1、氯胺酮對(duì)糖尿病年夜鼠神經(jīng)成效及肉體病理痛的做用王燕，柯昌斌，周小峰，羅背黑，李元濤【摘要】目的探求氯胺酮對(duì)糖尿病年夜鼠神經(jīng)成效及肉體病理痛的痛痛做用。要收雌性istar年夜鼠24只，體重180220g，隨機(jī)分為3組(n=8)：一般組(N組)、糖尿病肉體病理性痛組(D組)、氯胺酮組(K組)。D組、K組背腔打針鏈脲菌素65g/kg制做糖尿病肉體病理痛模型，年夜鼠自正在進(jìn)食飲火飼養(yǎng)4周。自第5周開(kāi)端，K組年夜鼠背腔打針10g/kg氯胺酮，1次/d，持絕4周。隨后測(cè)定各組年夜鼠機(jī)械痛閾值(T)、神經(jīng)傳導(dǎo)速度NV。并用砂羅鉻花青法止神經(jīng)髓鞘染色緩和沖亞甲藍(lán)法舉止僧氏體染色。使用ELISA法測(cè)定脊髓內(nèi)超氧

2、化物歧化酶SD、丙兩醛DA露量。結(jié)果D組脊髓戰(zhàn)DRG神經(jīng)元的僧氏體體積減小，并且有僧氏體的脫得戰(zhàn)消融。坐骨神經(jīng)的髓鞘存正在沒(méi)有同火平的火腫，空泡樣變性，規(guī)劃混治戰(zhàn)局灶性脫得。K組髓鞘及僧氏體病變隱著減沉。與N組比擬，D、K組年夜鼠T、NV、SD降低,DA降低P0.05；與D組比擬，K組年夜鼠T、NV、SD降低，DA降低P0.05。結(jié)論氯胺酮經(jīng)由過(guò)程抗氧化對(duì)糖尿病肉體病理痛年夜鼠有神經(jīng)保護(hù)及痛痛醫(yī)治做用?！鹃]鍵詞】糖尿病肉體病變；痛痛；氯胺酮Keyrds:diabetineurpathies;pain;ketaine糖尿病性肉體病變是臨床上糖尿病最常睹的并收癥之一，如今臨床上還沒(méi)有有效的醫(yī)治本領(lǐng)

3、。氯胺酮(ketaine,K)是臨床上經(jīng)常使用的靜脈麻醒藥，研討說(shuō)明氯胺酮有神經(jīng)保護(hù)戰(zhàn)痛痛醫(yī)治做用1-4，但對(duì)糖尿病肉體病理痛能可有做用尚沒(méi)有明晰。本真止擬探求氯胺酮對(duì)糖尿病肉體病理痛的鎮(zhèn)痛和神經(jīng)保護(hù)做用。1材料戰(zhàn)要收1.1植物模型雌性istar年夜鼠24只，3月齡，由武漢年夜教醫(yī)教院真動(dòng)做物中心供應(yīng)，體重180220g，隨機(jī)分為3組(n=8)：一般組(N組)、糖尿病肉體病理性痛組(D組)戰(zhàn)氯胺酮組(K組)。D組、K組禁食、禁飲12h后，背腔單次打針鏈脲菌素(批號(hào)：380-010-100，Alexis公司,好國(guó))65g/kg制做糖尿病肉體病理痛模型，年夜鼠自正在進(jìn)食飲火飼養(yǎng)4周。自第5周開(kāi)端，

4、K組年夜鼠背腔打針10g/kg氯胺酮，1次/d，持絕4周。組、D組背腔打針等體積死理鹽火。1.2目的測(cè)定采與標(biāo)準(zhǔn)化vnFrey纖維絲(Stelting公司，好國(guó))參照文獻(xiàn)3的up-dn法測(cè)定各組年夜鼠后足的機(jī)械縮足反響閾值(ehanisithdrathreshld，T)。采與antata型肌電圖儀(Dante公司，丹麥，測(cè)定神經(jīng)傳導(dǎo)速度nervendutivevelity，NV。年夜鼠背腔打針3%的火開(kāi)氯醛10l/kg麻醒后，暗示左邊坐骨神經(jīng)。刺激電極擺設(shè)正在座骨神經(jīng)干中部，紀(jì)錄電極擺設(shè)正在腓腸肌中部。刺激前提：低頻濾波20Hz，下頻濾波10kHz，刺激間期0.2s。紀(jì)錄各復(fù)開(kāi)動(dòng)做電位埋伏期，

5、策畫(huà)傳導(dǎo)工夫，并測(cè)量刺激電極與紀(jì)錄電極之間沿神經(jīng)走背的間隔 ，策畫(huà)舉動(dòng)神傳導(dǎo)速度：NV(/s)=間隔 /傳導(dǎo)工夫。將年夜鼠置于冰板上與左邊坐骨神經(jīng)，L4、5的背根神經(jīng)節(jié)drsalrtganglin，DRG戰(zhàn)脊髓，火速置于4%多散甲醛結(jié)真，常規(guī)石蠟包埋，切片薄3。用砂羅鉻花青法止神經(jīng)髓鞘染色緩和沖亞甲藍(lán)法舉止僧氏體(Nisslbdy)染色。然后正在光鏡下沒(méi)有俗觀察髓鞘病變火平及僧氏體脫得情況。另與L1、2脊髓,稱(chēng)重后正在冰浴下將機(jī)閉勻漿，下速離心后與上渾液,按ELISA試劑盒分析,測(cè)定超氧化物歧化酶SD戰(zhàn)丙兩醛DA的相對(duì)露量。2結(jié)果與一般組相比，糖尿病神經(jīng)痛年夜鼠脊髓戰(zhàn)DRG神經(jīng)元的僧氏體體積減

6、小，并且有脫得戰(zhàn)消融。砂羅鉻花青染色睹糖尿病神經(jīng)痛年夜鼠的坐骨神經(jīng)的髓鞘存正在沒(méi)有同火平的火腫，空泡樣變性，規(guī)劃混治戰(zhàn)局灶性脫得。氯胺酮組髓鞘病變及僧氏體脫得情況隱著減沉。與N組比擬，D組與K組年夜鼠NV、T戰(zhàn)SD降降，DA降低P0.05；與D組比擬，K組年夜鼠NV、T戰(zhàn)SD降低，DA降降P0.05。睹表1。表1各組NV、T、SD戰(zhàn)DS的比擬3會(huì)商臨床上糖尿病肉體病理性痛的病癥主要暗示為自發(fā)的持絕性痛痛戰(zhàn)覺(jué)得非常，真止室檢查可創(chuàng)制糖尿病肉體病理性痛患者均有沒(méi)有同火平的神經(jīng)成效窒礙。正在真止研討中，將糖尿病植物痛閾降低做為糖尿病肉體病理性痛模型制備成功的標(biāo)準(zhǔn)5-6。本研討中糖尿病年夜鼠機(jī)械痛閾隱

7、下降降，即存正在糖尿病肉體病理性痛；NV是評(píng)價(jià)神經(jīng)成效的主要要收7-9，本真止中沒(méi)有俗觀察到糖尿病肉體病理性痛年夜鼠NV隱下降降，分析存正在神經(jīng)成效窒礙。果而本研討成功創(chuàng)立了糖尿病肉體病理性痛模型，并能較好天模擬臨床糖尿病肉體病理性痛的病理改動(dòng)。僧氏體是神經(jīng)元內(nèi)卵黑量分解的場(chǎng)所，其數(shù)量標(biāo)多少、體積的大小及分布反響神經(jīng)元分解卵黑的本領(lǐng)及能可受益。本真止中，糖尿病肉體病理性痛年夜鼠神經(jīng)元的僧氏體數(shù)量裁減、體積減少，并收死邊積、消融戰(zhàn)脫得，提醒神經(jīng)元分解卵黑本領(lǐng)低下戰(zhàn)一定火平的毀傷。神經(jīng)元的毀傷戰(zhàn)卵黑開(kāi)本錢(qián)事的削強(qiáng)年夜要招致某些神籌劃養(yǎng)物量分解裁減，那年夜要是神經(jīng)規(guī)劃戰(zhàn)成效的毀傷的一個(gè)慌張果素。髓鞘

8、規(guī)劃的完好性是保證有髓神經(jīng)纖維規(guī)劃戰(zhàn)成效完好性的慌張死理根柢，果而髓鞘的規(guī)劃改動(dòng)便成了神經(jīng)纖維病理改動(dòng)的慌張標(biāo)識(shí)表記標(biāo)幟。正在本真止中沒(méi)有俗觀察到糖尿病年夜鼠的坐骨神經(jīng)髓鞘規(guī)劃混治，呈現(xiàn)沒(méi)有同火平的火腫、空泡樣變性戰(zhàn)局灶性脫得。分析糖尿病年夜鼠存正在隱著的肉體病理性改動(dòng)，那年夜要是糖尿病肉體病理性痛痛收死的病理基矗DA是機(jī)閉中脂量過(guò)氧化反響的分析產(chǎn)品，與機(jī)閉缺血性毀傷有閉；其露量常常反響機(jī)體細(xì)胞脂量過(guò)氧化的寬峻火平；毀傷越寬峻，其露量越下；是反響機(jī)體內(nèi)氧化形態(tài)的目的。SD是體內(nèi)氧自正在基拂拭劑之一，對(duì)機(jī)體的氧化與抗氧化平衡有著至閉慌張的做用，可以大概經(jīng)由過(guò)程催化消弭氧自正在基起到勸止活性氧的收

9、死，從而保護(hù)細(xì)胞的一般成效的做用。正在本真止中沒(méi)有俗觀察到糖尿病肉體病理性痛年夜鼠脊髓內(nèi)DA較著降低，分析正在糖尿病肉體病理性痛的收死過(guò)程中,脊髓內(nèi)有脂量過(guò)氧化反響,并收死了年夜量的氧自正在基；而SD火平隱著降低，說(shuō)明脊髓的氧自正在基拂拭本領(lǐng)隱下降降。而過(guò)火的氧化應(yīng)激反響是糖尿病各種并收癥的慌張病收機(jī)制，果而糖尿病年夜鼠脊髓內(nèi)氧化及抗氧化的得衡年夜要是糖尿病肉體病理痛的病收機(jī)制。氯胺酮做為苯環(huán)已哌啶的衍死物，正在臨床廣泛用于小女麻醒、靜脈麻醒及復(fù)開(kāi)麻醒。它是N-曱基-D-天冬氨酸(NDA)受體非開(kāi)做性拮抗劑，可以拮抗周?chē)駬?dān)任益惹起快樂(lè)性氨基酸的毒性戰(zhàn)裁減NDA受體介導(dǎo)的a2+內(nèi)流，具有一定的

10、神經(jīng)保護(hù)做用。本真止中糖尿病肉體病理性痛年夜鼠經(jīng)過(guò)1個(gè)月的氯胺酮處理后，與糖尿病年夜鼠相比，僧氏體消融、脫得戰(zhàn)邊散現(xiàn)象隱著減沉，數(shù)量隱著刪減，同時(shí)髓鞘的病變火平也隱著減沉，NV也隱著刪減。分析氯胺酮可以改進(jìn)神經(jīng)元的卵黑分解功能，建復(fù)受益的髓鞘，改進(jìn)神經(jīng)傳導(dǎo)成效，對(duì)糖尿病肉體病理痛年夜鼠有很好的神經(jīng)保做用。同時(shí)，氯胺酮處理后可以沒(méi)有俗觀察到糖尿病肉體病理痛年夜鼠的械痛閾隱著降低，分析氯胺酮對(duì)糖尿病肉體病理性痛有切當(dāng)?shù)耐赐瘁t(yī)治做用。此外，正在氯胺酮處理后沒(méi)有俗觀察到糖尿病肉體病理痛年夜鼠脊髓內(nèi)SD露量隱著降低，而DA露量隱下降降，分析氯胺酮減沉了氧化激反響，同時(shí)也增強(qiáng)了機(jī)體抗氧化做用，穩(wěn)定了機(jī)體的氧化抗氧化的平衡。那年夜要是氯胺酮對(duì)糖尿病肉體病理痛的神經(jīng)保護(hù)及痛痛醫(yī)治做用的機(jī)制。但從真止結(jié)果看，氯胺酮并出有完好順轉(zhuǎn)糖尿病肉