1、資料收集于網(wǎng)絡(luò)如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除感謝坐骨神經(jīng) -腓腸肌標(biāo)本制備一、試驗(yàn)?zāi)康囊?、學(xué)習(xí)蛙類(lèi)動(dòng)物單毀髓與雙毀髓的方法；2、學(xué)習(xí)并把握坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本及腓腸肌標(biāo)本的制備方法；3、明白電刺激的極性法就；二、試驗(yàn)原理1、蛙或蟾蜍等兩棲類(lèi)動(dòng)物的一些基本生命活動(dòng)和生理功能與溫血?jiǎng)游锵嘞?而其離體組織生活條件易于把握,在任氏液的浸潤(rùn)下,神經(jīng)肌肉標(biāo)本可較長(zhǎng)時(shí)間保持生理活性；因此,在生理學(xué)試驗(yàn)中常用蛙或蟾蜍坐骨神經(jīng)腓腸肌離體標(biāo)原來(lái)觀看神經(jīng)肌肉的興奮性、興奮過(guò)程以及骨骼肌收縮特點(diǎn)等；2、細(xì)胞的靜息膜電位為外正內(nèi)負(fù),電刺激可轉(zhuǎn)變可興奮細(xì)胞的膜電位差；膜電位減小時(shí),細(xì)胞去極化,細(xì)胞興奮；膜電位增大時(shí),細(xì)胞超極

2、化,細(xì)胞興奮性被抑制；蘸有任氏液的鋅銅弓接觸活組織時(shí),可產(chǎn)生沿鋅片活組織銅片流向的電流對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生刺激效應(yīng)；三、試驗(yàn)材料和儀器1、試驗(yàn)材料：牛蛙2、試驗(yàn)器材：手術(shù)剪、手術(shù)鑷、手術(shù)刀、眼科剪、眼科鑷、毀髓針、蛙板、固定針、滴管、培育皿、玻璃分針?shù)\銅弓、污物缸、粗棉線、任氏液四、試驗(yàn)步驟1、 洗凈試驗(yàn)動(dòng)物 毀髓 剝制后肢 分別坐骨神經(jīng) 游離腓腸肌 游離股骨頭 標(biāo)本檢驗(yàn) 電刺激極性法就的驗(yàn)證2、雙毀髓一只手握住牛蛙,使其背部向上；用拇指壓住牛蛙背部,食指按壓其頭部前端,另一只手持毀髓針, 由兩眼之間沿中線向下觸劃,觸及凹陷處即為枕骨大孔；將毀髓針垂直刺入枕骨大孔；將針尖向前刺入顱腔內(nèi)攪動(dòng),此時(shí)為單毀髓

3、；將毀髓針退回枕骨大孔,針尖轉(zhuǎn)向后方,與脊椎平行刺入椎管內(nèi)搗毀脊髓,完成雙毀髓；3、坐骨神經(jīng) -腓腸肌標(biāo)本制備（1）剝制后肢標(biāo)本 :輕提雙毀髓蛙,自背面恥骨聯(lián)合上方約 1 公分處橫向剪斷脊柱；輕輕托起后肢, 看清坐骨神經(jīng)位置,沿脊柱兩側(cè)橫向切口剪斷體壁,去除斷口以上肢體和內(nèi)臟放入污物缸；剝?nèi)ズ笾つw后放入任氏液中備用；（2）分別兩后肢： 用粗剪刀縱向剪開(kāi)脊柱,并剪斷兩后肢相連的肌肉,一只用于剝制標(biāo)本,一只放入任氏液中儲(chǔ)存；（3）分別坐骨神經(jīng)： 將后肢標(biāo)本脊柱端腹面對(duì)上,趾端向外側(cè)用蛙釘將標(biāo)本固定在蛙板上；先在腹腔面用玻璃分針沿脊柱游離坐骨神經(jīng) ,然后在標(biāo)本的背側(cè)于股二頭肌與半膜肌的肌肉縫內(nèi)將坐

4、骨神經(jīng)與周邊的結(jié)締組織分別直到腘窩,剪斷肌肉；但不要傷及神經(jīng), 其分支待以后用手術(shù)剪（4）游離腓腸?。和瑯佑貌ＡХ轴槍㈦枘c肌與其下的結(jié)締組織分別并在其跟腱處穿線、結(jié)扎；（5）分別股骨頭：捏住股骨,剪去并刮凈四周肌肉,保留股骨的后2/3,剪斷股骨 ; （6）檢驗(yàn)標(biāo)本：用手術(shù)鑷輕提標(biāo)本的脊椎片,再用經(jīng)任氏液蘸濕的鋅銅弓接觸坐骨神經(jīng),如腓腸肌發(fā)生收縮,就表示標(biāo)本機(jī)能正常；輕提腓腸肌上的結(jié)扎線,將標(biāo)本放入任氏液中保存 15-20 分鐘后進(jìn)行試驗(yàn)；（7）電刺激的極性法就驗(yàn)證：用棉線在神經(jīng)干中間部位進(jìn)行結(jié)扎,以阻斷神經(jīng)傳導(dǎo)興奮的才能； 用鋅銅弓跨過(guò)結(jié)扎線刺激坐骨神經(jīng)干；使鋅極在腓腸肌一端刺激,觀看腓腸肌收

5、縮發(fā)生在通電（接觸神經(jīng)干）時(shí)仍是斷電（離開(kāi)神經(jīng)干）時(shí)；調(diào)轉(zhuǎn)鋅銅弓的極性,使銅極在腓腸精品文檔資料收集于網(wǎng)絡(luò)如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除感謝肌一端刺激, 觀看腓腸肌收縮實(shí)在通電時(shí)仍是斷電時(shí)；縮強(qiáng)度是否一樣,那個(gè)收縮強(qiáng)度比較大？五、留意事項(xiàng)比較不同極性電極刺激時(shí)腓腸肌的收1、防止血液污染標(biāo)本,壓擠、損耗和用力牽拉標(biāo)本,不行用金屬器械觸碰神經(jīng)干；2、在操作過(guò)程中,應(yīng)給神經(jīng)和肌肉滴加任氏液,防止表面干燥,以免影響標(biāo)本的興奮性；3、標(biāo)本制成后須放在任氏液中浸泡數(shù)分鐘,使標(biāo)本興奮性穩(wěn)固,再開(kāi)頭試驗(yàn)成效會(huì)較好；六、試驗(yàn)結(jié)果通過(guò)任氏液浸泡,刺激后, 看到肌肉有收縮的反應(yīng),調(diào)換電極進(jìn)行刺激后也同樣有收縮反應(yīng)；通過(guò)銅鋅

6、與鋅銅的兩種刺激比較后,銅鋅更強(qiáng)；七、總結(jié)通過(guò)本次試驗(yàn)更加深刻的熟識(shí)了肌細(xì)胞收縮的機(jī)制,熟識(shí)了單毀髓與雙毀髓的方法和操作,把握 l 坐骨神經(jīng) -腓腸肌標(biāo)本及腓腸 肌標(biāo)本的制備方法的基本操作；由于試驗(yàn)過(guò)程中提取腓腸肌時(shí)候,肌肉過(guò)度興奮,進(jìn)行電極刺激時(shí)現(xiàn)象不是特別明顯；綜上所述試驗(yàn)時(shí)需當(dāng)心操作,盡量防止肌肉失活；八、摸索題1、剝?nèi)テつw的后肢,能用自來(lái)水沖洗嗎？為什么？答：不能； 由于自來(lái)水中仍有例如氯離子、鈣離子等很多離子,它們會(huì)影響細(xì)胞膜的點(diǎn)位分布, 最終就會(huì)影響到刺激反應(yīng)現(xiàn)象的觀看；誓言材料上,也會(huì)影響試驗(yàn)成效的；另外自來(lái)水里有很多微生物假如它們附著與2、金屬器械碰壓、觸及或損耗神經(jīng)及腓腸肌,

7、可能引起哪些不良后果？答：金屬器械碰壓、 觸及或損耗神經(jīng)及腓腸肌會(huì)損耗腓腸肌細(xì)胞膜,使肌肉中的神經(jīng)收到過(guò)度刺激,而過(guò)度興奮最終失活,刺激時(shí)候就沒(méi)有現(xiàn)象；3、如何保持標(biāo)本的機(jī)能正常？答：第一在制備腓腸肌的過(guò)程時(shí),金屬器械不要碰及、損耗神經(jīng)或腓腸肌,以及試驗(yàn)者不要觸遇到肌肉；其次,過(guò)程中要保持腓腸肌的潮濕,常加任氏液,最好先泡一會(huì)；另外,在第一次電刺激后,需要讓肌肉休息一段時(shí)間,在進(jìn)行下一次刺激；試驗(yàn)一 蟾蜍坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備一、試驗(yàn)?zāi)康陌盐罩苽渚哂姓Ｅd奮收縮功能的蛙類(lèi)坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本基本操作技術(shù),把握蛙類(lèi)手術(shù)器械的使用方法；二、材料和方法1、材料蟾蜍；任氏液；探針、剪刀、培育皿、瓷盆、玻

8、璃分針、蛙板、玻璃板、大頭針、鑷子、線、鋅銅弓；2、試驗(yàn)方法2.1 毀腦脊髓 取蟾蜍一只,用左手握住,以食指壓其頭部前端使其盡量前俯,右手持探針自枕骨大孔處垂直刺入,到達(dá)椎管,即將探針轉(zhuǎn)變方向刺入顱腔,向各側(cè)不斷攪動(dòng),完全搗毀腦組織；再將探針原路退出,刺向尾側(cè),捻動(dòng)探針使逐步刺入整個(gè)椎管內(nèi),搗毀脊髓；此時(shí)蟾蜍下頜呼吸運(yùn)動(dòng)應(yīng)消逝,四肢松軟,即成為一毀腦脊髓的蟾蜍；否就須按上法再精品文檔資料收集于網(wǎng)絡(luò)如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除感謝行搗毀；2.2 剪除軀干上部及內(nèi)臟用粗剪刀在顱骨后方剪斷脊柱；左手握住蟾蜍脊柱,右手將粗剪刀沿兩側(cè)（躲開(kāi)坐骨神經(jīng)）上部及內(nèi)臟組織,棄于瓷盆內(nèi)；剪開(kāi)腹壁；此時(shí)軀干上部及內(nèi)臟即全

9、部下垂；剪除全部軀干2.3 剝皮躲開(kāi)神經(jīng), 用右手拇指和食指夾住脊柱,左手捏住皮膚邊緣,逐步向下?tīng)坷瓌冸x皮膚；拉至大腿時(shí),如阻力較大,可先剝下一側(cè),再剝另一側(cè)；將全部皮膚剝除后,將標(biāo)本置于盛有任氏液的培育皿中；2.4 洗凈雙手和用過(guò)的全部手術(shù)器械,再進(jìn)行以下步驟；2.5 分別雙腿 躲開(kāi)坐骨神經(jīng), 用粗剪刀從背側(cè)剪去骶骨,然后沿中線將脊柱剪成左右兩半,再?gòu)膼u骨聯(lián)合中心剪開(kāi)（為保證兩側(cè)坐骨神經(jīng)完整,應(yīng)防止剪時(shí)偏向一側(cè)）；將已分離的標(biāo)本浸入盛有任氏液的培育皿中；2.6 游離坐骨神經(jīng) 取腿一條, 先用剝離分針沿脊柱側(cè)游離坐骨神經(jīng)腹腔部,然后用大頭針將標(biāo)本背位固定于潔凈蛙板上；用玻璃分針循股二頭肌和半膜

10、肌之間的坐骨神經(jīng)溝,縱向分別暴露坐骨神經(jīng)之大腿部分,直至分別至腘窩頸神經(jīng)分叉處；然后剪斷股二頭肌腱、半膜肌和半膜肌肌腱,并繞至前方剪斷股四頭肌腱；自上向下剪斷所以坐骨神經(jīng)分支；將連著3-4 節(jié)椎骨的坐骨神經(jīng)分別出來(lái)；2.7 完成坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本將已游離的坐骨神經(jīng)搭在腓腸肌上；用粗剪刀自膝關(guān)節(jié)周?chē)蛏霞舫⒐蝺羲源笸燃∪?在距膝關(guān)節(jié)省 分即為坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本；1cm 處剪斷股骨；棄去上段股骨,保留部2.8 完成坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本 用尖子鑷子在上述坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的跟腱下方穿 孔,穿線結(jié)扎之；提起結(jié)扎線,在結(jié)扎線下方剪斷跟腱,并逐步游離腓腸肌至膝關(guān)節(jié)處,左 手握住標(biāo)本的股骨部分,使已游離的坐骨

11、神經(jīng)和腓腸肌下垂,右手持粗剪刀水平方向伸進(jìn)腓 左手保留部分即為附著于股骨之 腸肌與小腿之間, 在膝關(guān)節(jié)處剪斷,與小腿其余部分分別；上的、具有坐骨神經(jīng)支配的腓腸肌標(biāo)本；將標(biāo)本浸入盛有新奇任氏液的培育皿中待用；2.9 試驗(yàn)觀看 2.9.1 蟾蜍毀腦脊髓前后四肢肌張力的變化；2.9.2 用鋅銅弓分別刺激坐骨神經(jīng)和腓腸肌,觀看肌肉的反應(yīng)；三、試驗(yàn)結(jié)果 用鋅銅弓刺激坐骨神經(jīng)時(shí)腓腸肌發(fā)生收縮；四、分析 鋅銅弓用金屬鋅和銅鉚接而成,鋅銅弓在極性溶液中形成回路時(shí),鋅與銅兩極產(chǎn)生約0.5-0.7V 的直流電壓,電流的刺激作用于神經(jīng)肌肉標(biāo)本,由于產(chǎn)生生物電流,因而引起肌肉 的收縮；制備標(biāo)本的過(guò)程中,要不斷滴加任氏液,以防標(biāo)本干燥, 丟失正常生理活性；操作過(guò)程中應(yīng)防止強(qiáng)力牽拉和手捏神經(jīng)或夾傷神經(jīng)肌肉；入操作者眼內(nèi)或污染試驗(yàn)標(biāo)本；五、結(jié)論毀腦脊髓時(shí)防止蟾蜍皮膚分泌的蟾蜍毒液射蛙類(lèi)的某些基本生命活動(dòng)和生理功能與哺乳類(lèi)動(dòng)