3個(gè)程度,構(gòu)成4因素3程度的正交表,舉行正交實(shí)行,以便選出最正確反響條件。從表2可以得到多糖提取的最正確條件組合:加熱溫度為95,加熱時(shí)間為150in,氫氧化鈉溶液濃度為0.8l/L,料液比1200g/l。從表3的盤算效果中還可以看出各個(gè)因素對(duì)提取多糖的影響巨細(xì):氫氧化鈉溶液濃度加熱時(shí)間加熱溫度料液比。3.6多糖提取率測(cè)定1g川芎在95,加熱時(shí)間150in,氫氧化鈉溶液濃度為0.8l/L,固液比1200g/l的條件下舉行反響,經(jīng)脫脂,去
10、卵白,除色素,乙醇沉淀,枯燥得粗多糖,稱量。重復(fù)3次。得粗多糖的重量別離為25.6,28.7,26.3g,均勻值為26.9g,因此川芎多糖的提取率為2.69%。4討論本文研究了堿法提取川芎多糖的工藝條件。川芎塊根經(jīng)枯燥、破壞,氫氧化鈉溶液處置懲罰后,再經(jīng)脫脂、脫卵白、去色素、乙醇沉淀、枯燥得到川芎粗多糖。也有報(bào)道用堿法從其他植物如大棗渣4、南瓜5、海地瓜6、茯苓皮7中提取多糖,多糖提取率在2%55%之間,而川芎多糖的提取率僅為72.69%,提取率較低。表2正交實(shí)行效果略【參考文獻(xiàn)】1范志超,張志琪.川芎多糖的提取純化及抗氧化性的研究J.天然產(chǎn)物的研究與開拓,2022,17(5):25.2梁忠?guī)r,倪秀珍.中草藥多糖的應(yīng)用研究J.長春師范學(xué)院學(xué)報(bào),2022,201:39.3易劍平,畢雅靜,宋秀榮,等.蒽酮-硫酸法測(cè)定枸杞多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)的研究J.北京產(chǎn)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2022,31(6):643.4楊云,劉福勤,馮衛(wèi)生,等.堿法提取大棗渣多糖及活性炭
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